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公开(公告)号：CN106754613A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201710078526.5
申请日：2017-02-14
申请人： 云南农业大学
摘要： 本发明公开了一种稻瘟菌效应蛋白基因过表达菌株降低对pH敏感性的方法，分别用pH5和pH8处理稻瘟病菌效应蛋白基因过表达菌株孢子，统计产孢量、孢子萌发率及附着胞形成率。与现有技术相比，本发明提供一种更为简便、有效准确地确定稻瘟菌效应蛋白基因过表达菌株对不同pH的敏感性，为快速了解过病原菌效应蛋白基因过表达菌株的致病性提供了重要的参考依据。
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公开(公告)号：CN105586334A
公开(公告)日：2016-05-18
申请号：CN201610065875.9
申请日：2016-01-29
申请人： 云南农业大学
IPC分类号： C12N15/10
摘要： 本发明公开了一种黑痣菌子囊果提取基因组DNA的方法，与现有技术相比，本发明直接以黑痣菌子囊果为材料，进行DNA提取的方法。在进行DNA提取前，采用裂解液缓冲液处理2次，利用低温下DNA溶解度低的原理去除过多的胶质和多糖，最后加入提取液裂解细胞膜，进行DNA的提取，提取过程中加苯酚-氯仿-异戊醇进行抽提去除多余的蛋白。本方法适用于含有胶质和多糖、蛋白等含量高的较高的真菌材料，此类杂质存在和含量对所抽提到的DNA的产量和质量均无明显的影响，为黑痣菌的后续分子研究提供了保证，具有推广使用的价值。
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公开(公告)号：CN103004516B
公开(公告)日：2015-05-06
申请号：CN201310007957.4
申请日：2013-01-09
申请人： 云南农业大学
IPC分类号： A01G9/02
摘要： 本发明公开了一种分析不同种植模式下作物根部互作的容器，尼龙膜通过中心支柱及塑料条设置在盆体的内部，中心支柱设置在盆体内部的中央位置，塑料条设置在盆体的底部和侧壁上，同时塑料条将盆体的底部和侧壁均匀分割成四份，塑料条上设置有固定尼龙膜边缘的小槽，盆体底部设置有固定中央支柱的凹孔，装配时，只需将中心支柱插入到盆体的凹孔中，并将尼龙膜滴有塑料液的一端插入到塑料条的小槽中即可；该容器有利于防止间作时两种或两种以上作物的根系交叉生长在一起，利于单独分析一种作物根际或根围土壤中营养成分含量的变化，以及两种或两种以上作物根系互作之间的关系，有利于避免土样采集过程中因采集土样位置的不同而产生的实验误差。
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公开(公告)号：CN103004516A
公开(公告)日：2013-04-03
申请号：CN201310007957.4
申请日：2013-01-09
申请人： 云南农业大学
IPC分类号： A01G9/02
摘要： 本发明公开了一种分析不同种植模式下作物根部互作的容器，尼龙膜通过中心支柱及塑料条设置在盆体的内部，中心支柱设置在盆体内部的中央位置，塑料条设置在盆体的底部和侧壁上，同时塑料条将盆体的底部和侧壁均匀分割成四份，塑料条上设置有固定尼龙膜边缘的小槽，盆体底部设置有固定中央支柱的凹孔，装配时，只需将中心支柱插入到盆体的凹孔中，并将尼龙膜滴有塑料液的一端插入到塑料条的小槽中即可；该容器有利于防止间作时两种或两种以上作物的根系交叉生长在一起，利于单独分析一种作物根际或根围土壤中营养成分含量的变化，以及两种或两种以上作物根系互作之间的关系，有利于避免土样采集过程中因采集土样位置的不同而产生的实验误差。
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公开(公告)号：CN106754614A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201710078834.8
申请日：2017-02-14
申请人： 云南农业大学
CPC分类号： C12N1/36 , C12N1/14 , C12Q1/6895 , C12Q2600/158
摘要： 本发明公开了一种抑制侵染水稻PCD途径相关基因上调的方法，采用弱酸处理稻瘟菌效应蛋白基因过表达菌株孢子；用悬浮液喷雾接种水稻叶片；于不同时间点取样，提取水稻样品总RNA；反转录成cDNA，real‑time RT‑PCR检测cDNA；分析PCD途径相关的主要基因PR1a和PR5在不同时间点的表达。与现有技术相比，本发明克服了研究非生物环境pH影响寄主‑病原互作机制中，常借助温室设计各种弱酸处理以观察寄主表型变化、以及筛选大量水稻防御相关基因表达等周期长和效率低的弊端，提供了一种更为简便、有效、准确地弱酸处理病原菌孢子、定量检测水稻PCD途径主要相关基因表达的方法，为更快速准确地进行弱酸对水稻与稻瘟病菌互作机制的研究提供重要的实验依据。
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公开(公告)号：CN105779588A
公开(公告)日：2016-07-20
申请号：CN201610057178.9
申请日：2016-01-28
申请人： 云南农业大学
CPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12Q2600/13 , C12Q2600/158 , C12Q2531/113
摘要： 本发明公开了一种烟草多酚类物质诱导植物免疫反应的检测方法，利用提取分离到的烟草单宁类物质处理感病水稻叶片6h后再接种强致病菌株，调查水稻抗感反应；real?time RT?PCR分析水稻早期响应的防御相关基因表达以及qPCR检测病斑的真菌相对生长量；烟草单宁类物质按照10～500ppm浓度喷雾水稻叶片6h再接种强致病菌株；调查抗感反应以及real?time RT?PCR分析水稻防御相关基因表达。与现有技术相比，本发明全面准确地明确烟草单宁类物质能诱导感病水稻免疫反应响应。克服了已有单一地通过病原菌弱毒毒系处理感病植株再挑战接种强度菌株诱导免疫反应过程中诸多易受环境影响的弊端，最终达到为今后测定病原菌效应蛋白提高病原菌侵染力的方法提供准确全面的方法的目的。
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公开(公告)号：CN103267727B
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201310187191.2
申请日：2013-05-20
申请人： 云南农业大学
CPC分类号： G01N33/5097 , G01N2021/6432 , G01N2021/6439
摘要： 本发明公开了一种检测稻瘟病菌效应蛋白在水稻根组织内转运的方法，该方法包括以下步骤：稻瘟病菌病原相关分子模式MgNIP53的验证，融合蛋白处理水稻根尖，免疫荧光染色方法处理水稻，观察融合蛋白在水稻根组织内的转运。该方法通过一系列方法鉴定到了一个稻瘟病菌病原相关分子模式MgNIP53，采用融合蛋白处理水稻根尖，最后采用免疫荧光法处理水稻根尖来观察融合蛋白在水稻根组织内的转运，本发明提供的方法简便、准确、快速，为今后开发生物制剂进行有效生物防治稻瘟病提供有力参考。
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公开(公告)号：CN104404152A
公开(公告)日：2015-03-11
申请号：CN201410723122.3
申请日：2014-12-03
申请人： 云南农业大学
CPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/6809 , C12Q2600/13 , C12Q2600/156 , C12Q2565/125
摘要： 本发明提供了检测水稻稻瘟病菌基础抗性的基因型表达分子标记及应用，可用于水稻对稻瘟病菌基础抗性的鉴定。该分子标记的核苷酸序列为SEQ ID No.1，利用本发明所述引物对，以水稻基因组DNA为模板进行PCR扩增，可以得到与水稻对稻瘟病菌基础抗性基因紧密连锁的基因型分子标记。通过PCR扩增分析可以明确该标记的有无可以判断水稻对稻瘟病菌基础抗性的有无，能够用于水稻对稻瘟病菌基础抗性有无的检测。该基因型分子标记带型简单、分布较密等特点具有SSR不可比拟的优势，能快速精确检测亚种内品种间的多态性，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN104404038A
公开(公告)日：2015-03-11
申请号：CN201410722932.7
申请日：2014-12-03
申请人： 云南农业大学
摘要： 一种水稻对稻瘟病菌基础抗性的Indel分子标记及其应用，可用于稻瘟病菌基础抗性的鉴定。该Indel分子标记的核苷酸序列为SEQ ID No.1。利用本发明的引物对，以水稻基因组DNA为模板进行PCR扩增，可以得到与水稻对稻瘟病菌基础抗性基因紧密连锁的InDel分子标记，该标记在本发明中命名为InDelBR1。通过PCR扩增分析可以明确该标记的有无可以判断水稻对稻瘟病菌基础抗性的有无，能够用于水稻对稻瘟病菌基础抗性有无的检测。该InDel分子标记带型简单、分布较密等特点具有SSR不可比拟的优势，能快速精确检测亚种内品种间的多态性，具有广阔的应用前景。
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