一种产蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌

    公开(公告)号:CN110452845B

    公开(公告)日:2021-03-02

    申请号:CN201910754470.X

    申请日:2019-08-15

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明公开了一种产蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌,属于微生物技术领域。本发明将SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,以pET‑28a为载体构建重组质粒pET‑28a‑SPase,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,构建得到重组大肠杆菌,发酵产重组蔗糖磷酸化酶,并通过紫外诱变法对构建好的重组菌进行诱变,筛选出高产蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌菌株,其发酵胞内破壁上清酶活为819.16U/mL,比酶活为206.91U/mg,其稳定的产酶性可以为进一步的理论研究和实际生产应用打下基础,实践应用意义重大。

    一种以中性普鲁兰酶催化酶法制备粉丝的方法

    公开(公告)号:CN107156799B

    公开(公告)日:2019-11-29

    申请号:CN201710387714.6

    申请日:2017-05-27

    申请人: 江南大学

    IPC分类号: A23L29/30

    摘要: 本发明涉及一种以中性普鲁兰酶催化酶法制备粉丝的方法,属于食品工程和酶工程技术领域。其以淀粉为原料制作粉丝时,在制芡糊阶段,在淀粉糊化后在糊化液中加入重组普鲁兰酶GsP,根据淀粉的实际情况在60℃适当保温;然后继续按照粉丝的传统制作工艺加入干淀粉进行揉粉团并继续其他的工艺步骤。利用本方法制作生产的粉丝的质量与传统工艺相比基本相同。在原有的酶法粉丝制作方法的基础上,利用本发明的方法可以大幅度减少酶的使用。

    一种提高米曲霉曲酸产量的方法

    公开(公告)号:CN105647815B

    公开(公告)日:2019-08-06

    申请号:CN201510942917.8

    申请日:2015-12-16

    申请人: 江南大学

    IPC分类号: C12N1/14 C12P17/06 C12R1/69

    摘要: 本发明提供了一种提高米曲霉曲酸产量的方法,属于发酵工程技术领域。具体地,通过改变培养基关键组分的浓度与接种条件控制米曲霉的菌落形态为球形(菌体处于最佳产酸形态),进而提高曲酸产量。当菌体形态为菌球时,米曲霉(A.oryzae)的产酸能力比菌丝时明显提高,曲酸产量可达15.11g/L。同时,菌球直径范围为0.25~0.35mm时,单位细胞曲酸积累量最高为0.778g/g。本发明优化了种子培养基中葡萄糖、酵母提取物浓度和孢子浓度,控制菌球大小,从而提高了米曲霉单位细胞曲酸产量,具有很好的应用前景。

    一种产酪醇的重组菌株及其构建方法

    公开(公告)号:CN106754607A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201710091999.9

    申请日:2017-02-21

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明公开了一种产酪醇的重组菌株及其构建方法,属于微生物领域。本发明利用基因工程技术构建重组载体pRSFDuet‑ARO10‑ARO8,将其转化经过基因工程改造的敲除基因pheA和基因feaB的大肠杆菌BL21(DE3),获得菌株BE0,通过全细胞催化反应,以10mM酪氨酸为底物,发酵20h可产酪醇达6.73mM,酪氨酸转化率可达67.3%,在此重组菌的基础上,经过化学诱变,从而得到了一株性能优化高产酪醇的重组菌株BE2,通过全细胞催化反应,以10mM酪氨酸为底物,发酵20h可产酪醇达8.71mM,酪氨酸转化率可达87.1%。

    一种以淀粉支链水解酶替代明矾的酶法粉丝制作方法

    公开(公告)号:CN105104927A

    公开(公告)日:2015-12-02

    申请号:CN201510439893.4

    申请日:2015-07-24

    申请人: 江南大学

    IPC分类号: A23L1/09

    摘要: 一种以淀粉支链水解酶替代明矾的酶法粉丝制作方法,属于食品工程和酶工程技术领域。本发明以各种植物淀粉为原料,在粉丝制作传统方法的基础上,在粉丝制作的淀粉糊化阶段后,增加一个淀粉支链水解酶作用阶段,即在淀粉糊化阶段后将淀粉糊化液温度降至适合淀粉支链水解酶作用的温度再加入普鲁兰酶、异淀粉酶等水解淀粉支链即α-1,6糖苷键的水解酶,适当保温。也可以在糊化前加入淀粉支链水解酶,在淀粉糊化后将糊化液在适合淀粉支链水解酶作用的温度适当保温。其它步骤与粉丝制作的传统方法一样。本发明提供一种不使用明矾的粉丝制作方法,所使用的添加剂淀粉支链水解酶相对明矾有较好的食品安全性并且用量较小,与现有的方法相比可以减少食品添加剂的使用并且具有易于放大的优点。

    一种利用发酵液分割法提高发酵罐使用效率的糖化酶发酵工艺

    公开(公告)号:CN105063131A

    公开(公告)日:2015-11-18

    申请号:CN201510533363.6

    申请日:2015-08-27

    申请人: 江南大学

    IPC分类号: C12P19/14 C12R1/685

    摘要: 一种利用发酵液分割法提高发酵罐使用效率的糖化酶发酵工艺,属于酶工程和发酵工程技术领域。本发明是在黑曲霉GB0506糖化酶发酵酶活线性增长末期,将发酵液分配到几个未使用的发酵罐中,加新鲜发酵培养基继续发酵,确定发酵液分割的最佳时机为发酵118-120小时,最佳分割方式为1罐分割为3罐。与原有工艺相比,采用该法获得的发酵液最终发酵酶活没有明显变化,但平均每一发酵罐在罐发酵时间大幅下降,极大节约发酵过程电能消耗。本发明还提供一种针对将发酵液平均分配到3个发酵罐的发酵罐组合使用方法,在相应工艺条件下,单位发酵体积的发酵强度提高54%以上。利用发酵液分割法的糖化酶发酵新工艺为酶制剂生产企业在原有设备基础上大幅提高发酵罐使用效率。