公开(公告)号：CN119162247A

公开(公告)日：2024-12-20

申请号：CN202411485227.X

申请日：2024-10-23

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 尹双辉 ,  郭慧琛 ,  孙世琪 ,  丁耀忠 ,  尚佑军 ,  谭书桢 ,  张韵 ,  白满元 ,  董虎 ,  吴金恩 ,  周静静 ,  腾志冬

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/64 ,  C12N15/62 ,  C12N15/54 ,  C12N5/10 ,  C07K14/18 ,  C07K1/22 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明提供了一种稳定表达猪瘟病毒疫苗株E2蛋白的悬浮HEK293细胞系的构建方法。本发明构建了表达猪瘟病毒疫苗株E2蛋白的悬浮HEK293细胞系。在细胞稳定传代试验中证实，当HEK‑E2细胞系能够稳定传10代时，培养上清中E2蛋白的表达量稳定，产量稳定保持在1.0‑1.2 mg/ml，亲和层析纯化获得的E2蛋白纯度达到95%，双抗体夹心ELISA确定其具有很好的反应原性，206佐剂乳化E2蛋白免疫猪能够诱导高水平的血清抗体，攻击强毒后能够得到完全保护。本发明构建的HEK‑293细胞系能够稳定分泌表达的CSFV E2蛋白的具备开发为重组E2基因工程疫苗的应用前景。

公开(公告)号：CN117625551A

公开(公告)日：2024-03-01

申请号：CN202311591386.3

申请日：2023-11-27

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 孙世琪 ,  郭慧琛 ,  谭书桢 ,  董虎 ,  白满元 ,  滕志东 ,  任丽华 ,  吴金恩 ,  张韵 ,  尹双辉 ,  丁耀忠 ,  周静静

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  C07K14/09 ,  C12N15/42 ,  A61K39/135 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明涉及基因工程学和免疫学技术领域，具体涉及一种能够表达口蹄疫病毒颗粒样的细胞池构建与应用。本发明通过构建含有口蹄疫病毒的重组质粒，并进一步转染至宿主细胞之后筛选得到了一种稳健表达口蹄疫病毒样颗粒的重组多克隆细胞池，为进一步防范口蹄疫病毒，以及制备口蹄疫病毒疫苗提供新策略。本发明获得的重组中国卵巢细胞池不仅稳健表达口蹄疫病毒样颗粒，而且通过该重组中国卵巢细胞池制备的口蹄疫病毒样颗粒具有良好的免疫原性。

公开(公告)号：CN117186192A

公开(公告)日：2023-12-08

申请号：CN202311180688.1

申请日：2023-09-13

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 孙世琪 ,  郭慧琛 ,  穆素雨 ,  商绍彬 ,  陈凌波 ,  张韵 ,  白满元 ,  吴金恩 ,  尹双辉 ,  滕志东 ,  周静静 ,  董虎

IPC: C07K14/09 ,  C07K16/10 ,  C12N15/42 ,  C12N15/13 ,  A61K39/135 ,  A61P31/14 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明属于兽医生物制品领域，具体的涉及动物疾病预防，更具体涉及口蹄疫病毒保守免疫抗原优势表位的筛选。本发明公开了一种口蹄疫病毒的T细胞抗原表位多肽。本发明筛选出的口蹄疫病毒两种保守的非结构蛋白2C、2B的T的抗原表位多肽，能激活很强的细胞免疫应答，且免疫效果良好，产生了更好的中和性抗体以及产生了完全的保护。

公开(公告)号：CN117164706A

公开(公告)日：2023-12-05

申请号：CN202311135472.3

申请日：2023-09-05

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 孙世琪 ,  郭慧琛 ,  穆素雨 ,  谭书桢 ,  董虎 ,  王嘉宁 ,  陈凌波 ,  白满元 ,  张韵

IPC: C07K16/10 ,  C12N15/13 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明属于抗体工程制药领域，具体的涉及一种靶向塞内卡病毒A的纳米抗体筛选及其应用，具体公开了一种塞内卡病毒A的单域抗体或其抗原结合片段。该重组纳米抗体的免疫原性风险低，能有效阻断SVA病毒感染IBRS‑2细胞，具有显著的SVA中和活性；因此，本发明提供的纳米抗体序列及表达载体在SVA鉴定中和表位、预防或治疗、诊断中具有很好的应用前景。

公开(公告)号：CN116769831A

公开(公告)日：2023-09-19

申请号：CN202310453994.1

申请日：2023-04-25

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 郭慧琛 ,  谭书桢 ,  孙世琪 ,  董虎 ,  白满元 ,  滕志东 ,  吴金恩 ,  张韵 ,  尹双辉

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/42 ,  C07K14/09 ,  A61K39/135 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明涉及生物医学领域，具体涉及一种针对口蹄疫病毒样颗粒的转座‑诱导表达系统，所述系统包括编码转座酶、反向反式激活因子、诱导剂、口蹄疫病毒样颗粒的核酸，所述转座酶可以是编码PiggyBac(PB)的转座酶及其变体，所述反向反式激活因子为可以是反向反式激活因子本身及其变体，所述诱导剂为四环素及其衍生物，所述口蹄疫病毒样颗粒的核酸为优化后的序列P12A3Copti，如SEQ ID NO:3所示。本发明经过构建PB转座‑四环素诱导表达系统，并将优化后的P12A3Copti在该系统表达，提高了P12A和3C基因稳定整合至细胞基因组的成功率，同时FMDV衣壳蛋白的表达量增加了15‑30倍。

公开(公告)号：CN114540393B

公开(公告)日：2023-07-21

申请号：CN202210236002.5

申请日：2022-03-11

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 孙世琪 ,  白满元 ,  郭慧琛 ,  裴辰辰 ,  董虎 ,  张韵 ,  丁耀忠 ,  尹双辉 ,  吴金恩 ,  郭建宏 ,  何继军 ,  靳野

IPC: C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C07K14/01 ,  C12P21/06 ,  C07K1/34 ,  C07K1/22 ,  C07K1/36 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  C07K16/08 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种猪圆环病毒3型病毒样颗粒及其构建方法和应用，属于病毒样颗粒制备技术领域。本发明提供了一种重组质粒，所述重组质粒以pSMA质粒作为基础载体，插入优化好的Cap全长基因，所述优化好的Cap全长基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明克服了现有真核表达系统及传统原核表达系统的不足，使利用原核表达系统可溶性表达猪圆环病毒3型完整Cap蛋白并成功实现病毒样颗粒的制备方法成为可能，且得到的病毒样颗粒免疫原性高，成本低。

公开(公告)号：CN114540393A

公开(公告)日：2022-05-27

申请号：CN202210236002.5

申请日：2022-03-11

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 孙世琪 ,  白满元 ,  郭慧琛 ,  裴辰辰 ,  董虎 ,  张韵 ,  丁耀忠 ,  尹双辉 ,  吴金恩 ,  郭建宏 ,  何继军 ,  靳野

IPC: C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C07K14/01 ,  C12P21/06 ,  C07K1/34 ,  C07K1/22 ,  C07K1/36 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  C07K16/08 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种猪圆环病毒3型病毒样颗粒及其构建方法和应用，属于病毒样颗粒制备技术领域。本发明提供了一种重组质粒，所述重组质粒以pSMA质粒作为基础载体，插入优化好的Cap全长基因，所述优化好的Cap全长基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明克服了现有真核表达系统及传统原核表达系统的不足，使利用原核表达系统可溶性表达猪圆环病毒3型完整Cap蛋白并成功实现病毒样颗粒的制备方法成为可能，且得到的病毒样颗粒免疫原性高，成本低。

公开(公告)号：CN113955762A

公开(公告)日：2022-01-21

申请号：CN202111367802.2

申请日：2021-11-18

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 郭慧琛 ,  茹嘉喜 ,  孙世琪 ,  尹双辉 ,  张韵 ,  白满元 ,  吴金恩 ,  董虎

IPC: C01B33/18 ,  A61K47/04 ,  A61K39/39 ,  B82Y40/00 ,  B82Y30/00 ,  B82Y5/00

Abstract: 本发明属于材料技术领域，具体涉及一种介孔硅纳米材料及其制备方法和应用。所述的介孔硅纳米材料具有核‑锥结构；其内部为二氧化硅实心核，外部为从核向外放射的树枝状介孔硅壳层。二氧化硅核大小为108±10nm；介孔硅壳层厚度为66±10nm。所述的介孔硅纳米材料为球形形貌，粒径为237±10nm。本发明的优点：介孔硅纳米材料比表面积和孔体积大、粒径均一、结构稳定、生物安全性高。可以实现对口蹄疫病毒样颗粒抗原的负载和缓慢释放，具有较高的蛋白负载能力、极低的细胞毒性、良好的血液相容性及较低的组织器官毒性。作为佐剂，可以增强免疫应答水平和提高攻毒保护率效果。

公开(公告)号：CN106801041A

公开(公告)日：2017-06-06

申请号：CN201710029075.6

申请日：2017-01-16

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 郭慧琛 ,  孙世琪 ,  宋品 ,  董虎 ,  常艳燕 ,  魏衍全 ,  张韵 ,  茹嘉喜 ,  刘湘涛 ,  殷宏

IPC: C12N7/04 ,  A61K39/23 ,  A61P31/20 ,  G01N33/569

CPC classification number: C12N7/00 ,  A61K39/12 ,  C12N2750/14323 ,  C12N2750/14334 ,  C12N2750/14351 ,  G01N33/56983

Abstract: 本发明公开一种猪细小病毒的病毒样颗粒、其制备方法及应用。本发明的猪细小病毒的病毒样颗粒的制备方法是：对猪细小病毒VP2基因进行优化，得到优化的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的猪细小病毒VP2基因，将优化的VP2基因插入到插入载体pSMK中得重组pSMK‑VP2质粒，将重组质粒转化到大肠杆菌中得重组菌，经IPTG诱导表达，收集菌体，纯化重组蛋白，再将纯化后的重组蛋白进行体外组装，得猪细小病毒病毒样颗粒。本发明的猪细小病毒病毒样颗粒可在制备用于预防猪细小病毒引起疾病的疫苗中的应用，也可在制备用于检测猪细小病毒的检测试剂中的应用。

公开(公告)号：CN104689340A

公开(公告)日：2015-06-10

申请号：CN201510128809.7

申请日：2015-03-24

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所

Inventor： 孙世琪 ,  郭慧琛 ,  闫丹 ,  董虎 ,  魏衍全 ,  刘湘涛

IPC: A61K47/48 ,  A61K31/704 ,  A61K47/46 ,  A61P35/00

Abstract: 发明公开一种抗肿瘤药物靶向载体及这种载体与抗肿瘤药物的偶联方法，以及所形成的一种抗肿瘤药物。本发明所述的这种肿瘤药物靶向载体为口蹄疫病毒样颗粒。本发明的肿瘤药物靶向载体与抗肿瘤化学药物的化学偶联方法是：用碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)化学偶联试剂活化肿瘤药物载体，然后再与其它抗肿瘤药物偶联。本发明的抗肿瘤药物能够和肿瘤细胞表面过量表达的整合素受体特异性结合，且无须对其表面进行靶向修饰，可提高抗癌药物的靶向治疗作用。