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    一种生物酶法合成黄素腺嘌呤二核苷酸的方法
    51.
    发明公开
    一种生物酶法合成黄素腺嘌呤二核苷酸的方法 审中-实审

    公开(公告)号：CN117625509A

    公开(公告)日：2024-03-01

    申请号：CN202311740605.X

    申请日：2023-12-18

    申请人： 邦泰生物工程(深圳)有限公司

    发明人： 王国红 ,  周志刚 ,  高升 ,  张琦

    IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12P19/36 ,  C12R1/19

    摘要： 本发明提供一种生物酶法合成黄素腺嘌呤二核苷酸的方法，将FAD合成酶基因构建在pET‑28a(+)载体上，命名为pET‑28a(+)‑SdFADs，将质粒pET‑28a(+)‑SdFADs转到大肠杆菌感受态细胞BL21（ED3）构建重组菌，并进行诱导表达。以FMN、ATP、Mg2+为底物，加入重组菌产生的含FAD合成酶的粗酶液催化合成黄素腺嘌呤二核苷酸。FAD合成酶是一个双功能酶，具有核黄素激酶的催化活性和FMN腺苷酰转移酶的催化活性，既可将RF催化合成FMN，也可将FMN催化合成FAD。称取FMN 20mM，ATP 30mM，Mg2+35mM，加入6g/L粗酶液，在40℃恒温水浴锅中，pH8.0条件下反应2h，NMN产量为11.82g/L。

    一种高效酶法合成烟酰胺单核苷酸的方法
    52.
    发明公开
    一种高效酶法合成烟酰胺单核苷酸的方法 审中-实审

    公开(公告)号：CN117448250A

    公开(公告)日：2024-01-26

    申请号：CN202311599842.9

    申请日：2023-11-28

    申请人： 邦泰生物工程(深圳)有限公司

    发明人： 王国红 ,  刘倩敏 ,  舒尚科 ,  高升 ,  郭帅印 ,  周志刚 ,  张琦

    IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N9/12 ,  C12N15/70 ,  C12P19/30 ,  C12R1/19

    摘要： 本发明提供一种高效酶法合成烟酰胺单核苷酸的方法，将PPK2基因和NRK基因构建在同一个pET‑28a(+)载体上，实现2个基因共表达，命名为pET‑28a(+)‑PPK2‑NRK，将质粒pET‑28a(+)‑PPK2‑NRK转到大肠杆菌感受态细胞BL21（ED3）构建重组菌，并进行诱导表达。以NR‑CL、ATP、MgCL2、(NaPO3)6为底物，加入重组菌产生的含PPK2酶和NRK酶的粗酶液催化合成烟酰胺单核苷酸。其中PPK2催化ADP转化为ATP，或者将AMP催化成ADP，再将ADP转化为ATP，使ATP在反应体系中再生循环，NRK催化NR‑CL和ATP合成NMN。称取NR‑CL 390mM，ATP 35mM，MgCL 280 mM，(NaPO3)6 75mM，加适量水溶解，待物质充分溶解后，加入3g/L粗酶液，在40℃恒温水浴锅中，pH7.0条件下反应3h，NMN产量为127.6g/L。

    一种合成鹅去氧胆酸的方法及其应用
    53.
    发明授权
    一种合成鹅去氧胆酸的方法及其应用 有权

    公开(公告)号：CN112334476B

    公开(公告)日：2022-03-15

    申请号：CN201980042284.1

    申请日：2019-09-09

    申请人： 邦泰生物工程(深圳)有限公司

    发明人： 张贵平 ,  韩魁元 ,  李海斌 ,  王秦 ,  李振伟 ,  张琦

    IPC分类号： C07J9/00

    摘要： 一种合成鹅去氧胆酸的方法及其应用，涉及医药化工产品合成的技术领域，旨在解决现有的生产鹅去氧胆酸的方法所存在的生产成本较高的技术问题。该方法以来源广泛且价格低廉的海豹胆酸为起始原料，通过化学合成方法依次转化成式3所示的化合物、式4所示的化合物和式5所示的化合物，最后由式5所示的化合物转化成鹅去氧胆酸，可用于制备熊去氧胆酸及其衍生物的工业生产中。

    一种烟酰胺单核苷酸的纯化方法
    54.
    发明授权
    一种烟酰胺单核苷酸的纯化方法 有权

    公开(公告)号：CN108026132B

    公开(公告)日：2021-08-13

    申请号：CN201680003982.7

    申请日：2016-07-30

    申请人： 邦泰生物工程(深圳)有限公司

    发明人： 傅荣昭 ,  张琦 ,  张冬民

    IPC分类号： C07H1/06 ,  C07H19/048

    摘要： 一种烟酰胺单核苷酸的纯化方法，涉及对生物催化法制备得到的NMN的粗产物进行纯化的方法。该方法的目的在于解决现有NMN的纯化方法存在的收率低和纯化产物纯度低的问题，该方法包括以下步骤：A、将生物催化法制备得到的烟酰胺单核苷酸粗产物上阴离子交换树脂柱，用水洗脱，收集洗脱液；B、步骤A的洗脱液进行纳滤浓缩处理，收集浓缩液；C、步骤B的浓缩液上螯合树脂柱，用水洗脱，收集洗脱液；D、步骤C的洗脱液经浓缩、干燥处理后即得纯化后的烟酰胺单核苷酸成品。该方法对于采用生物催化法制备NMN所获得的NMN粗产物的纯化具有普遍适用性。

    一种氧化型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸的纯化方法
    59.
    发明授权
    一种氧化型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸的纯化方法 有权

    公开(公告)号：CN104876993B

    公开(公告)日：2017-12-15

    申请号：CN201510255144.6

    申请日：2015-05-19

    申请人： 邦泰生物工程(深圳)有限公司

    发明人： 傅荣昭 ,  戴柱 ,  张琦

    IPC分类号： C07H19/207 ,  C07H1/06

    CPC分类号： C07H1/06 ,  C07H19/207 ,  C07H21/02

    摘要： 本发明公开一种氧化型β‑烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸的纯化方法，其具体包括以下步骤：a、将经过预处理的辅酶Ⅱ溶液用膜浓缩设备先后进行微滤和纳滤，获得浓缩的粗品溶液；b、将获得的粗品溶液pH值调至2‑4，进样上反相高效液相色谱制备柱，进行梯度洗脱纯化，得到纯化的样品溶液；c、将纯化的样品溶液用膜浓缩设备进行纳滤后，用真空冷冻干燥机冻干，获得纯化的辅酶Ⅱ。通过本发明所制备的辅酶Ⅱ纯度高，收率高，具有良好的市场前景。