公开(公告)号：CN105586366A

公开(公告)日：2016-05-18

申请号：CN201610135591.2

申请日：2016-03-10

Applicant: 江南大学 ,  江苏国信协联能源有限公司

Inventor： 石贵阳 ,  陈坚 ,  王宝石 ,  胡志杰 ,  蒋小东 ,  孙福新 ,  谭凤玲 ,  张梁 ,  李由然

IPC: C12P7/48 ,  C12N1/14 ,  C12R1/685

CPC classification number: C12P7/48 ,  C12N1/14

Abstract: 本发明公开一种基于控制菌丝体结构改善柠檬酸发酵性能的方法，包括：将培养成熟的黑曲霉孢子配制成孢子悬液，接种至种子培养基进行种子培养；在种子培养过程中，提高搅拌转速扰动孢子萌发与菌丝缠绕过程，获得成熟种子液；将上述成熟种子液接种至发酵培养基进行发酵培养，结束发酵；所述提高搅拌速度扰动的工艺是在所述种子培养进行6~20h启动的。本发明可获得有利于柠檬酸合成的特定结构菌丝体形态，改善发酵性能，提高柠檬酸产量，同时可降低孢子使用量，降低生产成本，简单易行，具有重要的经济效益和广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN105543112A

公开(公告)日：2016-05-04

申请号：CN201610122783.X

申请日：2016-03-04

Applicant: 江苏国信协联能源有限公司 ,  江南大学

Inventor： 石贵阳 ,  陈坚 ,  胡志杰 ,  李江华 ,  蒋小东 ,  彭艳红 ,  金赛 ,  孙福新 ,  王宝石 ,  王莉

IPC: C12N1/14 ,  C12Q3/00 ,  C12P7/48 ,  C12R1/685

CPC classification number: C12N1/14 ,  C12P7/48 ,  C12Q3/00

Abstract: 本发明提供了一种黑曲霉种子培养方法，通过在培养过程中对产酸速率、耗葡萄糖速率或糖化酶活力中的监控来选择移种的时机；并具体公开了产酸速率、耗葡萄糖速率或糖化酶活力中的测定方法和披露了溶氧浓度对培养过程的影响，解决了现有培养方法中主要依靠观察黑曲霉菌球大小、形态来判断种子的生长状态的不足。本发明的方法培养的种子发酵结果标准差更小，批次间更稳定，发酵转化率提高，发酵周期明显缩短。

公开(公告)号：CN103352007B

公开(公告)日：2016-03-23

申请号：CN201310225029.5

申请日：2013-06-05

Applicant: 江南大学 ,  宜兴协联生物化学有限公司

Inventor： 陈坚 ,  李江华 ,  堵国成 ,  刘龙 ,  李佳伟 ,  胡志杰 ,  孙福新

IPC: C12N1/14 ,  C12P7/48 ,  C12R1/685

Abstract: 本发明公开了一种分两阶段溶氧控制技术提高发酵生产柠檬酸产量的方法，属于发酵过程优化领域。在发酵的第一阶段（28-32h）控制溶氧在45-55%，在发酵的第二阶段（37-50h）控制溶氧在35-45%，用此两阶段溶氧控制工艺，柠檬酸产量得到显著提高，其糖酸转化率最高为99%，而对照实施例的糖酸转化率为86%。本发明所提供的两阶段溶氧控制发酵工艺简单、高效，有着重要的工业应用价值，同时对其它有机酸的发酵法生产就有一定的指导和启迪意义。

公开(公告)号：CN104087624A

公开(公告)日：2014-10-08

申请号：CN201410329786.1

申请日：2014-07-11

Applicant: 江南大学 ,  宜兴协联生物化学有限公司

Inventor： 石贵阳 ,  王宝石 ,  张杰 ,  胡志杰 ,  蒋小东 ,  孙福新 ,  李赢 ,  张梁 ,  李由然 ,  丁重阳 ,  顾正华

IPC: C12P7/48 ,  C12R1/685

Abstract: 一种黑曲霉连续发酵生产柠檬酸的方法，包括以下步骤：（1）黑曲霉经过逐级扩大培养，获得成熟的孢子；（2）孢子液接种至种子培养基，培养成为成熟的种子液；（3）成熟的种子液转接至发酵培养基F1；（4）发酵培养后，分割发酵液为两部分；其中一部分发酵液继续发酵完毕，获得柠檬酸；（5）分割出的另一部分发酵液经分散器分散处理，获得分散菌丝的发酵液；（6）将分散菌丝发酵液接入发酵培养基F2；发酵培养后，回到步骤（4），如此重复实现连续发酵。本发明显著降低生产成本与运行成本，显著缩短生产周期，提高生产效率；同时提高设备利用率，降低劳动强度，过程简便易操作，可以广泛应用于柠檬酸的生产。

公开(公告)号：CN102586128B

公开(公告)日：2014-04-09

申请号：CN201210066444.6

申请日：2012-03-14

Applicant: 江南大学 ,  宜兴协联生物化学有限公司

Inventor： 陈坚 ,  周景文 ,  殷晓霞 ,  堵国成 ,  李江华 ,  胡志杰 ,  蒋小东 ,  孙福新

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/60 ,  C12P7/50 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种通过强化丙酮酸羧化途径促进α-酮戊二酸积累的方法，将来源于米根霉(Rhizopus oryzae)中编码丙酮酸羧化酶的基因RoPYC2过量表达于发酵法生产α-酮戊二酸的菌株Yarrowia lipolytica WSH-Z06中，获得了一株丙酮酸羧化酶活性提高的重组菌，其丙酮酸羧化酶活性提高了10.2倍(达到0.87U/mg protein)；以甘油为唯一碳源，发酵144h后，α-酮戊二酸产量达到47.2g/L，是出发菌株的1.3倍；丙酮酸产量降低到10.4g/L，是出发菌株的49.0％。本发明通过调控三羧酸循环的回补途径，成功实现了碳代谢流从丙酮酸节点流向α-酮戊二酸节点，在提高α-酮戊二酸产量的同时，减少了副产物-丙酮酸的生成。为今后利用代谢工程手段改造菌株促进目标产物过量积累提供了一定的借鉴意义。