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公开(公告)号:CN114774373A
公开(公告)日:2022-07-22
申请号:CN202210450412.X
申请日:2022-04-27
申请人: 北京市农林科学院 , 北京中海生物科技有限公司
摘要: 本发明公开了一种信鸽新城疫病毒基因工程改造弱毒株及其制备方法和应用。具体为应用反向遗传操作技术,对信鸽新城疫病毒株(PNDV‑YQ株)的F蛋白3个裂解位点的氨基酸进行了定点突变,通过分段克隆的方式构建并获得了低毒力基因的全长cDNA质粒pOK‑YQ,再分别将PNDV‑YQ株的NP、P和L的ORF基因克隆至真核表达载体pCIneo,构建并获得了辅助质粒pCI‑NP,pCI‑P,pCI‑L。全长质粒与辅助质粒共转染BSR‑T7细胞后,拯救出重组致弱病毒,即鸽新城疫病毒(PNDV‑aYQ株)。该株病毒为低致病性或无致病性毒株,且具有良好的增殖特性和遗传特性稳定。以该病毒株制备的灭活疫苗,与现有鸡新城疫疫苗相比,该疫苗具有副反应低、免疫产生期早和保护率高的优点。
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公开(公告)号:CN113136441A
公开(公告)日:2021-07-20
申请号:CN202110390399.9
申请日:2021-04-12
申请人: 中海生物技术(枣庄)有限公司 , 黑龙江省绿色食品科学研究院 , 北京中海生物科技有限公司
摘要: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种阪崎肠杆菌的荧光定量PCR检测试剂盒、检测方法及应用。试剂盒中含有PCR扩增试剂、对照品和参考品,PCR扩增试剂中含有用于检测阪崎肠杆菌的引物和探针,引物的序列如SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:2所示,探针序列如SEQ ID NO:3所示。本发明试剂盒可以迅速定量检测阪崎肠杆菌基因,具有快速、高效、特异性强的优点。
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公开(公告)号:CN112763717A
公开(公告)日:2021-05-07
申请号:CN202011576298.2
申请日:2020-12-28
申请人: 北京中海生物科技有限公司 , 中海生物技术(枣庄)有限公司 , 河北省动物疫病预防控制中心
IPC分类号: G01N33/58 , G01N33/558 , G01N33/68 , G01N33/569
摘要: 本发明涉及检测试剂领域,具体涉及一种金标探针复溶液,其制备方法及应用。本发明的金标探针复溶液中含有牛血清白蛋白、蔗糖、海藻糖和聚乙烯比咯烷酮,余量为pH值为8~9的Tris‑HCl。本发明的金标探针复溶液可以显著提高金标探针的稳定性,增强其抵抗恶劣环境的能力,从而保证金标探针的活性,保证其所制备成的胶体金检测产品的质量。
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公开(公告)号:CN112029736A
公开(公告)日:2020-12-04
申请号:CN202010951150.6
申请日:2020-09-11
申请人: 北京中海生物科技有限公司 , 畜科生物工程有限公司
摘要: 本发明涉及一种预防非洲猪瘟重组伪狂犬病活疫苗及其制备,本发明构建的非洲猪瘟病毒CDV2/P72/BL602基因和能敲除野生型P72基因的sacas9SgRNA序列重组伪狂犬病病毒TIE1872V2Sag72株在BHK细胞株获得可以表达重组CDV2/P72/BL602蛋白抗原,其表达量稳定,同时经过体外细胞模拟实验表明该方法可以干扰病毒复制。以该重组株伪狂病病毒株作为生产毒株,经过悬浮微载体培养获得的表达表达重组CDV2/P72/BL602蛋白抗原制备成活疫苗,可以预防最近流行的非洲猪瘟病毒,还可以做成喷雾饮水形式疫苗减少注射应激反应。
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公开(公告)号:CN104306963B
公开(公告)日:2016-02-03
申请号:CN201410602361.3
申请日:2014-10-31
申请人: 北京中海生物科技有限公司
摘要: 本发明涉及合成培养基及冻干保护剂在猪丹毒活疫苗生产中的应用。本发明所提供的合成培养基根据猪丹毒杆菌的生长特点和生长需求设计而成,配方原材料来源可控,不受牛肉、牛肝和猪胃等材料的影响,批次稳定、制作简单、使用方便,适合进行细菌高细胞密度培养,培养菌数高;冻干过程采用针对猪丹毒杆菌特性研制的冻干保护剂及配套冻干曲线,在冻干过程中有效保护细菌的活性,提高冻干菌存率,实现疫苗2~8℃长期保存,保存期可达24个月。
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公开(公告)号:CN101407788B
公开(公告)日:2012-01-11
申请号:CN200810227225.5
申请日:2008-11-26
申请人: 中国兽医药品监察所 , 北京中海生物科技有限公司
摘要: 本发明涉及一种促进狂犬病病毒增殖的方法。在狂犬病病毒培养的细胞维持液中单一添加精氨酸、亮氨酸、脯氨酸和半胱氨酸分别可提高狂犬病病毒滴度0.68 log LD50/0.03ml~0.24 log LD50/0.03ml。精氨酸、亮氨酸、脯氨酸和半胱氨酸的氨基酸组合也可提高狂犬病病毒滴度。经多克隆荧光抗体染色结果表明,与对照组比较,精氨酸和亮氨酸组病毒吸附由60min缩短为30min,病毒穿膜由90min缩短为60min;经核蛋白单克隆荧光抗体染色结果表明,病毒核蛋白合成由21h缩短为18h;经狂犬病病毒抗原检测试剂盒检测培养液,病毒阳性检出由54h提前到42h。该方法简便有效,在狂犬病疫苗生产中有其实用性。
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公开(公告)号:CN112521495B
公开(公告)日:2023-01-10
申请号:CN202011528215.2
申请日:2020-12-22
申请人: 北京中海生物科技有限公司
IPC分类号: C07K16/10 , C12P21/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543
摘要: 本发明涉及一种小反刍兽疫病毒PPR‑N蛋白单克隆抗体制备及其应用。通过对培养基成分和添加血清含量进行研究,并对悬浮培养的各个参数进行优化,实现了对本发明的PPR‑N蛋白单克隆抗体的规模化生产。该方法能大幅度减少培养成本、增加单位体积内细胞数、提高单克隆抗体效价。通过纯化后的纯化浓缩液,单克隆抗体浓度可提高8倍,并且能保持原有的敏感性和特异性不变,可用于小反刍兽疫病毒抗体的免疫学检测。使用本发明制备的小反刍兽疫PPR‑N改良竞争ELISA试剂盒,能更显著地区分阴、阳性对照,二者间的差值更大,相比采用传统竞争ELISA方法,具有更好的敏感性和特异性。通过对比可见在传统竞争ELISA法无法区分阴阳性界限,本发明改良竞争ELISA法可准确的区分阴阳性界限。
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公开(公告)号:CN112029736B
公开(公告)日:2022-04-26
申请号:CN202010951150.6
申请日:2020-09-11
申请人: 北京中海生物科技有限公司 , 畜科生物工程有限公司
摘要: 本发明涉及一种预防非洲猪瘟重组伪狂犬病活疫苗及其制备,本发明构建的非洲猪瘟病毒CD2V/P72/B602L基因和能敲除野生型P72基因的sacas9SgRNA序列重组伪狂犬病病毒TIE1872V2Sag72株在BHK细胞株获得可以表达重组CD2V/P72/B602L蛋白抗原,其表达量稳定,同时经过体外细胞模拟实验表明该方法可以干扰病毒复制。以该重组株伪狂病病毒株作为生产毒株,经过悬浮微载体培养获得的表达表达重组CD2V/P72/B602L蛋白抗原制备成活疫苗,可以预防最近流行的非洲猪瘟病毒,还可以做成喷雾饮水形式疫苗减少注射应激反应。
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公开(公告)号:CN114230677A
公开(公告)日:2022-03-25
申请号:CN202210164172.7
申请日:2022-02-23
申请人: 北京中海生物科技有限公司
发明人: 伏显华
IPC分类号: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/85 , C12N5/10 , A61K39/295 , A61K39/187 , A61K39/12 , A61P31/14 , A61P31/20
摘要: 本发明公开了含有猪瘟E2和圆环病毒的Cap的重组蛋白及其制备方法和应用,属于疫苗领域。本发明公开的疫苗活性成分为重组蛋白,所述重组蛋白由融合蛋白CSFVE2‑SpyCatcher和Cap‑SpyTag连接而成,所述融合蛋白CSFVE2‑SpyCatcher是氨基酸序列是SEQ ID No.2的蛋白质;所述融合蛋白Cap‑SpyTag为氨基酸序列是SEQ ID No.3的蛋白质。本发明还提供了在CHO细胞株中共表达猪瘟E2的构建方法,利用圆环VLPs展示E2,达到E2 VLPs化,可以提高E2抗原免疫原性,达到相互刺激免疫,提高猪瘟和圆环免疫保护效果。本发明改善了猪瘟E2蛋白质在哺乳细胞中表达产物免疫效果差和猪瘟E2蛋白质在原核表达系统的表达产物免疫猪后使猪产生抗体时间短以及原核内毒素残留引起免疫死亡的缺陷。
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公开(公告)号:CN102688484B
公开(公告)日:2016-03-30
申请号:CN201210194608.3
申请日:2012-06-13
申请人: 北京中海生物科技有限公司
摘要: 本发明涉及一种鸡坏死性肠炎(C型)灭活疫苗的生产方法。目前国内尚没有针对鸡坏死性肠炎的灭活疫苗,而针对其他动物的梭菌疾病灭活疫苗通常采用的是肉肝胃酶消化汤培养基,该培养基其主要成分牛肉和肝等,受动物品种、年龄、新鲜及消化程度的影响较大,造成培养基质量不稳定、批次间离散度大且制作过程繁琐,进而影响疫苗的质量,特别是疫苗的均一性。而本发明所提供的合成培养基,克服了以上的缺陷,是进行细菌高细胞密度培养的发展趋势,具有操作简便、质量稳定的优点,为高品质的鸡坏死性肠炎(C型)灭活疫苗生产提供了有力的保障。
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