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公开(公告)号：CN104152474A
公开(公告)日：2014-11-19
申请号：CN201410405713.6
申请日：2014-08-18
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
Abstract: 本发明公开了一种烟草番茄红素β环化酶基因，其碱基序列如SEQIDNO：1所示。本发明研究了Ntβ-LCY基因在烟草不同时期不同器官中的转录水平表达模式，发现该基因主要表达在幼叶中；利用OE和RNAi两种方法研究了Ntβ-LCY基因在表达量变化情况下对烟草植株生长发育情况及色素含量的影响，分析了Ntβ-LCY基因在烟草中的重要功能。首先是先得到基因，可以明确而有针对性地对该基因开展研究；其次是采用稳定的转基因技术分析基因功能。
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公开(公告)号：CN103954710A
公开(公告)日：2014-07-30
申请号：CN201410221024.X
申请日：2014-05-23
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC: G01N30/06
Abstract: 一种LC-MS/MS检测烟草及烟草制品中特有亚硝胺的样品前处理方法，步骤如下：1）配制乙酸铵缓冲溶液；2）烟草及烟草制品的干燥、粉碎；3）粉碎好的样品加入乙酸铵缓冲溶液，超声提取；4）提取完的样品室温高速离心，得第一上清液；5）在第一上清液中加入乙酸乙酯进行萃取净化后，离心得第二上清液；6）取第二上清液经氮气吹干、去离子水复溶，制得待测样品；7）通过LC-MS/MS对待测样品中含有的烟草特有亚硝胺进行检测。本发明的优点在于：样品前处理方法简单易行，利用乙酸铵缓冲溶液将烟草特有亚硝胺溶出，并通过乙酸乙酯液液萃取进行净化，除去了蛋白质和干扰物质，得到除杂后的精制样液，使得样品检测具有较高精确度，且提取效率高，操作简便、省时，试剂消耗量小。
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公开(公告)号：CN103919264A
公开(公告)日：2014-07-16
申请号：CN201410140980.5
申请日：2014-04-10
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
Abstract: 一种节能高效的新鲜烟叶冷冻干燥方法，其特征在于：具体步骤如下：1）冻干机预冷、装料，2）新鲜烟叶样品预冻；3）一次干燥；4）二次干燥；5）最后升温至20℃，真空度为0-5mTorr，在该条件下继续干燥，使样品充分干燥并将温度恢复至室温，可避免取出样品后由于温度较低形成冷凝水而使样品再次吸水。本发明的优点在于：1，提供了一种大批量鲜烟叶样品的冷冻干燥方法，所获得的冻干样品可直接用于烟叶代谢组学分析，保证烟叶样品冷冻干燥过程、程度的一致性、分析数据的统一性；2，冷冻、干燥过程节能高效，3、程序设定好后，一键操作即可，一般人员就可以完成，简单易行。
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公开(公告)号：CN103805576A
公开(公告)日：2014-05-21
申请号：CN201410062817.1
申请日：2014-02-24
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
CPC classification number: C12N9/0083 , C12N15/8243 , C12Y114/99007
Abstract: 本发明公开了一种烟草鲨烯环氧酶蛋白，其氨基酸序列如SEQIDNO：1所示。烟草鲨烯环氧酶基因NtSE是烟草甾醇合成途径的关键调控基因。在幼嫩组织中特异高表达，将构建好的病毒介导的基因沉默载体TRV-NtSE接种本氏烟草，并得到高沉默效率的植株，检测本氏烟草中植物甾醇的含量，发现基因沉默植株中甾醇含量显著下降，下降了21.37%，表明沉默该基因可以显著的降低植物的甾醇含量。烟草鲨烯环氧酶基因NtSE是烟草甾醇合成途径的关键调控基因，可用于调节烟草的甾醇含量，有助于低甾醇优质烟草的基因工程育种。
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公开(公告)号：CN103713072A
公开(公告)日：2014-04-09
申请号：CN201410004090.1
申请日：2014-01-06
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC: G01N30/06
Abstract: 一种GC-MS靶向性烟草样品甾醇提取方法，包括以下工艺步骤：1）烟草样品冷冻冻干，粉碎机打碎；2）粉碎好样品50mg加入正己烷1.5ml，超声提取；3）提取完样品室温高速离心，上清转移到色谱瓶，氮气吹干，为一；4）沉淀加80%甲醇、20%KOH溶液1.2ml；5）高速离心，取上清转移至色谱瓶，加正己烷1.0ml，震荡、静置；6）取上清，加饱和NaCl1.0ml，取上清为溶液二，一二合并，氮气吹干，加氯仿0.5ml溶解后，即为专一适于GC-MS测定的烟草样品甾醇上样分析溶液。本发明的优点在于：提供了一种最适合烟草叶片甾醇的提取方法；样品用量少，仅为50mg；有机试剂使用种类少，使用量少，相对便宜，毒性较小；提取时间更短，样品重现性较好。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119592579A
公开(公告)日：2025-03-11
申请号：CN202411949896.8
申请日：2024-12-27
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/83 , A01H5/00 , A01H6/82
Abstract: 本发明属于烟草基因工程领域，具体涉及NtKAT2.3在烟草阿魏酸合成调控中应用。所述烟草基因NtKAT2.3的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。NtKAT2.3基因表达量与烟草中阿魏酸含量负相关。初步研究结果表明，本申请所涉及的NtKAT2.3基因与烟草阿魏酸含量高度相关，在将该基因沉默后，基因沉默后烟草株系中阿魏酸含量有十分明显提高。基于此结果，发明人认为，在对该基因进一步深入研究基础上，有望可为烟草品质改进以及进一步新品种培育奠定良好的技术基础。
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公开(公告)号：CN119570768A
公开(公告)日：2025-03-07
申请号：CN202411594306.4
申请日：2024-11-09
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
Abstract: 本发明提供了一种基于深度学习模型设计的高活性果胶酶突变体DS‑4及其制备和应用，该果胶酶突变体DS‑4的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。利用深度学习模型ProteinMPNN，对果胶酶序列进行了重新设计，获得了酶活性比野生型提高2倍以上的突变体DS‑4。DS‑4与WT序列相比，共有70个氨基酸发生了替换。该果胶酶在食品加工、纺织、造纸和生物能源等工业领域具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN117025627B
公开(公告)日：2024-11-01
申请号：CN202310785468.5
申请日：2023-06-29
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/82
Abstract: 本发明公开了烟草氯离子通道蛋白NtCLC13及其编码基因和应用，属于植物基因工程技术领域。本发明克隆获得烟草氯离子通道蛋白NtCLC13的编码基因NtCLC13基因，而且利用亚细胞定位分析发现，烟草氯离子通道蛋白NtCLC13定位在细胞质中。利用CRISPR/Cas9技术，通过农杆菌转化法将构建的基因编辑载体转入烟草植株中，成功构建了NtCLC13基因敲除烟草植株。敲除株叶片氯离子含量显著降低，这使培育低氯烟草新品种成为可能，为改善我国部分烟区烤烟氯含量偏高的情况提供一个新的方向。同时丰富了烟草中氯离子调控的基因网络，对调控烟草中氯离子含量、进一步了解氯离子转运的分子调控有重要意义。
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公开(公告)号：CN116064579B
公开(公告)日：2024-09-27
申请号：CN202211091210.7
申请日：2022-09-07
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC: C12N15/29 , C12N15/84 , C07K14/415 , A01H5/12 , A01H6/82
Abstract: 本发明涉及一种影响烟草腺毛密度基因NsCINS、编码蛋白及其应用，其基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明通过构建NsCINS基因超量表达载体，转化至烟草中，获得NsCINS基因超表达的烟草植株，发现转基因烟草植株的腺毛密度显著增加，表明该基因与烟草腺毛密度密切相关。本发明有助于研究腺毛及香气形成的机制，为进一步高腺毛密度烟草新品种培育奠定技术基础。
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公开(公告)号：CN117405797A
公开(公告)日：2024-01-16
申请号：CN202311514128.5
申请日：2023-11-14
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
Abstract: 本发明提供一种烟草根系土壤代谢物的GC‑MS检测方法和应用，涉及土壤代谢物检测技术领域。本发明提供的烟草根系土壤代谢物的GC‑MS检测方法包括以下步骤：1)将烟草根系土壤在提取剂中进行代谢物提取，离心后取上清液进行干燥得到干燥样品，所述提取剂为乙腈水溶液、异丙醇和乙腈的混合水溶液或正己烷和异丙醇组成的混合溶液；2)将干燥样品进行衍生化反应，得到待检测样品；3)对待检测样品进行GC‑MS检测，所述检测时使用的色谱柱为DB‑5MS色谱柱。通过选用包含乙腈或正己烷和异丙醇的提取剂进行超声提取，并采用DB‑5MS色谱柱进行色谱分析，提高初生代谢物的提取效率和分离效率，进而提高初生代谢物的检测准确性。
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