一种高灵敏TaqMan实时荧光定量PCR检测核酸的方法

    公开(公告)号:CN116732150A

    公开(公告)日:2023-09-12

    申请号:CN202310872773.8

    申请日:2023-07-17

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种高灵敏TaqMan实时荧光定量PCR检测核酸的方法,属于痕量检测技术领域。本发明提供了一种高灵敏TaqMan实时荧光定量PCR检测核酸的方法,包括以下步骤:根据待测核酸设计特异性引物和至少1条探针,利用所述待测核酸、特异性引物和至少1条探针构建高灵敏TaqMan实时荧光定量PCR体系,进行高灵敏TaqMan实时荧光定量PCR反应。本发明成功建立一种高灵敏TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,重复性良好,且检测灵敏度高,特异性好。

    琼脂糖在制备生物大分子冻干保护剂中的应用

    公开(公告)号:CN113862332A

    公开(公告)日:2021-12-31

    申请号:CN202111092731.X

    申请日:2021-09-17

    Applicant: 浙江大学

    Inventor: 董伟仁 周继勇

    Abstract: 本发明涉及琼脂糖在制备生物大分子冻干保护剂中的应用,以及利用琼脂糖对生物大分子进行冻干保存的方法。本发明的有益效果主要体现在:本发明提供了琼脂糖在制备生物大分子冻干保护剂中的应用,以琼脂糖为冻干保护剂,冻干后琼脂糖可形成三维网状立体空间结构,为冻干体系中的生物分子提供空间支撑、防止生物分子冻干后的空间塌陷,且琼脂糖不与生物分子反应、不会引入二次污染,对于生物大分子的冻干、运输、活性维持、复溶和常温保存具有重要意义。

    一种用于检测、鉴别猪伪狂犬病毒Ⅰ型和Ⅱ型的引物组合、试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN113151586A

    公开(公告)日:2021-07-23

    申请号:CN202110081815.7

    申请日:2021-01-21

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了用于检测、鉴别猪伪狂犬病毒Ⅰ型和Ⅱ型的引物组合、试剂盒及方法。所述引物组合包括:上游引物Ⅰ:5’‑GAAGCCCCCGCGGAACAA‑3’,上游引物Ⅱ:5’‑CGCGGCCTCCACGCCCGC‑3’,下游引物:5’‑GCGAGGGAGGCGTTGGCG‑3’,其中,上游引物Ⅰ与下游引物配合用于扩增Ⅰ型猪伪狂犬病毒获得283bp序列,上游引物Ⅱ与下游引物配合用于扩增Ⅱ型猪伪狂犬病毒获得351bp序列。本研究通过生物信息学分析方法明确可用于基因分型的gC靶基因,并首次利用AS‑PCR原理来设计分型引物,并通过实验筛选到特异性分型的上游引物,而共用保守下游引物,进而减少了体系中的引物种类与数量,降低错配的可能,从而提高扩增效率,最终建立了灵敏度为104的单重PCR和灵敏度为104的双重PCR检测体系。

    分泌抗狂犬病毒M蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及应用

    公开(公告)号:CN109970852B

    公开(公告)日:2020-10-13

    申请号:CN201910258004.2

    申请日:2019-04-01

    Applicant: 浙江大学

    Inventor: 周继勇

    Abstract: 本发明公开了一种分泌抗狂犬病毒M蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及应用,属于生物技术领域。所述杂交瘤细胞株的分类命名为杂交瘤细胞株4A1,于2019年4月1日保藏于中国典型培养物保藏中心,地址:中国武汉,武汉大学,保藏编号为CCTCC NO:C201947。该杂交瘤细胞株制备的单克隆抗体效价高,特异性好,生物学特性优良;鉴定了其识别RABV M蛋白的精细抗原变异表位,能够用于区分疫苗Flury毒株和其它RABV毒株;将其应用于制备检测狂犬病毒RABV的试剂盒,可以检测RABV感染以及鉴别诊断疫苗Flury毒株和其它RABV毒株。

    祛铁药物在制备H7N9型禽流感防治药物中的应用

    公开(公告)号:CN109045000A

    公开(公告)日:2018-12-21

    申请号:CN201810783148.5

    申请日:2018-07-17

    Applicant: 浙江大学

    Inventor: 王福俤 周继勇

    CPC classification number: A61K31/16 A61P31/16

    Abstract: 本发明涉及医药学领域,通过对H7N9型禽流感患者体内的血清铁含量的检测,发现血清铁降低在机体对抗H7N9禽流感感染中发挥着重要的作用,并通过实验数据公开祛铁药物在制备H7N9型禽流感防治药物中的应用,为H7N9禽流感病毒的防治提供了理论依据,特别是对防治H7N9禽流感病毒的药物研发提供了基础。

    用于生产转基因猪的piggyBac转座载体及其构建方法

    公开(公告)号:CN101659967B

    公开(公告)日:2011-09-28

    申请号:CN200910152602.8

    申请日:2009-09-10

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于生产转基因猪的piggyBac转座载体的构建方法,包括以下步骤:将加入了FRT位点的ZsGFP基因连接到转座子PXL-BAC II上形成重组载体PXL-BAC II-ZsGFP;再将加入了FRT位点的Neomycin Resistant基因连接到PXL-BAC II-ZsGFP,得重组通用载体PXL-BAC II-ZsGFP-Neo。该载体具有SEQ ID No:1所示的核苷酸序列。本发明的转座载体能满足细胞筛选、鉴定及高效转基因的要求。

    用于生产转基因猪的piggyBac转座载体及其构建方法

    公开(公告)号:CN101659967A

    公开(公告)日:2010-03-03

    申请号:CN200910152602.8

    申请日:2009-09-10

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于生产转基因猪的piggyBac转座载体的构建方法,包括以下步骤:将加入了FRT位点的ZsGFP基因连接到转座子PXL-BAC II上形成重组载体PXL-BAC II-ZsGFP;再将加入了FRT位点的Neomycin Resistant基因连接到PXL-BAC II-ZsGFP,得重组通用载体PXL-BAC II-ZsGFP-Neo。该载体具有SEQ ID No:1所示的核苷酸序列。本发明的转座载体能满足细胞筛选、鉴定及高效转基因的要求。

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