构建启动子文库的方法
    32.
    发明公开

    公开(公告)号:CN114908426A

    公开(公告)日:2022-08-16

    申请号:CN202210029814.2

    申请日:2022-01-12

    摘要: 本发明属于生物技术技术领域,具体涉及一种构建启动子文库的方法,其包括:获取基因组序列和序列注释;根据序列注释设置启动子位置信息;根据启动子位置信息进行筛选,获取启动子序列以构建启动子文库;根据启动子序列设计用于一步克隆法连接的引物;根据引物获得启动子片段;根据启动子片段构建重组载体;对重组载体转化并提取质粒;以及将质粒转化后获得不同强度的启动子,实现了全基因组尺度上的启动子挖掘,并通过虚拟筛选和实验筛选得到不同强度的启动子,该启动子文库的构建方法也可应用于其他微生物天然启动子的挖掘与筛选。

    一株变形假单胞菌tonB基因沉默菌株及其应用

    公开(公告)号:CN113528407A

    公开(公告)日:2021-10-22

    申请号:CN202110603157.3

    申请日:2021-05-31

    申请人: 集美大学

    摘要: 本发明提供了一株变形假单胞菌tonB基因沉默菌株及其应用。所述菌株为Pseudomonas plecoglossicidatonB‑RNAi,已于2020年12月18日于中国典型培养物保藏中心保藏,保藏号为CCTCC NO:M 2020919。本发明的变形假单胞菌tonB基因沉默菌株与野生菌株相比,对斜带石斑鱼的致病力极显著下降,而且能够引起斜带石斑鱼脾脏转录组发生显著变化,因此该菌株能用于研究变形假单胞菌的致病机理,特别是从感染斜带石斑鱼以及物质运输角度研究变形假单胞菌的致病机理有着独特的优势。

    一种多环芳烃降解工程菌及其工程改造方法和应用

    公开(公告)号:CN109182233B

    公开(公告)日:2021-09-24

    申请号:CN201810900746.6

    申请日:2018-08-09

    申请人: 天津大学

    摘要: 本发明涉及一种多环芳烃降解工程菌及其工程改造方法和应用。从铜绿假单胞菌SA1克隆得到编码环裂解双加氧酶的降解基因——catA2基因,核苷酸序列如SEQ ID No.1所示;特异性oprL启动子核苷酸序列如SEQ ID No.2;选择广宿主质粒pBBR1MCS‑5为载体;catA2基因和oprL启动子分别克隆至pBBR1MCS‑5载体中,转入受体细胞中克隆扩增,筛选阳性克隆得到目标重组载体pBBR1MCS‑5‑oprL‑catA2;利用铜绿假单胞菌SA1作为宿主,将重组载体pBBR1MCS‑5‑oprL‑catA2通过电击法转化入铜绿假单胞菌种,构建工程铜绿假单胞菌。具有对多环芳烃的降解能力。