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公开(公告)号:CN111239409A
公开(公告)日:2020-06-05
申请号:CN202010061291.0
申请日:2020-01-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/58 , G01N33/569 , G01N33/558 , C09K11/85 , C09K11/02
Abstract: 本发明公开了一种用于O型口蹄疫病毒抗体定量检测的上转换发光免疫层析试纸条及其制备方法。本发明利用大肠杆菌原核表达技术表达O型口蹄疫(O-FMDV)衣壳蛋白,在体外组装成O型口蹄疫病毒样颗粒作为俘获抗原;利用上转换发光纳米材料特殊的发光性能,将其作为荧光标记物与蛋白G进行偶联,进而与抗体结合,制备得到的本发明上转换发光免疫层析试纸条。本发明制备的免疫层析试纸敏感性高、特异性和可重复性好,结果稳定,可应用于O型口蹄疫的抗体水平的监测,有助于进一步了解偶蹄类家畜O型口蹄疫抗体的状况。
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公开(公告)号:CN110759348A
公开(公告)日:2020-02-07
申请号:CN201911078617.4
申请日:2019-11-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于纳米材料领域,涉及一种具有多级孔结构的二氧化硅材料的制备方法。本发明以原硅酸四乙酯为硅源,三乙醇胺为碱性催化剂,水杨酸钠和十六烷基三甲基溴化铵为结构导向剂和模板剂,在水溶液中制备具有多级孔结构的二氧化硅材料。该方法制备的二氧化硅材料粒径均一、孔体积较大,不仅具有从内到外发射状的树枝状大孔道结构,而且具有尺寸较小的介孔结构。本发明的方法制备简单、成本较低,重复性好,环境友好,粒径大小在50~500 nm范围可调,而且可以实现大规模制备。本发明制备的具有多级孔结构的二氧化硅材料可用于药物递送载体,尤其是对小分子药物和大分子量蛋白的共同负载具有显著的优势。
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公开(公告)号:CN109799341A
公开(公告)日:2019-05-24
申请号:CN201811491851.5
申请日:2018-12-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开一种采用南非2型口蹄疫病毒样颗粒(VLPs)制备的检测试剂盒及制备方法。本发明的试剂盒的制备方法是将HRP直接标记在跟被检抗体同时作用的竞争性抗体上,其内酶标板包被的南非2型口蹄疫病毒样颗粒是由南非2型口蹄疫病毒的结构蛋白VP0、VP1和VP3组装而成。本发明采用的VLPs能高效组装,且不影响其诊断效率,有利于降低诊断制剂的成本。本发明方法相对现有技术的检测步骤有所减少,实验操作简单,工作量小,用时短,并可提高诊断试剂的特异性和敏感性。
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公开(公告)号:CN105527423B
公开(公告)日:2018-12-07
申请号:CN201510923250.7
申请日:2015-12-14
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供一种定量检测猪水泡病毒抗原的酶联免疫试剂盒,所述试剂盒包括猪水泡病毒标准抗原、猪水泡病毒特异性第一抗体、猪水泡病毒特异性第二抗体和酶标抗体。本发明还提供上述酶联免疫试剂盒在定量检测猪水泡病毒抗原中的应用。本发明是蔗糖密度梯度离心、ELISA方法的有机结合体,是集二者之长而去其不足。本发明操作简单、稳定性好、适合于批量样品检测,是抗原定量和疫苗中有效抗原含量检验的理想方法。因此,本发明的方法在SVDV抗原生产、实时监测、疫苗质量评估等方面能够发挥重要作用。
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公开(公告)号:CN108776225A
公开(公告)日:2018-11-09
申请号:CN201810501998.1
申请日:2018-05-23
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了猪细小病毒VLPs抗体检测试剂盒及其制备方法、应用,其检测试剂盒包括预包被猪细小病毒VLPs的酶标板、封闭液、样品稀释液、酶结合物、浓缩洗涤液、酶底物溶液和终止液。本发明是首次采用猪细小病毒的病毒样颗粒作为包被抗原,建立了可检测猪细小病毒的试剂盒,还试剂盒可对血清中的猪细小病毒的抗体水平进行快速检测;本发明试剂盒检测敏感性高、特异性和可重复性好,结果稳定。同时所采用的病毒样颗粒对操作者和环境安全无害、无传染性。另外本发明试剂盒应用大肠杆菌表达系统开发,因而具有经济、廉价的优点。
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公开(公告)号:CN105785037A
公开(公告)日:2016-07-20
申请号:CN201610190933.0
申请日:2016-03-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/558
CPC classification number: G01N33/6854 , G01N33/558 , G01N33/56983 , G01N2469/20
Abstract: 本发明涉及一种猪圆环病毒优势抗原表位肽建立快速检测层析试纸条及制备方法,可用于快速检测猪血液或血清中的抗体。试纸条包括支撑层,以及在所述支撑层上依次设置的加样层、金标蛋白释放垫、检测层和吸收层。金标抗体释放垫包埋有胶体金标记的重组G蛋白,检测层上设置有检测带和质控带,检测带固定有猪圆环病毒2型核衣壳蛋白上的优势抗原表位肽,质控带固定有ProteinG免疫兔血清纯化后的IgG。本发明的试纸条操作简单、重复性好、灵敏度高,结果快速直观、工艺简单可大量制备,成本低廉,适合基层大批量现场检测并可用于猪群PCV2感染的早期快速诊断。
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公开(公告)号:CN103409377B
公开(公告)日:2015-12-23
申请号:CN201310381323.5
申请日:2013-08-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开一种犬细小病毒病毒样颗粒,以及其制备方法及用途。本发明的犬细小病毒病毒样颗粒由VP2蛋白组成,其基因序列为SEQ ID №1。本发明的犬细小病毒病毒样颗粒的制备方法是以犬细小病毒DNA为模板,用SEQ ID №2和SEQ ID №3为引物扩增得到扩增产物,将扩增产物插入载体pSMK中,得重组质粒pSMK-VP2,将pSMK-VP2转化到大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIL株,在LB培养并以IPTG诱导表达重组蛋白,再将重组蛋白纯化后进行体外组装,得到犬细小病毒病毒样颗粒。
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公开(公告)号:CN114317571B
公开(公告)日:2025-04-18
申请号:CN202111641645.X
申请日:2021-12-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/62 , C12N15/70 , A61K39/125 , A61K39/135 , A61K39/39 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种病毒样颗粒及其制备方法和应用,属于农业科学畜牧兽医科学技术领域。本发明以小泛素样修饰蛋白作为标签蛋白促进病毒结构蛋白VP0、VP1和VP3的正确折叠,同时保证了蛋白的结构稳定性,实现结构蛋白的大量表达,经过3种结构蛋白体外自组装后,获得大量的与天然病毒性能相似的病毒样颗粒。经过免疫原性检测,本发明制备的病毒样颗粒具有较高的免疫原性,可作为储备疫苗,在防控猪水泡病或口蹄疫病毒传播中应用。
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公开(公告)号:CN119019549B
公开(公告)日:2025-04-15
申请号:CN202411439904.4
申请日:2024-10-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种抗猪δ冠状病毒中和活性纳米抗体及其应用。本发明利用噬菌体展示技术构建了PDCoV S蛋白的纳米文库,并筛选获得了可与PDCoV以及S蛋白具有高度亲和力的特异性纳米抗体Nb1、Nb3或Nb8。进一步地以Nb3为基础,建立了一种用于临床快速、高效地检测PDCoV抗体的竞争ELISA方法。此外,体内外中和活性评价结果显示,Nb3抗PDCoV的中和效价可达到1:128,在攻毒前后分别随牛奶口服给药仔猪5mg/ml Nb3能够显著降低仔猪腹泻发病率,保护3/5的仔猪免受PDCoV强毒株的攻击。因此,本发明所筛选的抗PDCoV特异性纳米抗体Nb3,将为PDCoV的临床防控提供一种技术和材料支撑。
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公开(公告)号:CN119454924A
公开(公告)日:2025-02-18
申请号:CN202411319801.4
申请日:2024-09-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明公开了一种高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒mRNA疫苗组合物及其应用。所述的疫苗组合物选自以下组合中的任一:(1)由PRRSV GP3mRNA、PRRSV GP4mRNA以及PRRSV GP5mRNA组成的mRNA疫苗组合物;或(2)由PRRSV GP5mRNA、PRRSV膜蛋白(M)mRNA以及PRRSV核衣壳蛋白(N)mRNA组成的mRNA疫苗组合物。本发明以高致病性PRRSV JX‑A1毒株为模板,分别构建了可合成多个融合蛋白GP345,GP5M、GP5MN和单个结构蛋白GP3,GP4,GP5,M,N的mRNA。脂质体包封后接种小鼠进行免疫学评价,结果显示:单个mRNA‑LNPs混合组的体液免疫和细胞免疫水平均高于重组mRNA‑LNPs,其中GP5+M+N,GP3+4+5效果相对最好。本发明的提出为预防PRRSV提供了新的技术手段。
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