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公开(公告)号：CN114480352B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202210097345.8
申请日：2022-01-26
申请人： 天津科技大学 , 山东隆科特酶制剂有限公司
摘要： 本发明主要通过DNA改组技术，利用DNaseI消化地衣芽胞杆菌来源和克劳氏芽胞杆菌来源的碱性蛋白酶基因，纯化回收目的片段，通过无引物PCR和有引物PCR构建碱性蛋白酶突变库，筛选获得了一种碱性蛋白酶活力显著提高的突变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示。适宜条件下，突变体碱性蛋白酶活力为61.75U/mL，相比野生型有显著提高。
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公开(公告)号：CN112522173B
公开(公告)日：2023-06-16
申请号：CN202011539757.X
申请日：2020-12-23
申请人： 天津科技大学 , 山东隆科特酶制剂有限公司
摘要： 本发明目的是通过对基因工程宿主的定向改造，提供一株能够高效稳定生产异源蛋白酶的基因工程菌，以解淀粉芽孢杆菌为宿主，首先将宿主的8种胞外蛋白酶aprE、epr、mpr、vpr、nprE、bpr、wprA、aprX缺失，得到胞外蛋白酶缺陷型菌株；还将宿主的α‑淀粉酶和胞外多糖基因簇eps缺失；还将表达异源碱性蛋白酶的高拷贝质粒导入宿主，得到一株高效生产异源碱性蛋白酶的基因工程菌。并且该工程菌在发酵过程中粘性大大降低，利于产物蛋白酶的分离纯化。
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公开(公告)号：CN115466707A
公开(公告)日：2022-12-13
申请号：CN202210733382.3
申请日：2022-06-27
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于微生物代谢工程领域，涉及一种以食品级安全菌株乳酸乳球菌为研究对象，利用两种不同途径生产2′‑岩藻糖基乳糖的方法。本发明分别在乳酸乳球菌中利用从头合成途径和补救途径实现了合成2′‑FL的目的，证实了利用乳酸乳球菌生产2′‑FL的可行性。另外，本发明通过在发酵培养基中添加血红素，进一步增加了2'‑FL的产量，经过48h发酵后，通过从头合成途径，2′‑FL的产量可达0.66g/L。
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公开(公告)号：CN115125247A
公开(公告)日：2022-09-30
申请号：CN202210671305.X
申请日：2022-06-14
申请人： 天津科技大学 , 山东隆科特酶制剂有限公司
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/75 , C12N9/56 , C12N1/21 , C12R1/11
摘要： 本发明通过对枯草芽孢杆菌来源的启动子分析改造获得了一种强度提高的新型组合启动子pα2‑α2。本发明还提供包含该组合启动子的表达载体、表达系统。本发明所述组合启动子用于控制基因表达，尤其应用于解淀粉芽孢杆菌代谢工程领域，可将碱性蛋白酶表达活性提高144％，为介导解淀粉芽胞杆菌表达系统中异源碱性蛋白酶基因的表达奠定基础，推动碱性蛋白酶的高效表达及工业化生产。
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公开(公告)号：CN109022476B
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN201810774798.3
申请日：2018-07-16
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及基因工程领域，尤其是涉及一种应用于地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)2709的CRISPR‑Cas9基因编辑系统及其应用。所述基因编辑系统是以穿梭质粒pWH1520为载体，将所有调控元件构建于该载体上并经甲基化修饰后所得，所述调控元件包括由pS启动子控制的cas9蛋白、由pLY‑2启动子控制的sgRNA转录盒子，以及上、下游同源臂修复序列HA。所述基因编辑系统应用于地衣芽孢杆菌2709工业菌株存在效率高、设计简单、成本低等优点，基因敲除效率达到90.6％。
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公开(公告)号：CN108660170B
公开(公告)日：2021-08-27
申请号：CN201810498473.7
申请日：2018-05-23
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明提供了一种酶法降解褐藻多糖生成DEH的方法，分别克隆来源于黄杆菌属(Flavobacterium phragmitis)的褐藻多糖裂解酶Flph(GenBank:WP_091498571.1)和褐藻寡糖酶Flphalx(GenBank:WP_091498561.1)的基因，构建表达载体并分别在大肠杆菌宿主中表达，纯化蛋白得到Flph和Flphalx两种重组酶，将两种重组酶按一定比例复配，以褐藻酸钠为底物转化生成褐藻寡糖和DEH(4‑deoxy‑L‑erythro‑5‑hexoseulose uronic acid)，DEH转化率可以达到85％以上。
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公开(公告)号：CN113249421A
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN202110458702.4
申请日：2021-04-27
申请人： 天津科技大学
IPC分类号： C12P21/06 , C07K1/34 , C07K1/30 , C07K1/14 , A23L33/18 , A23L2/66 , A61K8/64 , A61K38/01 , A61Q19/00
摘要： 本发明涉及一种金丝皇菊多肽及应用，金丝皇菊多肽的制备方法包括：预处理；菊花蛋白质提取；菊花多肽制备。本发明以金丝皇菊粉为原料，首先采用碱溶酸沉法提取其中的蛋白质，其次采用蛋白酶水解菊花蛋白，获取低分子量菊花多肽，生产过程绿色环保，产物具备较好α‑葡萄糖苷酶抑制活性和抗氧化等功能，可应用于功能性食品、药品、化妆品等领域，本发明可显著提高菊花利用价值。
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公开(公告)号：CN113151270A
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN202110363144.3
申请日：2021-04-02
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明为提高碱性蛋白酶的活性提供了一种新的启动子P64，该启动子来源于解淀粉芽孢杆菌，通过对基因组转录组数据分析和酶活检测方法获得。在新型启动子P64的调控下，碱性蛋白酶基因在重组工程菌株解淀粉芽孢杆菌P64‑pLF/11018中得到了高效表达，酶活达到12751U/mL，是野生型解淀粉芽孢杆菌(938U/mL)的13.6倍，极具工业应用潜力。本发明除了应用于工业生产外，还为解淀粉芽孢杆菌中外源基因高效表达研究奠定了基础，对促进其基因技术和微生物代谢工程的进一步发展具有重要意义。
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公开(公告)号：CN112522173A
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN202011539757.X
申请日：2020-12-23
申请人： 天津科技大学 , 山东隆科特酶制剂有限公司
摘要： 本发明目的是通过对基因工程宿主的定向改造，提供一株能够高效稳定生产异源蛋白酶的基因工程菌，以解淀粉芽孢杆菌为宿主，首先将宿主的8种胞外蛋白酶aprE、epr、mpr、vpr、nprE、bpr、wprA、aprX缺失，得到胞外蛋白酶缺陷型菌株；还将宿主的α‑淀粉酶和胞外多糖基因簇eps缺失；还将表达异源碱性蛋白酶的高拷贝质粒导入宿主，得到一株高效生产异源碱性蛋白酶的基因工程菌。并且该工程菌在发酵过程中粘性大大降低，利于产物蛋白酶的分离纯化。
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