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公开(公告)号:CN119552821A
公开(公告)日:2025-03-04
申请号:CN202411690015.5
申请日:2024-11-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N5/10 , C12N15/85 , C07K14/09 , G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种口蹄疫假病毒细胞培养系统及其应用。本发明属于生物技术领域。本发明提供的一种细胞培养系统,可用于生产具有转录和复制能力的口蹄疫假病毒(FMDV‑trVLPs),但其不具有活病毒的感染性。该系统由Nluc替换了FMDV衣壳蛋白基因(P1)的亚基因组复制子(FMDV‑Nluc)和稳定整合FMDV P12A3C基因的BHK‑21细胞系(BHK‑P1)组成。当FMDV‑Nluc复制子转染进BHK‑P1细胞后,可生产出口蹄疫假病毒FMDV‑trVLPs,并能在BHK‑P1细胞内增殖和传代,有效实现生物安全降级,在降低生物安全风险、模拟FMDV活病毒研究方面具有巨大潜力与实用价值。
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公开(公告)号:CN117388491A
公开(公告)日:2024-01-12
申请号:CN202311263433.1
申请日:2023-09-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/68 , C07K16/10
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及兽用诊断技术领域,具体的公开了一种猪塞内卡病毒中和抗体液相阻断ELISA试剂盒,所述试剂盒含猪塞内卡病毒单域抗体以及配套的检测试剂,所述猪塞内卡病毒单域抗体还可以是单域抗体的抗原结合片段,所述单域抗体选自52组中的一组或多组,所述每组单域抗体或抗原结合片段的重链可变区包含CDR‑1、CDR‑2和CDR‑3,所述52组单域抗体或抗原结合片段的重链可变区CDR‑1(VH‑CDR‑1)的氨基酸序列分别为SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.52所示,重链可变区CDR‑2(VH‑CDR‑2)的氨基酸序列分别为SEQ ID NO.53~SEQ ID NO.104所示,重链可变区CDR‑3(VH‑CDR‑3)的氨基酸序列分别为SEQ ID NO.105~SEQ ID NO.156所示。本发明的试剂盒可对血清中的SVA中和抗体水平进行快速检测,其敏感性高、特异性好、结果稳定,可更好地应用于SVA疫苗效力评价。
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公开(公告)号:CN116836298A
公开(公告)日:2023-10-03
申请号:CN202310530883.6
申请日:2023-05-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物医学领域,涉及一种可高效表达的重组单域抗体,所述重组单域抗体的氨基酸序列为在单域抗体的N端添加信号肽氨基酸序列,在单域抗体的C端设置终止密码子氨基酸序列所构成的氨基酸序列,所述单域抗体选自VHH1、VHH2、VHH3、VHH4、VHH5和VHH6中的一种或多种,所述信号太序列选自Azu、A2、HC、Secrecon、IFNα2和IL‑2中的一种或多种。本发明通过密码子优化和信号肽的添加,得到的单域抗体组合物不仅具有高生物活性,而且具有较高的蛋白质产量,可以满足单域抗体应用的前、中期要求。
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公开(公告)号:CN109652593A
公开(公告)日:2019-04-19
申请号:CN201910013717.2
申请日:2019-01-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种检测A型塞内卡病毒的荧光定量PCR引物及试剂盒,所述的引物是基于塞内卡病毒L/VP4区段基因序列设计的,其上游引物序列如SEQ ID NO.1所示,下游引物序列如SEQ ID NO.2所示。本发明所述的试剂盒可以在加入TRIzol试剂将病毒灭活后在普通实验室进行检测,安全方便;对A型塞内卡病毒能定量检测,最低检出限浓度为6.4×10°拷贝/μL,灵敏度高;对A型口蹄疫病毒cDNA、O型口蹄疫病毒cDNA、猪瘟病毒cDNA无扩增反应,特异性好,可用于检测A型塞内卡病毒感染动物的样品如血液、组织中的病毒,也可用于A型塞内卡病毒的基础研究及疫苗研制、生产过程中病毒滴度的检测等,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN117186192A
公开(公告)日:2023-12-08
申请号:CN202311180688.1
申请日:2023-09-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/09 , C07K16/10 , C12N15/42 , C12N15/13 , A61K39/135 , A61P31/14 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于兽医生物制品领域,具体的涉及动物疾病预防,更具体涉及口蹄疫病毒保守免疫抗原优势表位的筛选。本发明公开了一种口蹄疫病毒的T细胞抗原表位多肽。本发明筛选出的口蹄疫病毒两种保守的非结构蛋白2C、2B的T的抗原表位多肽,能激活很强的细胞免疫应答,且免疫效果良好,产生了更好的中和性抗体以及产生了完全的保护。
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公开(公告)号:CN117164706A
公开(公告)日:2023-12-05
申请号:CN202311135472.3
申请日:2023-09-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于抗体工程制药领域,具体的涉及一种靶向塞内卡病毒A的纳米抗体筛选及其应用,具体公开了一种塞内卡病毒A的单域抗体或其抗原结合片段。该重组纳米抗体的免疫原性风险低,能有效阻断SVA病毒感染IBRS‑2细胞,具有显著的SVA中和活性;因此,本发明提供的纳米抗体序列及表达载体在SVA鉴定中和表位、预防或治疗、诊断中具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN117815376A
公开(公告)日:2024-04-05
申请号:CN202311817155.X
申请日:2023-12-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K39/135 , C12N5/0784 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种口蹄疫DC疫苗、制备方法及其应用。本发明通过在体外使用FMDV灭活抗原刺激源自猪血液PBMC制备的DC,并在不同激动剂和细胞因子诱导下得到成熟DC,制备出具有增强交叉递呈作用的DC疫苗,回输给猪后刺激适应性免疫应答激活,可以产生细胞毒性T细胞并增强中和抗体的产生。攻毒保护试验发现,该DC疫苗可以产生完全的保护性应答,而且没有病毒血症的产生。因此,本发明为猪口蹄疫的预防提供了一种有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN115043914A
公开(公告)日:2022-09-13
申请号:CN202210613204.7
申请日:2022-05-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/085 , A61K39/125 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种塞内卡病毒A空衣壳及其制备方法和用途。本发明在细胞感染8h时加入10mM盐酸胍使SVA完整病毒粒子全部形成空衣壳,然后使用10%‑50%氯化铯,230000g,离心2.5h条件下分离SVA完整病毒粒子及空衣壳。为确定分离塞内卡病毒A完整病毒粒子和空衣壳的免疫效果,按2μg/鼠的剂量肌肉注射免疫BALB/c小鼠,之后检测特异性抗体和中和抗体变化。结果显示SVA完整病毒粒子及空衣壳免疫后诱导产生的中和抗体及特异性抗体相当。本发明的提出为塞内卡病毒A空衣壳的制备提供了新的技术手段,也为更为安全、有效的塞内卡病毒A疫苗的研究提供了技术支持,同时也为其他小RNA病毒的分离纯化奠定了基础。
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公开(公告)号:CN114317571A
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202111641645.X
申请日:2021-12-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/62 , C12N15/70 , A61K39/125 , A61K39/135 , A61K39/39 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种病毒样颗粒及其制备方法和应用,属于农业科学畜牧兽医科学技术领域。本发明以小泛素样修饰蛋白作为标签蛋白促进病毒结构蛋白VP0、VP1和VP3的正确折叠,同时保证了蛋白的结构稳定性,实现结构蛋白的大量表达,经过3种结构蛋白体外自组装后,获得大量的与天然病毒性能相似的病毒样颗粒。经过免疫原性检测,本发明制备的病毒样颗粒具有较高的免疫原性,可作为储备疫苗,在防控猪水泡病或口蹄疫病毒传播中应用。
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公开(公告)号:CN114317571B
公开(公告)日:2025-04-18
申请号:CN202111641645.X
申请日:2021-12-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/62 , C12N15/70 , A61K39/125 , A61K39/135 , A61K39/39 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种病毒样颗粒及其制备方法和应用,属于农业科学畜牧兽医科学技术领域。本发明以小泛素样修饰蛋白作为标签蛋白促进病毒结构蛋白VP0、VP1和VP3的正确折叠,同时保证了蛋白的结构稳定性,实现结构蛋白的大量表达,经过3种结构蛋白体外自组装后,获得大量的与天然病毒性能相似的病毒样颗粒。经过免疫原性检测,本发明制备的病毒样颗粒具有较高的免疫原性,可作为储备疫苗,在防控猪水泡病或口蹄疫病毒传播中应用。
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