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公开(公告)号：CN103981207A
公开(公告)日：2014-08-13
申请号：CN201410249906.7
申请日：2014-06-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种利用重组Bacillus subtilis全细胞转化胆固醇生成胆甾-4-烯-3-酮的方法，属于基因工程和酶工程领域。本发明首先获得新金色分枝杆菌中胆固醇氧化酶(ChoM)的基因扩增，然后利用pMA5质粒，实现了该基因在模式菌株枯草芽孢杆菌168中的过量表达。本发明构建以胆固醇为底物全细胞转化为方法的高产胆甾-4-烯-3-酮的枯草芽孢杆菌工程菌株，对该菌株的酶活力及发酵性能进行研究发现胆固醇氧化酶的活力较出发菌株有了明显提高，以0.1％(w/v)胆固醇为底物，全细胞转化24h，底物摩尔转化率达到67％和83％，是出发菌株相对转化率的20和25倍。本发明为微生物一步发酵法生产胆甾-4-烯-3-酮的工业化提供了有益的指导。
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公开(公告)号：CN103602624A
公开(公告)日：2014-02-26
申请号：CN201310342415.2
申请日：2013-08-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明从B.amyloliqefaciens B10-127中克隆出参与2,3-丁二醇合成途径中辅酶循环再生的关键酶基因3-磷酸甘油醛脱氢酶(gapdh)和3-羟基-2-丁酮还原酶(acr)，并将该基因与穿梭表达质粒pMA5-HpaII连接，成功构建了携带基因gapdh和acr基因的穿梭表达质粒pMA5-HpaII-acr-HapII-gapdh，并转入解淀粉芽孢杆菌B10-127中，获得加强gapdh和acr基因表达的解淀粉芽孢杆菌pMA5-HpaII-acr-HapII-gapdh／B.amyloliquefaciens。原始菌株相比，重组菌2,3-丁二醇产量提高了14.7％，副产物如3-羟基-2-丁酮、乳酸和丁二酸的积累分别降低65.6％、43.8％和42.4％，且发酵周期有所缩短。通过补料流加发酵，2,3-丁二醇产量达到121.3g／L。
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公开(公告)号：CN103243128A
公开(公告)日：2013-08-14
申请号：CN201310196284.1
申请日：2013-05-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种利用天津短杆菌和植物乳杆菌混合发酵高产γ-氨基丁酸的方法，属于发酵工程和酶工程领域。本发明利用天津短杆菌SW07-1将葡萄糖转化为谷氨酸，再经植物乳杆菌GB01-21将上步发酵液的谷氨酸转化为γ-氨基丁酸。转化前，谷氨酸发酵液调到谷氨酸脱羧酶最适pH，建立转化体系，第二步发酵液经过滤或离心的方法得到植物乳杆菌GB01-21的菌体，将其添加到转化体系进行全细胞转化。发酵液原有谷氨酸转化完毕时转化液γ-氨基丁酸为59.2g/L，摩尔转化率为93.6％。继续添加外源谷氨酸转化完毕后GABA含量为96.5g/L，摩尔转化率为91.8％。
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公开(公告)号：CN103215198A
公开(公告)日：2013-07-24
申请号：CN201310043508.5
申请日：2013-02-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 利用重组钝齿棒杆菌以葡萄糖为底物一步法合成γ-氨基丁酸的方法属于基因工程和酶工程领域。本发明应用基因工程方法，将钝齿棒杆菌SYPA5-5基因argB敲除，获得能够积累谷氨酸的安全菌株钝齿棒杆菌E01；从L.Plantarum GB01-21克隆谷氨酸脱羧酶基因于钝齿棒杆菌E01中表达，获得以葡萄萄糖为底物直接合成γ-氨基丁酸的重组钝齿棒杆菌C.crenatum E01/pGAD。重组菌发酵液γ-氨基丁酸积累量达13.98g/L。此发明成功整合谷氨酸和γ-氨基丁酸代谢途径，实现葡萄糖到γ-氨基丁酸一步法生产，简化制备途径，降低成本，提高安全性，为氨基酸的高效低成本制备提供崭新的思路。
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公开(公告)号：CN102952789A
公开(公告)日：2013-03-06
申请号：CN201210360552.4
申请日：2012-09-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种β-甘露聚糖酶耐酸性定点改造的方法，其特征是针对一种来源于枯草芽孢杆菌B.subtilis 6-7(CTCCM 2009200)的β-甘露聚糖酶在理性设计的基础上，通过重叠PCR技术进行定点突变，经定点改造后的β-甘露聚糖酶基因与表达载体pMA5连接，转化枯草芽孢杆菌168菌株，成功获得一株β-甘露聚糖酶耐酸性得到显著提高的重组菌株pMA5-gmuGb54/B.subtilis 168，其相对酶活力提高了6.2％，摇瓶水平酶活为3226.23U/mL，最适pH由6.5下降到5.5，此突变酶更利用应用在饲料工业中。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102703494A
公开(公告)日：2012-10-03
申请号：CN201210210431.1
申请日：2012-06-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种利用重组Bacillus subtilis全细胞转化AD生成ADD的方法，属于基因工程和酶工程领域。本发明首先获得新金色分枝杆菌中3-甾酮-Δ1-脱氢酶(KSDD)的基因扩增，然后利用pMA5质粒，实现了该基因在模式菌株枯草芽孢杆菌168中的过量表达。本发明构建以4-AD为底物全细胞转化为方法的高产ADD的枯草芽孢杆菌工程菌株，对该菌株的酶活力及发酵性能进行研究发现3-甾酮-Δ1-脱氢酶的活力较出发菌株有了明显提高，以0.1％(w/v)4-AD为底物，全细胞转化10h，底物摩尔转化率达到65.7％，是出发菌株相对转化率的20倍。本发明为微生物一步发酵法生产ADD的工业化提供了有益的指导。
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公开(公告)号：CN119751602A
公开(公告)日：2025-04-04
申请号：CN202411780426.3
申请日：2024-12-05
Applicant: 江南大学
IPC: C07K14/195 , C12N15/31 , C12N1/21 , C02F3/34 , C12R1/01 , C02F101/32
Abstract: 本发明公开了一种通过过表达基因marR提高氧化葡萄糖酸杆菌耐受苯乙烯胁迫的方法，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明通过在氧化葡萄糖酸杆菌中过表达MarR家族转录调控因子marR(GOX_RS11840)，显著提高了氧化葡萄糖酸杆菌对苯乙烯胁迫的耐受能力；将利用本发明的方法制备得到的重组氧化葡萄糖酸杆菌在15g/L苯乙烯的环境下胁迫培养10h后的存活率为氧化葡萄糖酸杆菌对照菌株的1.6倍。
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公开(公告)号：CN118755648A
公开(公告)日：2024-10-11
申请号：CN202410729588.8
申请日：2024-06-06
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/54 , C12N15/31 , C12P13/10 , A23L33/135 , A61K48/00 , A61K35/741 , A61P1/16 , A61P1/00 , C12R1/19
Abstract: 发明公开了高产L‑鸟氨酸大肠杆菌Nissle 1917的构建及其益生功能，属于生物技术领域。本发明利用Crisper Cas9技术对代谢路径进行修饰，构建L‑鸟氨酸生产菌株，利用筛选获得的内源性启动子对代谢路径关键基因过表达，引入谷氨酸棒杆菌来源的基因增强代谢通量，同时通过修饰葡萄糖吸收路径、L‑鸟氨酸转运蛋白，进一步增强L‑鸟氨酸积累获得最终改造菌株CEcN。最终5L上罐发酵L‑鸟氨酸产量为14.2g·L‑1。选用雄性小鼠C57BL/6J随机分组比较灌胃L‑鸟氨酸改造菌株对正常小鼠的生长影响及其在急性酒精条件下对肝肠的保护作用，改造菌株表现出明显的肝肠保护作用。
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公开(公告)号：CN118581058A
公开(公告)日：2024-09-03
申请号：CN202410629904.4
申请日：2024-05-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种微生物转化廉价底物生产S‑腺苷蛋氨酸的方法，属于工业微生物领域。本发明以Escherichia coliBL21(DE3)为底盘细胞，通过理性设计对S‑腺苷蛋氨酸合成酶(MAT)进行改造，得到双突变体MATI195V/S150A。其比酶活相对与野生株提高176％。同时，通过引入ATP再生途径，实现胞内ATP高效供给供给，构建一株产SAM的大肠杆菌重组菌，并对其进行全细胞转化，使最终SAM产量达到13.6g/L，达到以廉价底物高效生产SAM的目的，具有重要的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN114722474B
公开(公告)日：2024-04-19
申请号：CN202210421045.0
申请日：2022-04-21
Applicant: 江南大学
IPC: G06F30/13 , G06F30/23 , G06F119/14
Abstract: 本发明公开了一种预应力锚索加固含裂隙膨润土边坡稳定性分析方法，提出一种旋转‑平移组合机构来评估含裂隙膨润土边坡的稳定性，采用平移机构模拟裂隙滑动面，旋转机构模拟圆弧滑动面。针对膨润土单位重度沿土层深度呈非线性变化的特性，将滑动土体离散为一系列土单元，采用分层总和法和旋转体积积分方法计算膨润土重力所做的功率，累加得到重力所做的总功率。根据容重增加原理得到膨润土边坡安全系数表达式，并基于枚举法搜索边坡最小安全系数，得到其相应的临界滑动面。本发明可有效地将膨润土强度理论和极限分析方法结合起来，对边坡吸力效应和锚索作用机制进行合理的解释，对指导边坡设计、施工和加固具有重要的学术价值和现实意义。
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