一种猪丁型冠状病毒感染性cDNA克隆及构建方法和应用

    公开(公告)号:CN118581115B

    公开(公告)日:2025-02-18

    申请号:CN202410830921.4

    申请日:2024-06-25

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明提供了一种猪丁型冠状病毒感染性cDNA克隆及构建方法和应用,属于生物技术领域。本发明提供了一种猪丁型冠状病毒感染性cDNA克隆的构建方法,将猪丁型冠状病毒的基因组划分为若干个片段,基于酵母同源重组的一步法完成克隆构建,具有高效、快速、稳定等特点。本发明所述感染性cDNA克隆具有良好的稳定性,可直接利用CRISPR/Cas9基因编辑在基因水平上改造猪丁型冠状病毒基因组。本发明提供的感染性cDNA克隆可直接通过转染哺乳动物细胞拯救重组病毒,简化了病毒拯救操作流程。本发明还提供了可表达HiBiT标签蛋白的猪丁型冠状病毒感染性克隆的构建方法,为深入研究猪丁型冠状病毒感染机制提供了良好的技术手段。

    一种环形RNA高效表达载体及其应用

    公开(公告)号:CN116694666A

    公开(公告)日:2023-09-05

    申请号:CN202310830730.3

    申请日:2023-07-07

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种环形RNA高效表达载体,其具有如SEQ ID NO.1所述的核苷酸序列,包括长度为92bp的上游骨架序列、长度为75bp的下游骨架序列和位于二者间用于插入待环化基因的酶切位点EcoRI,表达框架全长仅为173bp,本发明构建的环形RNA表达载体能够使外源插入序列高效地表达环形RNA,为环形RNA的获得提供了一种高效表达工具,在保证circRNA高效环化的前提下,对其成环所需的上下游侧翼序列的长度进行了高度优化,进一步降低侧翼序列带来的剪接副产物复杂度。

    一种猪丁型冠状病毒感染性cDNA克隆及构建方法和应用

    公开(公告)号:CN118581115A

    公开(公告)日:2024-09-03

    申请号:CN202410830921.4

    申请日:2024-06-25

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明提供了一种猪丁型冠状病毒感染性cDNA克隆及构建方法和应用,属于生物技术领域。本发明提供了一种猪丁型冠状病毒感染性cDNA克隆的构建方法,将猪丁型冠状病毒的基因组划分为若干个片段,基于酵母同源重组的一步法完成克隆构建,具有高效、快速、稳定等特点。本发明所述感染性cDNA克隆具有良好的稳定性,可直接利用CRISPR/Cas9基因编辑在基因水平上改造猪丁型冠状病毒基因组。本发明提供的感染性cDNA克隆可直接通过转染哺乳动物细胞拯救重组病毒,简化了病毒拯救操作流程。本发明还提供了可表达HiBiT标签蛋白的猪丁型冠状病毒感染性克隆的构建方法,为深入研究猪丁型冠状病毒感染机制提供了良好的技术手段。

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