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公开(公告)号：CN109529032A
公开(公告)日：2019-03-29
申请号：CN201811472454.3
申请日：2018-12-04
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： A61K39/245 , A61P31/22 , C12N15/85 , C12N15/38
摘要： 本发明涉及疫苗技术领域，具体涉及一种伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gD基因mRNA疫苗，采用如下步骤制备：步骤1：构建PRV-gD基因mRNA克隆质粒和真核质粒；步骤2：伪狂犬病毒增殖与细胞培养；步骤3：抽提伪狂犬病毒DNA；步骤4：设计特异性引物：步骤5：PCR扩增伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gD基因；步骤6：回收后目的片段与pMD19-T载体连接；步骤7：DH5α大肠杆菌感受态细胞的制备以及连接产物的转化；其构建了伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gD基因真核表达载体PVAX-gD，可以刺激机体产生免疫反应并产生特异性抗体和中和抗体，与空白对照有显著的差异；攻毒保护试验表明，真核表达载体具有良好的免疫原性。
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公开(公告)号：CN103882049A
公开(公告)日：2014-06-25
申请号：CN201410124019.7
申请日：2014-03-28
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明提出了一种猪NF-κappaBC-Rel亚基的真核表达载体的构建，其构建方法为：首先，根据C-Rel基因，设计了一对特异性引物P1、P2，用重组PCR的方法扩增出目的基因，使其两段分别带上EcoRⅠ和XhoⅠ的酶切位点，把目的片段和载体双酶切后用SolutionI进行连接反应，再把重组质粒转化入DH5a大肠杆菌，建立PMD19-T-C-Rel重组质粒。其次，把重组质粒和pcDNA3.1(+)载体双酶切后用SolutionI进行连接反应，再把重组质粒转化入DH5a大肠杆菌最后，分别采用了PCR法，双酶切法和测序法三种方法进行筛选和鉴定阳性菌落。测序结果显示重组质粒序列与GenBank中的目的片段序列一致。证明目的基因已经插入pcDNA3.1(+)载体，重组质粒构建成功。
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公开(公告)号：CN102925588A
公开(公告)日：2013-02-13
申请号：CN201210271637.5
申请日：2012-08-02
申请人： 四川农业大学 , 四川省欧邦动物药业有限公司
摘要： 本发明公开了一种快速检测猪巨细胞病毒的LAMP试剂盒，每个反应用量为23μL的LAMP反应液和1μL的BstDNA聚合酶，该23μL的LAMP反应液中各组分及浓度如下：2.5μL的聚合酶缓冲液，3mM的MgSO4，1M甜菜碱，0.4mMdNTP，0.25mM引物F3，0.25mM引物B3，2mM引物FIP，2mM引物BIP；其中，所述2.5μL的聚合酶缓冲液的组分及浓度为：20mM Tris-HCl、其pH 8.8，10mM KCl，10mM(NH4)2SO4，1％Triton X-100。本发明可以高效快速的对可疑PCMV感染进行检测，且检测手段简单，不需要昂贵的实验仪器，适合在临床疾病诊断中推广。
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公开(公告)号：CN102925586A
公开(公告)日：2013-02-13
申请号：CN201210271607.4
申请日：2012-08-02
申请人： 四川农业大学 , 四川川娇生态猪业股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种用于检测猪Kobu病毒的检测试剂盒，检测50个样品的试剂盒组成如下：试剂A：TRIZOL 20ml、氯仿5ml、异丙醇12.5ml、75％乙醇10ml、RNasa-free水1ml；试剂B：5×PrimeScript Buffer 100μl、PrimeScript RT Enzyme Mix I 25μl、Oligo dT Primer 25μl、Random 6 mers 100μl、RNase Free dH2O 250μl；试剂C：上游引物P1 25μl、下游引物P2 25μl、SYBR Green I染料500μl、ddH2O 160μl；上游引物P1：5’-GGACCCAGACACTTACGAACA-3’；下游引物P2：5’-TCGGACCAGAATGGAAAGCA-3’。利用本试剂盒进行实时荧光定量PCR扩增曲线呈现出良好的S型，只出现扩增产物特异性的单个峰，产物的Tm值都在78-79℃之间，说明没有引物二聚体及非特异性扩增产物出现；检测的灵敏度可达10拷贝/微升，且具有很好的重复性。
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公开(公告)号：CN102621305A
公开(公告)日：2012-08-01
申请号：CN201210042330.8
申请日：2012-02-21
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/531
摘要： 本发明公开了一种猪巨细胞病毒抗体间接阻断ELISA检测试剂盒。试剂盒内设有抗体检测板，酶结合物工作液，阻断抗体，样品稀释液，洗涤液，显色液A，显色液B，终止液。该试剂盒的检测板为猪巨细胞病毒gB优势抗原表位区蛋白重组抗原包被的可拆卸96孔酶标板，酶结合物工作液为辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔抗体，阻断抗体为兔抗猪巨细胞病毒gB优势抗原表位区蛋白多克隆抗体。本发明有益的积极效果是：特异性强、灵敏度高、操作简单，适合于临床大规模推广应用，具有广阔的市场前景。
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公开(公告)号：CN106367538B
公开(公告)日：2024-10-18
申请号：CN201611096845.0
申请日：2016-12-02
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明公开了一种用于鉴别诊断PCV2和PEDV病毒的引物，包括引物PEDV‑F、引物PEDV‑R、PCV2‑F和引物PCV2‑R；其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。本发明通过对复合PCR反应体系和反应条件的优化，得到的用于鉴别诊断PCV2和PEDV病毒的方法。能够捕获更多信息且快速精确检测出微量核酸，提升了鉴别、检测的敏感性及特异性，能够快速、特异的检测猪流行性腹泻病毒及猪圆环病毒2型，大大提高了这两种病毒的检测效率。
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公开(公告)号：CN117920007A
公开(公告)日：2024-04-26
申请号：CN202310933318.4
申请日：2023-07-27
申请人： 铜仁职业技术学院 , 岳阳渔美康生物科技有限公司 , 四川农业大学
IPC分类号： B01F31/24 , B01F35/71 , B01F31/20 , A61K9/51 , A61K47/36 , A61K47/02 , A61K31/352 , A61P13/12 , B01F101/22
摘要： 本发明公开了一种混合装置及二氢杨梅素纳米粒的制备方法，涉及制备二氢杨梅素纳米粒的技术领域，混合装置包括托盘、放置架、夹持机构、液体注入机构、密封机构、驱动机构。驱动机构用于往复摆动密封机构；托盘用于放置敞口容器；放置架用于放置托盘，放置架悬设于密封机构下方；夹持机构用于夹持敞口容器，液体注入机构用于给敞口容器注入液体，密封机构用于密封敞口容器。制备方法包括：先将多个敞口容器放置于托盘内，将托盘放置于放置架；夹持机构夹持敞口容器；将溶于乙酸溶液的壳聚糖注入敞口容器，调整pH；充分混合，将溶于无水乙醇的二氢杨梅素、TPP溶液注入敞口容器，充分混合后离心洗涤三次，冻干形成二氢杨梅素纳米粒。
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公开(公告)号：CN115725785B
公开(公告)日：2024-04-05
申请号：CN202211007445.3
申请日：2022-08-22
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种快速高效的荧光RT‑RAA检测RVA的方法，属于生物检测技术领域。本发明提供了一种RT‑RAA荧光法检测RVA的引物，所述引物包括如SEQ ID NO.2和SEQ IDNO.5所示的引物，本发明还提供了一种RT‑RAA荧光法检测RVA的试剂盒，所述试剂盒包括SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.5所示的引物，该引物可利用RT‑RAA荧光检测方法快速高效的检测样品中的RVA，且灵敏度高，重复性好。
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公开(公告)号：CN115976108A
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN202310034864.4
申请日：2023-01-10
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C12N15/869 , C12N15/65 , C12N15/64 , C12N15/34 , C12N15/24 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61K38/20 , A61P31/20
摘要： 本发明公开了一种表达PCV2、PCV3Cap蛋白的重组伪狂犬病毒载体、构建方法与应用，属于疫苗技术领域。该构建方法包括以下步骤：(1)将SEQ ID NO.1序列插入到pEGFP‑gI28k真核表达质粒中，获得pEGFP‑gI28k‑2Cap‑3Cap‑IL4质粒；(2)pEGFP‑gI28k‑2Cap‑3Cap‑IL4质粒和psgRNA‑gE质粒转染BHK‑21细胞，再接种PRV‑XJ‑ΔTK病毒液；(3)待细胞出现80％的病变并观察到发出绿色荧光的病毒蚀斑时，反复冻融，离心取上清，上清液中含有PRV真核表达载体rPRVXJ‑ΔgE/gI/TK‑2Cap‑3Cap‑IL4；(4)纯化载体。
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