一种检测稻瘟菌基因促进稻瘟病菌菌丝生长和产孢的方法

    公开(公告)号:CN105177107A

    公开(公告)日:2015-12-23

    申请号:CN201510602667.3

    申请日:2015-09-21

    IPC分类号: C12Q1/06 C12Q1/02 C12R1/645

    摘要: 本发明公开了一种检测稻瘟菌基因促进稻瘟病菌菌丝生长和产孢的方法,它涉及植物保护和生物技术领域,它将基因的原核表达产物加于培马铃薯蔗糖养基中,再将菌落接种于含有原核表达产物的PSA培养基中于28℃振荡培养箱中培养三天,过滤菌丝烘干称重;同时收集滤液,进行孢子计数。它提供一种更为简便、快速的确定病菌基因对病菌自身的影响,为更准确分析基因功能奠定重要的实验基础。

    一种观测融合蛋白长距离转运至水稻叶芽的方法

    公开(公告)号:CN103175810B

    公开(公告)日:2015-09-02

    申请号:CN201210554731.1

    申请日:2012-12-05

    IPC分类号: G01N21/64 G01N1/30

    CPC分类号: G01N21/6458

    摘要: 本发明公开了一种观测融合蛋白长距离转运至水稻叶芽的方法,该方法将GFP融合蛋白处理水稻根尖后,处理过根尖的水稻植株叶芽进行冷冻切片,切片后PI荧光染料进行染色,共聚焦显微镜直接观测GFP融合蛋白从水稻根尖转运至叶芽。该方法利用GFP融合蛋白处理水稻根尖0.5cm处,叶芽被冷冻切片后PI染色,共聚焦显微镜观测GFP融合蛋白从水稻根尖转运至叶芽,能直接定性地了解GFP融合蛋白在水稻植株内的长距离转运情况。GFP融合蛋白直接处理水稻根尖0.5cm处,共聚焦显微镜观测GFP融合蛋白转运至叶芽可为进一步开展效应蛋白能引起水稻系统防御反应提供非常强有力的证据。该方法简便、准确、快速。

    一种三七为原料制作适宜恶疫霉菌产生游动孢子的液体培养基

    公开(公告)号:CN102839147B

    公开(公告)日:2014-12-17

    申请号:CN201210323189.9

    申请日:2012-08-28

    IPC分类号: C12N3/00 C12R1/645

    摘要: 本发明公开了一种以三七为原料制作适宜恶疫霉菌产生游动孢子的液体培养基,具体制作方法为,一年生三七整株洗净切碎后按w/v为1∶2的比例加入去离子水于榨汁机中榨汁,将所得三七汁液用四层纱布过滤后用含0.02%CaCO3的去离子水稀释至含三七汁10%~50%(v/v),分装后以0.103MPa、121℃、高压蒸气灭菌20min。该培养基原材料容易获取,培养基的制作和游动孢子产生的程序简单易学,大大提高了恶疫霉菌游动孢子产生的效率,为病原菌接种体的制备提供了极大的便利。

    一种直接从感病小麦叶片上高效快速提取小麦条锈菌DNA的方法

    公开(公告)号:CN102634509B

    公开(公告)日:2014-04-16

    申请号:CN201210126926.6

    申请日:2012-04-27

    IPC分类号: C12N15/10

    摘要: 本发明公开了一种直接从感病小麦叶片上高效快速提取小麦条锈菌DNA的方法,其特征在于,吸取20μl配好的20%的chelex-100混悬液于100μl PCR管中,吸取5μl的Chelex-100上清液于长有小麦条锈菌夏孢子小麦叶片上,并在滴有Chelex-100上清液的病斑处反复涂抹叶片多次,将锈孢子洗下后,吸回叶片上含有锈孢子的Chelex-100上清液并加入到装有20μl 20%chelex-100混悬液的PCR管中,用移液器反复吸取混匀,放入沸水浴中水浴2min,再放到旋涡混合器上振荡混匀10s,水浴5min后保存于-20℃备用,上清液均可作为PCR的模板。建立一套高效、快速、可直接从感小麦条锈病菌的植株上提取小麦条锈病菌DNA作为PCR扩增模板的方法。

    一种观测融合蛋白长距离转运至水稻叶芽的方法

    公开(公告)号:CN103175810A

    公开(公告)日:2013-06-26

    申请号:CN201210554731.1

    申请日:2012-12-05

    IPC分类号: G01N21/64 G01N1/30

    CPC分类号: G01N21/6458

    摘要: 本发明公开了一种观测融合蛋白长距离转运至水稻叶芽的方法,该方法将GFP融合蛋白处理水稻根尖后,处理过根尖的水稻植株叶芽进行冷冻切片,切片后PI荧光染料进行染色,共聚焦显微镜直接观测GFP融合蛋白从水稻根尖转运至叶芽。该方法利用GFP融合蛋白处理水稻根尖0.5cm处,叶芽被冷冻切片后PI染色,共聚焦显微镜观测GFP融合蛋白从水稻根尖转运至叶芽,能直接定性地了解GFP融合蛋白在水稻植株内的长距离转运情况。GFP融合蛋白直接处理水稻根尖0.5cm处,共聚焦显微镜观测GFP融合蛋白转运至叶芽可为进一步开展效应蛋白能引起水稻系统防御反应提供非常强有力的证据。该方法简便、准确、快速。

    水稻休眠芽繁育再生植株的方法

    公开(公告)号:CN103070052A

    公开(公告)日:2013-05-01

    申请号:CN201310043582.7

    申请日:2013-02-05

    IPC分类号: A01G16/00 A01G7/06

    摘要: 本发明公开一种水稻休眠芽繁育再生植株的方法,属于作物育种技术领域。该方法取水稻带有倒1~倒3节点休眠芽的稻杆散播在育苗床上并覆土,或将所述的稻杆用植物激素浸泡,再散播在育苗床上并覆土,按水稻常规苗床育秧方法进行育苗和管理,待再生苗3叶~4叶期移栽大田。该方法能有效保存和繁殖获得大量特殊水稻材料如雌性不育、雄性不育等,解决了特殊材料不易繁殖的难题;直接利用杂种F1即可获得大量F1再生植株,有效降低水稻杂交制种成本和缩短育种周期,还能很好地保持其杂种优势;该方法用水稻地上部分带有倒1~倒3节点休眠芽稻杆用激素处理和不用激素处理的再生效率都极显著优于用稻桩直接再生,其方法简单易实施,便于推广应用。

    一种用微波辅助提取的紫茎泽兰挥发油

    公开(公告)号:CN103013670A

    公开(公告)日:2013-04-03

    申请号:CN201310012407.1

    申请日:2013-01-14

    IPC分类号: C11B9/02 B01J19/12

    摘要: 本发明涉及一种用微波辅助提取的紫茎泽兰挥发油,属天然植物提取产物技术领域。本发明的紫茎泽兰挥发油经如下步骤得到:将紫茎泽兰地上部分粉碎物置于玻璃蒸馏瓶中,加入重量为1~10倍的蒸馏水浸泡0.1~8小时,把蒸馏瓶置于工作频率为915兆赫兹(MHZ)或2450兆赫兹(MHZ),工作功率为50~3000瓦(W)的微波提取器中连续提取5~200分钟(min),将馏出液用10~100毫升(mL)乙醚或正己烷萃取1~3次,合并乙醚或正己烷萃取液后用1~25克(g)无水硫酸钠脱水,20~70℃减压挥除乙醚或正己烷,即制得紫茎泽兰挥发油。本发明的有益效果在于:利用微波辅助方法紫茎泽兰挥发油,且挥发油的得率显著高于传统的水蒸气蒸馏提取法。

    一种芹菜为原料制作适宜恶疫霉菌产生孢子囊的液体培养基

    公开(公告)号:CN102839148A

    公开(公告)日:2012-12-26

    申请号:CN201210323198.8

    申请日:2012-08-28

    IPC分类号: C12N3/00 C12R1/645

    摘要: 本发明公开了一种以芹菜为原料制作适宜恶疫霉菌产生孢子囊的液体培养基,具体制作方法为,芹菜去叶洗净切碎后按w//v为1∶1的比例加入去离子水于榨汁机中榨汁,将所得芹菜汁用四层纱布过滤后用含0.02%(w/v)CaCO3的去离子水稀释至含芹菜汁10%~50%(v/v),分装后以0.103MPa、121℃、高压蒸气灭菌20min;将灭菌液体培养基倒入灭菌的9cm直径培养皿中,每皿倒15ml。该培养基原材料成本低廉且容易获取,培养基的制作和孢子囊产生的程序简单易学,大大提高了恶疫霉菌孢子囊产生的效率,为病原菌接种体的制备提供了极大的便利。

    一种利用试管水琼脂培养基栽培水稻测量根长的方法

    公开(公告)号:CN102783401A

    公开(公告)日:2012-11-21

    申请号:CN201210287727.3

    申请日:2012-08-06

    IPC分类号: A01G31/00 G01B5/02

    摘要: 本发明公开了一种利用试管水琼脂培养基栽培水稻测量根长的方法,利用试管水琼脂培养基栽培水稻并测量其根长,具体步骤如下:a.水琼脂培养基的制备;b.水稻的移栽;c.测量水稻根长;本发明的优点在于:合理利用了试管水琼脂培养基的特性。因琼脂质地柔软,水稻在试管水琼脂里面生长受到的阻力小,所以长得直,便于测量;利用其外观透明性可直接隔着试管测量水稻根长,避免了拔苗测量根长时水稻根部的损伤和洗根时根的相互缠绕,方便易行,减少了系统误差,且对水稻毫无损伤,可继续用于后续实验。