产2'-岩藻糖基乳糖的重组大肠杆菌的构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN116676243A

    公开(公告)日:2023-09-01

    申请号:CN202211037018.X

    申请日:2022-08-25

    摘要: 本发明公开了产2'‑岩藻糖基乳糖的重组大肠杆菌及其构建方法与应用。该重组大肠杆菌为下述任一种:1)含有α‑1,2‑岩藻糖基转移酶和L‑岩藻糖激酶/GDP‑L‑岩藻糖焦磷酸化酶基因;2)含有1)的基因,不含有β‑半乳糖苷酶基因、UDP‑葡萄糖脂质载体转移酶基因、岩藻糖异构酶基因、墨角藻糖激酶基因、阿拉伯糖异构酶基因和鼠李糖异构酶基因中的至少一种;3)除具有2)的特征外,还含有岩藻糖转运蛋白基因和/或乳糖通透酶基因;4)除具有3)的特征外,不含有外膜脂质合成和修饰相关的基因;5)除具有4)的特征外,不含有外膜脂多糖合成、修饰和/或转运相关的基因。该重组大肠杆菌可用于工业化生产2'‑岩藻糖基乳糖。

    泡盛曲霉β-1,3-1,4-葡聚糖酶的表达纯化方法

    公开(公告)号:CN110205313B

    公开(公告)日:2021-10-15

    申请号:CN201910479903.5

    申请日:2019-06-04

    摘要: 本发明公开了泡盛曲霉β‑1,3‑1,4‑葡聚糖酶的表达纯化方法。本发明提供了一种生产β‑1,3‑1,4‑葡聚糖酶的方法,包括将泡盛曲霉β‑1,3‑1,4‑葡聚糖酶编码基因导入受体酵母;将重组酵母于BSM培养基培养,待甘油消耗完全进行甘油补料发酵阶段、甲醇补料诱导表达阶段和混合补料诱导表达阶段。本发明工程菌经高密度发酵,发酵液酶活可达159500U/mL(蛋白含量31.7mg/mL)。所产β‑1,3‑1,4‑葡聚糖酶最适pH5.0,在pH 2.0‑9.0保持稳定;最适温度55℃,在60℃以下保持高酶活力;底物特异性专一。本发明在食品、饲料等行业具有应用价值。

    一种米黑根毛霉来源的β-1,3-葡聚糖酶及其应用

    公开(公告)号:CN107893061B

    公开(公告)日:2021-07-16

    申请号:CN201711125875.4

    申请日:2017-11-15

    摘要: 本发明公开了一种米黑根毛霉来源的β‑1,3‑葡聚糖酶及其应用。该酶为嗜热真菌米黑根毛霉来源的内切型β‑1,3‑葡聚糖酶(RmLam81A),特异作用于可得然多糖中的β‑1,3‑糖苷键。利用毕赤酵母进行异源表达,经高密度发酵培养,最终酶活力可达694U/mL。本发明以食品级β‑1,3‑葡聚糖(可得然多糖、昆布多糖及酵母葡聚糖等)为原料,酶解得到聚合度(DP)2‑5的β‑1,3‑葡寡糖,可溶性寡糖得率约75‑85%,水解液经渣液分离、料液浓缩和喷雾干燥得到β‑1,3‑葡寡糖。本发明所公开的β‑1,3‑葡聚糖酶具有优良的酶学性质,与已公开的化学或酶法制备β‑1,3‑葡寡糖方法相比,反应条件温和、环境友好、寡糖得率较高,在酶法制备β‑1,3‑葡寡糖中具有重要的应用价值。

    一种米黑根毛霉α-淀粉酶及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN108165540A

    公开(公告)日:2018-06-15

    申请号:CN201810139908.9

    申请日:2018-02-11

    摘要: 本发明涉及一种米黑根毛霉α‑淀粉酶及其编码基因与应用。本发明提供的蛋白质具有α‑淀粉酶活力,该蛋白质的基因在毕赤酵母中高效表达,经毕赤酵母高密度发酵后的最高酶活为29794.2U/mL,纯化后的比酶活为3502.1U/mg,最适反应pH为6.0,在pH 4.5‑8.0保持稳定;最适反应温度为75℃,在65℃以下保持较高酶活力,具有较好的耐热性。所述酶应用于馒头中,能使馒头比容增大7.7%,同时能延缓馒头老化;应用于麦芽糖生产中,麦芽糖含量能够达到54.1%。所述酶在食品行业中具有良好的应用潜力。

    一种β-甘露聚糖酶mRmMan5A及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN105821020A

    公开(公告)日:2016-08-03

    申请号:CN201610324502.9

    申请日:2016-05-17

    摘要: 本发明涉及一种β?甘露聚糖酶mRmMan5A及其编码基因与应用。本发明所述的β?甘露聚糖酶mRmMan5A,与原始β?甘露聚糖酶RmMan5A相比具有以下优点:最适pH低,为4.5,最适温度高,为65℃。与以前所报道的β?甘露聚糖酶相比,在食品、饲料等行业中具有更大的应用价值。将该蛋白的编码基因导入毕赤酵母中构成的工程菌发酵液的β?甘露聚糖酶的酶活力可达72626U/mL(蛋白含量为9.1mg/mL),实现了高效表达。将该β?甘露聚糖酶用于水解汽爆处理后的棕榈粕,水解液中主要为聚合度为2?4之间的甘露寡糖,甘露寡糖得率为19.6%,甘露聚糖转化率约为60%。

    一种角质酶及其制备方法与生产专用菌株

    公开(公告)号:CN103589645B

    公开(公告)日:2015-11-18

    申请号:CN201210286810.9

    申请日:2012-08-13

    摘要: 本发明公开了一种角质酶及其制备方法与生产专用菌株。本发明所提供的角质酶生产专用菌株为太瑞斯梭孢壳(Thielavia terrestris)CAU709,它在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.6233。本发明提供的所述太瑞斯梭孢壳(Thielavia terrestris)CAU709,CGMCC No.6233,具有高产角质酶的能力,通过硫酸铵沉淀、弱阳离子层析和强阴离子层析得到10%回收率的高纯度角质酶。热稳定性和pH稳定性分析表明:该角质酶在65℃以下具有很好的热稳定性并且在较宽范围的pH范围具有很好的稳定性,具有较好的工业应用前景。合成树脂的降解分析表明该酶可以降解PET、PBS和PCL,在治理生活垃圾的污染方面具有广阔应用前景。