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公开(公告)号：CN103074232B
公开(公告)日：2014-05-07
申请号：CN201110329273.7
申请日：2011-10-26
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明公开了一种生产α-酮戊二酸的方法及其专用菌株。本发明提供的伞枝犁头霉(Lichtheimia？corymbifera)D1，它的保藏编号为CGMCC？No.4974。本发明所提供的伞枝犁头霉D1，菌种稳定性好、具有较好的产α-酮戊二酸能力、发酵成本较低(底物来源广泛，价格便宜)，具有较好的工业化应用前景。本发明还对伞枝犁头霉D1的发酵条件进行了优化。本发明方法生产α-酮戊二酸，具有较好的科研价值和工业化应用前景。
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公开(公告)号：CN103045562A
公开(公告)日：2013-04-17
申请号：CN201110311080.9
申请日：2011-10-14
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明公开了一种α-半乳糖苷酶及其编码基因和应用。本发明提供的蛋白，是如下(a)或(b)或(c)：(a)由序列表中序列1自N末端第24至751位氨基酸残基组成的蛋白质；(b)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(c)将(a)或(b)的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有α-半乳糖苷酶活性的由序列1衍生的蛋白质。本发明提供的蛋白作为α-半乳糖苷酶具有如下酶学性质：最适pH为4.5，在pH 4-10范围内稳定；最适温度为60℃，且在55℃以内稳定，在55℃保温30min酶活几乎不变，60℃下保温30min仍残留70％的活性，表现出较好的热稳定性。本发明提供的蛋白在工业应用中具有较大潜力。
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公开(公告)号：CN102732541A
公开(公告)日：2012-10-17
申请号：CN201110089691.3
申请日：2011-04-11
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明公开了一种木聚糖酶的表达方法及其专用DNA片段。该DNA片段的编码序列如序列表中序列1的第58-1044所示或者如序列表中序列1所示。将该片段导入毕赤酵母后经行高密度发酵，上清液酶活达到最高，为41,000U/mL，粗蛋白含量达10.1g/L。杨梦华等(微生物学报，2005，45(2)：236-240))将该基因在毕赤酵母的进行表达，经5L发酵罐诱导培养5d后，重组木聚糖酶分泌表达量为207mg/L。因此，该研究经过密码子优化，大大提高了该基因的表达量，为其工业化应用提供了重要途径。
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公开(公告)号：CN101647998B
公开(公告)日：2011-11-23
申请号：CN200810118359.3
申请日：2008-08-14
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： A61K38/16 , A61P35/00 , A61P35/02 , A61K36/481
摘要： 本发明公开了蒙古黄芪凝集素的一种新用途。所述蒙古黄芪凝集素的新用途，是指蒙古黄芪凝集素在抑制肿瘤生长，特别是抑制宫颈癌细胞HeLa、白血病细胞K562和人骨瘤细胞MG63增殖中的应用。所述蒙古黄芪凝集素，是按照如下方法制备的：1)将蒙古黄芪的根粉碎后用现有的方法进行浸提，如采用磷酸缓冲液浸提，分离上清液得到蒙古黄芪粗提液；2)将上述步骤1)得到的粗提液盐析，如硫酸铵进行沉淀，沉淀用Tris-HCl缓冲液溶解，再将溶解液透析，透析后的溶液离心，获得上清液；3)将上述步骤2)获得的上清液用ConA-Sepharose 4B亲和层析柱进行层析，再将层析后的溶液透析，透析后的溶液浓缩得到蒙古黄芪凝集素。
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公开(公告)号：CN101775385A
公开(公告)日：2010-07-14
申请号：CN201010115773.6
申请日：2010-03-01
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明公开了一种β-1，3-1，4-葡聚糖酶及其编码基因。本发明提供的β-1，3-1，4-葡聚糖酶是如下1)或2)或3)的蛋白质：1)由序列表中序列2的第19-314位所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；3)将序列表中序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有β-1，3-1，4-葡聚糖酶活性的由1)衍生的蛋白质。将该蛋白的编码基因导入毕赤酵母后构成的重组毕赤酵母也属于本发明的保护范围。实验证明：重组毕赤酵母发酵液上清酶活最高达55,300U/mL，粗蛋白9.1g/L。本发明的β-1，3-1，4-葡聚糖酶最适反应温度为70℃，最适pH值为7.0。该β-1，3-1，4-葡聚糖酶在生产中具有很大的推广应用潜力。
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公开(公告)号：CN101647998A
公开(公告)日：2010-02-17
申请号：CN200810118359.3
申请日：2008-08-14
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： A61K38/16 , A61P35/00 , A61P35/02 , A61K36/481
摘要： 本发明公开了蒙古黄芪凝集素的一种新用途。所述蒙古黄芪凝集素的新用途，是指蒙古黄芪凝集素在抑制肿瘤生长，特别是抑制宫颈癌细胞HeLa、白血病细胞K562和人骨瘤细胞MG63增殖中的应用。所述蒙古黄芪凝集素，是按照如下方法制备的：1)将蒙古黄芪的根粉碎后用现有的方法进行浸提，如采用磷酸缓冲液浸提，分离上清液得到蒙古黄芪粗提液；2)将上述步骤1)得到的粗提液盐析，如硫酸铵进行沉淀，沉淀用Tris-HCl缓冲液溶解，再将溶解液透析，透析后的溶液离心，获得上清液；3)将上述步骤2)获得的上清液用ConA-Sepharose 4B亲和层析柱进行层析，再将层析后的溶液透析，透析后的溶液浓缩得到蒙古黄芪凝集素。
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公开(公告)号：CN100400665C
公开(公告)日：2008-07-09
申请号：CN200510082992.8
申请日：2005-07-08
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明公开了一种组成型表达载体及其应用。该组成型表达载体依次含有PMA1启动子序列，多形汉逊酵母rDNA序列，酿酒酵母α因子前导肽序列编码基因，毕赤酵母醇氧化酶基因终止序列和耐高温木聚糖酶基因；所述PMA1启动子的碱基序列如SEQ ID NO：1所示，多形汉逊酵母rDNA序列的碱基序列如SEQ ID NO：2所示，酿酒酵母α因子前导肽序列编码基因的碱基序列如SEQ ID NO：3所示。表达耐高温木聚糖酶的方法，是培养含有上述组成型表达载体的多形汉逊酵母菌株72-80小时，得到耐高温木聚糖酶。
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公开(公告)号：CN1506461A
公开(公告)日：2004-06-23
申请号：CN02156022.6
申请日：2002-12-11
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明公开了由海栖热袍菌MSB8(Thermotogamaritima MSB8)基因组DNA借助PCR扩增而得到的木聚糖酶B基因(xylanase B gene，xynB)，和构建表达载体在大肠杆菌中表达出该基因编码的重组木聚糖酶。该酶的最适反应温度为90℃，在中性和偏碱性环境中热稳定性好，木聚糖酶酶活力是纤维素酶活力的1100倍以上。该酶作为助漂剂应用于制浆造纸行业表现出良好的应用前景。水解木聚糖的主要产物以木二糖为主，适合分解半纤维素中的木聚糖生产功能性低聚木糖。
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公开(公告)号：CN118460522A
公开(公告)日：2024-08-09
申请号：CN202410679112.8
申请日：2024-05-29
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12N9/88 , C12N15/60 , C12N15/81 , C12N1/19 , A23L33/21 , C12P19/12 , C12P19/00 , C12P19/04 , C12R1/84
摘要： 本发明公开了一种褐藻胶裂解酶及其编码基因与应用。本发明属于生物技术领域，具体涉及一种褐藻胶裂解酶及其编码基因与应用。本发明的重组蛋白质，为如下任一所述的蛋白质：1)氨基酸序列为序列表中序列2的蛋白质；2)氨基酸序列为序列表中序列2的第20至299位的蛋白质。该酶在45℃，300U/g，反应6h，水解25％褐藻酸钠的水解率为80.5％，还原糖含量为76mg/mL，得到可溶性膳食纤维重均分子量(Mw)为11.75kDa，对乳酸杆菌和双歧杆菌菌株的生长均有显著的促进作用。本发明的蛋白质具有高褐藻胶裂解酶活力，良好的酶学性质和高催化效率，在制备低粘度可溶性膳食纤维方面具有良好应用价值。
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