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公开(公告)号：CN117467682A
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202311398501.5
申请日：2023-10-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于N端编码序列增强L‑色氨酸合成的方法，属于基因工程技术领域。本发明在L‑色氨酸合成关键限速酶邻氨基苯甲酸合酶TrpE的N端编码序列前随机添加10个氨基酸的核苷酸序列，并与绿色荧光蛋白进行融合，构建TrpE‑NCS随机突变文库，最终筛选得到表达强度最高的N端编码序列序列比对照菌株约高出6.2倍。最后，将筛选得到的最优N端编码序列插入到基因trpE的N端，明显增强了ANTA合酶的表达，构建得到的工程菌株TRP08的L‑色氨酸产量在5L发酵罐中可达16.28g/L，约比对照菌株提高18.06％。综上，N端编码序列可作为合成生物学元件用于代谢途径的基因表达调控。
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公开(公告)号：CN114990045B
公开(公告)日：2023-08-22
申请号：CN202210768627.6
申请日：2022-06-30
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12N15/31 , C12N9/88 , C12N9/12 , C07K14/245 , C12P13/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供了一种重组大肠杆菌及其构建方法与合成1,5‑戊二胺的方法，属于基因工程技术领域，该重组大肠杆菌含有催化L‑赖氨酸生成1,5‑戊二胺的赖氨酸脱羧酶最优突变体CadAP530L/M569V、促进底物/产物进/出细胞的赖氨酸/尸胺反向转运蛋白CadB以及提供辅因子PLP自供应吡哆醛激酶I和II，将该重组大肠杆菌作为催化剂，得到的高产量的1,5‑戊二胺，摩尔转化率高达98.67％。本发明提供的合成1,5‑戊二胺的方法，该方法以重组大肠杆菌作为催化剂，不需要额外添加辅因子PLP，不使用缓冲液(无需调节pH)，无需使用盐酸进行中和，合成转化1,5‑戊二胺的时间短，生产成本低，为1,5‑戊二胺的工业化生产提供了一种高效且经济的方法。
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公开(公告)号：CN116478896A
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202310387848.3
申请日：2023-04-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种多酶级联转化富马酸生产D‑泛酸的方法，属于生物工程技术领域。本发明通过双质粒表达、表达质粒的启动子和翻译起始区改进和基因复制策略实现各酶的平衡表达，减少了中间产物的积累。更进一步地，在将中间产物转化为D‑泛酸的过程中利用ATP再生系统增强细胞内ATP供应，实现了ATP的免添加，降低反应成本，提高整体转化效率。并从反应的催化剂浓度、pH、温度和补料方式对催化体系进行优化，可使得D‑泛酸产量达到128.6g/L，转化率达到97.3％。从而大大降低了的底物成本和环境污染等问题，为D‑泛酸的工业化生产和绿色生产提供了新思路。
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公开(公告)号：CN112725296B
公开(公告)日：2023-06-13
申请号：CN202110122382.5
申请日：2021-01-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种黄体酮‑17α‑羟化酶及其应用，属于生物技术领域。本发明公开了一种新型的黄体酮‑17α‑羟化酶(MA_CYP450 17a2)，所述黄体酮‑17α‑羟化酶具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。本发明还公开了包含该酶或其编码基因的表达载体、宿主细胞及其在合成17α‑羟基黄体酮中的应用。本发明首次在毕赤酵母细胞体系内异源表达了黄体酮‑17α‑羟化酶，且具有以黄体酮为底物生产17α‑羟基黄体酮的能力，在宿主细胞未经优化的条件下7d反应后生成16.5mg/L的17α‑羟基黄体酮，这为工业化生产17α‑羟基黄体酮奠定了坚实的基础。
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公开(公告)号：CN114634885B
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202210088190.1
申请日：2022-01-25
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/20 , C12N15/01 , C12N13/00 , C12P13/00 , A61K35/747 , A61P25/20 , A23L33/135 , C12R1/25
Abstract: 本发明涉及一株高产γ‑氨基丁酸的植物乳杆菌，命名为植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)HG‑06，于2022年01月21日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉武汉大学，保藏编号为CCTCCNO：M2022109。本发明得到的植物乳杆菌γ‑氨基丁酸产量更高，5L发酵罐转化实验的最终产量为204.37g/L，底物摩尔转化率为97.22％，比出发菌株产量提高了56.83％，为产业化的提高提供了坚实的理论基础和数据参考。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115806957A
公开(公告)日：2023-03-17
申请号：CN202211555205.7
申请日：2022-12-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种多聚磷酸盐激酶突变体及其在谷氨酰胺合成中的应用，属于生物技术领域。本发明筛选获得了酶活显著提高的多聚磷酸盐激酶突变体，该突变酶的催化活性相较于原始酶提高了182.2％，能够实现ATP的高效率再生并降低生物催化成本。将本发明构建的聚磷酸盐激酶突变体用于生产谷氨酰胺，显著提高了ATP再生的可持续性，可使反应8h谷氨酰胺产量达94.4mM，转化率为94.4％，较偶联原始酶生产谷氨酰胺的产量提高了41.5％。
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公开(公告)号：CN115109738A
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202210675657.2
申请日：2022-06-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种生产L‑高丝氨酸的重组大肠杆菌及其应用，通过代谢工程的方法，在基因组层面对大肠杆菌中L‑高丝氨酸合成相关基因进行改造，通过弱化降解途径L‑苏氨酸合成途径的通量、强化L‑高丝氨酸合成途径的代谢流、增强前体物草酰乙酸和L‑天冬氨酸的供应、促进L‑高丝氨酸的胞外转运，以及促进辅因子协同利用，得到一株遗传背景清晰、不携带质粒、无需诱导且能稳定高效生产L‑高丝氨酸的基因工程菌，具有大规模生产的应用潜力。
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公开(公告)号：CN113061562B
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202110317317.8
申请日：2021-03-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用钝齿棒杆菌发酵生产1,4‑丁二胺的方法，属于基因工程技术领域。通过大肠杆菌和钝齿棒杆菌之间的穿梭质粒pXMJ19，将精氨酸脱羧酶编码基因经突变后与胍丁胺酶编码基因串联成功并在精氨酸高产菌株中过表达。摇瓶发酵结果表明，原始菌不具有生产有活性的精氨酸脱羧酶和胍丁胺酶的能力，而重组工程菌可以完成L‑精氨酸到1,4‑丁二胺的转化。同时基于此基因工程菌株具有高产L‑精氨酸的特性，成功采用一步发酵法以葡萄糖为底物生产1,4‑丁二胺。本发明方法生产1,4‑丁二胺，具有效率高、副产物L‑精氨酸、胍基丁胺和其他杂酸余量低的优点，后期对于产物1,4‑丁二胺的分离纯化更加容易。
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公开(公告)号：CN114717172B
公开(公告)日：2022-09-23
申请号：CN202210277913.2
申请日：2022-03-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种合成L‑缬氨酸的大肠杆菌及其构建方法与应用，涉及生物技术领域。本发明所述大肠杆菌命名为大肠杆菌W3110，于2022年03月18日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路珞珈山，保藏编号为CCTCC M 2022293。所述重组大肠杆菌以大肠杆菌为出发菌株，过表达转录调控因子，得到所述重组大肠杆菌。本发明所述的合成L‑缬氨酸的重组大肠杆菌在5L发酵罐微溶氧条件下发酵测试菌株，L‑缬氨酸产量达到92g/L，菌体OD为106。
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公开(公告)号：CN113073074B
公开(公告)日：2022-09-06
申请号：CN202110388765.7
申请日：2021-04-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效合成核黄素的基因工程菌及其应用，属于生物发酵技术领域，本发明通过敲除了编码purR的基因，敲低了编码glnR和tnrA的基因，并且采用过表达了来源于玻璃颤菌的血红蛋白，解除发酵过程中的溶氧限制，降低发酵过程中的能源消耗，提高核黄素产量；采用本发明构建的工程菌株RF1‑aPaGaTgV的核黄素产量在摇瓶阶段提高了50.78％，达到2.51g/L。在5‑L发酵水平，采用本发明构建的RF1‑aPaGaTgV的核黄素的最高产量提高了45.51％，达到10.71g/L。
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