公开(公告)号：CN117645967A

公开(公告)日：2024-03-05

申请号：CN202311607445.1

申请日：2023-11-28

Applicant: 江南大学

Inventor： 张显 ,  饶志明 ,  任可心 ,  张恒维 ,  王强 ,  徐美娟

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/31 ,  C12N15/55 ,  C12N15/75 ,  C12P13/14 ,  C12P21/00 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种适用于高密度发酵产酶的枯草芽孢杆菌底盘细胞，属于基因工程和酶工程领域。本发明枯草芽孢杆菌168的基础上，通过敲除基因lytC、sigD、mraZ、sigE获得4株高鲁棒性且抵抗发酵后期自溶的底盘细胞BS1～BS4，以及一株组合敲除菌BS5作为底盘细胞。并构建表达载体pMA5‑glsA在构建的底盘细胞中表达L‑谷氨酰胺酶，其中BS5的5‑L发酵罐酶活为B.subtilis 168的1.98倍，且在细胞生物量增加的基础上单位细胞酶活也有增加。本发明中的底盘菌株比工业模式菌株更适用于工业生产，具有非常巨大的应用前景和产业价值。

公开(公告)号：CN117568201A

公开(公告)日：2024-02-20

申请号：CN202311219150.7

申请日：2023-09-20

Applicant: 江南大学 ,  河南菡泽堂生物科技有限公司

Inventor： 徐美娟 ,  张杰 ,  张颖 ,  王守钢 ,  王宏伟 ,  张福鑫 ,  董宁

IPC: C12N1/20 ,  A23L33/135 ,  A61K35/747 ,  A61P1/00 ,  A61P25/32 ,  C12R1/225

Abstract: 本发明公开了一株具有高耐受性的鼠李糖乳杆菌YFA‑012及其应用，属于生物技术领域。本发明的鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)YFA‑012，保藏编号为CCTCC M 20231457，保藏日期为2023年8月14日，保藏单位为中国典型培养物保藏中心。该菌株来源于健康人体的粪便，属于安全的可用于食品的菌种，经过紫外诱变后对人体胃部环境有较高耐受性，具有优良的耐酸、耐胆盐、耐乙醇等特性，且消耗乙醇的能力较好，该菌株属于国标允许可食用的菌种，可添加在各种健康食品及保健食品中，具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN117467682A

公开(公告)日：2024-01-30

申请号：CN202311398501.5

申请日：2023-10-25

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  唐蜜 ,  潘学玮 ,  杨田金 ,  孙启盛 ,  徐美娟 ,  杨套伟 ,  张显

IPC: C12N15/60 ,  C12N15/62 ,  C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P13/22 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种基于N端编码序列增强L‑色氨酸合成的方法，属于基因工程技术领域。本发明在L‑色氨酸合成关键限速酶邻氨基苯甲酸合酶TrpE的N端编码序列前随机添加10个氨基酸的核苷酸序列，并与绿色荧光蛋白进行融合，构建TrpE‑NCS随机突变文库，最终筛选得到表达强度最高的N端编码序列序列比对照菌株约高出6.2倍。最后，将筛选得到的最优N端编码序列插入到基因trpE的N端，明显增强了ANTA合酶的表达，构建得到的工程菌株TRP08的L‑色氨酸产量在5L发酵罐中可达16.28g/L，约比对照菌株提高18.06％。综上，N端编码序列可作为合成生物学元件用于代谢途径的基因表达调控。

公开(公告)号：CN114990045B

公开(公告)日：2023-08-22

申请号：CN202210768627.6

申请日：2022-06-30

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  乔郅钠 ,  刘祖怡 ,  徐美娟 ,  杨套伟 ,  张显

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/54 ,  C12N15/60 ,  C12N15/31 ,  C12N9/88 ,  C12N9/12 ,  C07K14/245 ,  C12P13/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供了一种重组大肠杆菌及其构建方法与合成1,5‑戊二胺的方法，属于基因工程技术领域，该重组大肠杆菌含有催化L‑赖氨酸生成1,5‑戊二胺的赖氨酸脱羧酶最优突变体CadAP530L/M569V、促进底物/产物进/出细胞的赖氨酸/尸胺反向转运蛋白CadB以及提供辅因子PLP自供应吡哆醛激酶I和II，将该重组大肠杆菌作为催化剂，得到的高产量的1,5‑戊二胺，摩尔转化率高达98.67％。本发明提供的合成1,5‑戊二胺的方法，该方法以重组大肠杆菌作为催化剂，不需要额外添加辅因子PLP，不使用缓冲液(无需调节pH)，无需使用盐酸进行中和，合成转化1,5‑戊二胺的时间短，生产成本低，为1,5‑戊二胺的工业化生产提供了一种高效且经济的方法。

公开(公告)号：CN116478896A

公开(公告)日：2023-07-25

申请号：CN202310387848.3

申请日：2023-04-12

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  许媛怡 ,  徐美娟 ,  杨套伟 ,  张显

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/52 ,  C12N15/54 ,  C12N15/60 ,  C12N15/70 ,  C12P13/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种多酶级联转化富马酸生产D‑泛酸的方法，属于生物工程技术领域。本发明通过双质粒表达、表达质粒的启动子和翻译起始区改进和基因复制策略实现各酶的平衡表达，减少了中间产物的积累。更进一步地，在将中间产物转化为D‑泛酸的过程中利用ATP再生系统增强细胞内ATP供应，实现了ATP的免添加，降低反应成本，提高整体转化效率。并从反应的催化剂浓度、pH、温度和补料方式对催化体系进行优化，可使得D‑泛酸产量达到128.6g/L，转化率达到97.3％。从而大大降低了的底物成本和环境污染等问题，为D‑泛酸的工业化生产和绿色生产提供了新思路。

公开(公告)号：CN112725296B

公开(公告)日：2023-06-13

申请号：CN202110122382.5

申请日：2021-01-28

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  刘超 ,  陈可心 ,  王烨彤 ,  邵明龙 ,  杨套伟 ,  徐美娟 ,  张显

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N1/19 ,  C12P33/06 ,  C12R1/84 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开了一种黄体酮‑17α‑羟化酶及其应用，属于生物技术领域。本发明公开了一种新型的黄体酮‑17α‑羟化酶(MA_CYP450 17a2)，所述黄体酮‑17α‑羟化酶具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。本发明还公开了包含该酶或其编码基因的表达载体、宿主细胞及其在合成17α‑羟基黄体酮中的应用。本发明首次在毕赤酵母细胞体系内异源表达了黄体酮‑17α‑羟化酶，且具有以黄体酮为底物生产17α‑羟基黄体酮的能力，在宿主细胞未经优化的条件下7d反应后生成16.5mg/L的17α‑羟基黄体酮，这为工业化生产17α‑羟基黄体酮奠定了坚实的基础。

公开(公告)号：CN114634885B

公开(公告)日：2023-06-06

申请号：CN202210088190.1

申请日：2022-01-25

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  韩瑾 ,  徐美娟 ,  杨套伟 ,  张显

IPC: C12N1/20 ,  C12N15/01 ,  C12N13/00 ,  C12P13/00 ,  A61K35/747 ,  A61P25/20 ,  A23L33/135 ,  C12R1/25

Abstract: 本发明涉及一株高产γ‑氨基丁酸的植物乳杆菌，命名为植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)HG‑06，于2022年01月21日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉武汉大学，保藏编号为CCTCCNO：M2022109。本发明得到的植物乳杆菌γ‑氨基丁酸产量更高，5L发酵罐转化实验的最终产量为204.37g/L，底物摩尔转化率为97.22％，比出发菌株产量提高了56.83％，为产业化的提高提供了坚实的理论基础和数据参考。

公开(公告)号：CN115806957A

公开(公告)日：2023-03-17

申请号：CN202211555205.7

申请日：2022-12-06

Applicant: 江南大学

Inventor： 徐美娟 ,  饶志明 ,  高惠 ,  杨套伟 ,  张显

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/52 ,  C12P13/14 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种多聚磷酸盐激酶突变体及其在谷氨酰胺合成中的应用，属于生物技术领域。本发明筛选获得了酶活显著提高的多聚磷酸盐激酶突变体，该突变酶的催化活性相较于原始酶提高了182.2％，能够实现ATP的高效率再生并降低生物催化成本。将本发明构建的聚磷酸盐激酶突变体用于生产谷氨酰胺，显著提高了ATP再生的可持续性，可使反应8h谷氨酰胺产量达94.4mM，转化率为94.4％，较偶联原始酶生产谷氨酰胺的产量提高了41.5％。

公开(公告)号：CN115618552A

公开(公告)日：2023-01-17

申请号：CN202210686585.1

申请日：2022-06-17

Applicant: 江南大学

Inventor： 王龙 ,  胡伟 ,  徐美娟 ,  刘文化 ,  李吴刚 ,  姜林辰

IPC: G06F30/20 ,  G06F17/10 ,  G06F119/14

Abstract: 本发明公开了一种非饱和土边坡地震稳定性水平片分法分析模型构建方法。本发明基于拟动力假定，提出一种改进水平片分法来评估非饱和土边坡的地震响应特性，采用该方法计算非饱和土重力所做外部功率，毛细粘聚力和预应力锚索锚固力的能量耗散，构建能量平衡方程，并根据容重增加原理得到土边坡安全系数半解析数值表达式，基于枚举法搜索边坡最小安全系数和相应的临界滑动面。本发明构建的分析模型结合了极限分析解析法和极限分析有限元法的优点，有效地将非饱和土强度理论和极限分析方法结合起来，可对边坡吸力效应的作用机制进行合理的解释，对指导复杂条件下边坡设计、施工和加固具有重要的学术价值和现实意义。

公开(公告)号：CN115109738A

公开(公告)日：2022-09-27

申请号：CN202210675657.2

申请日：2022-06-15

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  蔡萌萌 ,  徐美娟 ,  杨套伟 ,  张显

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P13/06 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种生产L‑高丝氨酸的重组大肠杆菌及其应用，通过代谢工程的方法，在基因组层面对大肠杆菌中L‑高丝氨酸合成相关基因进行改造，通过弱化降解途径L‑苏氨酸合成途径的通量、强化L‑高丝氨酸合成途径的代谢流、增强前体物草酰乙酸和L‑天冬氨酸的供应、促进L‑高丝氨酸的胞外转运，以及促进辅因子协同利用，得到一株遗传背景清晰、不携带质粒、无需诱导且能稳定高效生产L‑高丝氨酸的基因工程菌，具有大规模生产的应用潜力。