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公开(公告)号：CN114774373B
公开(公告)日：2024-07-05
申请号：CN202210450412.X
申请日：2022-04-27
申请人： 北京市农林科学院 , 北京中海生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种信鸽新城疫病毒基因工程改造弱毒株及其制备方法和应用。具体为应用反向遗传操作技术，对信鸽新城疫病毒株(PNDV‑YQ株)的F蛋白3个裂解位点的氨基酸进行了定点突变，通过分段克隆的方式构建并获得了低毒力基因的全长cDNA质粒pOK‑YQ，再分别将PNDV‑YQ株的NP、P和L的ORF基因克隆至真核表达载体pCIneo，构建并获得了辅助质粒pCI‑NP，pCI‑P，pCI‑L。全长质粒与辅助质粒共转染BSR‑T7细胞后，拯救出重组致弱病毒，即鸽新城疫病毒(PNDV‑aYQ株)。该株病毒为低致病性或无致病性毒株，且具有良好的增殖特性和遗传特性稳定。以该病毒株制备的灭活疫苗，与现有鸡新城疫疫苗相比，该疫苗具有副反应低、免疫产生期早和保护率高的优点。
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公开(公告)号：CN114774373A
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN202210450412.X
申请日：2022-04-27
申请人： 北京市农林科学院 , 北京中海生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种信鸽新城疫病毒基因工程改造弱毒株及其制备方法和应用。具体为应用反向遗传操作技术，对信鸽新城疫病毒株(PNDV‑YQ株)的F蛋白3个裂解位点的氨基酸进行了定点突变，通过分段克隆的方式构建并获得了低毒力基因的全长cDNA质粒pOK‑YQ，再分别将PNDV‑YQ株的NP、P和L的ORF基因克隆至真核表达载体pCIneo，构建并获得了辅助质粒pCI‑NP，pCI‑P，pCI‑L。全长质粒与辅助质粒共转染BSR‑T7细胞后，拯救出重组致弱病毒，即鸽新城疫病毒(PNDV‑aYQ株)。该株病毒为低致病性或无致病性毒株，且具有良好的增殖特性和遗传特性稳定。以该病毒株制备的灭活疫苗，与现有鸡新城疫疫苗相比，该疫苗具有副反应低、免疫产生期早和保护率高的优点。
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公开(公告)号：CN110898218A
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201911395425.6
申请日：2019-12-30
申请人： 瑞普(保定)生物药业有限公司 , 北京市农林科学院畜牧兽医研究所
摘要： 本发明公开了一种鸭坦布苏病毒病灭活疫苗及其制备方法，本发明的鸭坦布苏病毒病灭活疫苗的制备方法，包括如下步骤：a提供鸭坦布苏病毒液；b纯化；c灭活；d乳化制备疫苗。本发明方法生产鸭坦布苏病毒病灭活疫苗，可有效降低杂蛋白含量，提高有效抗原含量，提升疫苗免疫效果，解决低日龄雏鸭发病问题。
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公开(公告)号：CN113249339B
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202110621093.X
申请日：2021-06-03
申请人： 北京市农林科学院 , 青岛易邦生物工程有限公司
IPC分类号： C12N7/00 , A61K39/145 , A61P31/16 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种H3亚型犬流感病毒株、灭活疫苗及其制备方法。所述疫苗是用保藏编号CGMCC NO.20649的H 3亚型犬流感病毒株作为抗原灭活后制备得到。本发明采用SPF鸡胚或MDCK细胞作为载体进行病毒增殖，收集病毒液，灭活，纯化，制备成疫苗。本发明制备得到的H3亚型犬流感病毒灭活疫苗的病毒含量高、稳定性好、安全性高，是一种较为理想的H3亚型犬流感病毒灭活疫苗，具有重要的公共卫生意义。
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公开(公告)号：CN108721615B
公开(公告)日：2019-05-17
申请号：CN201810465182.8
申请日：2018-05-16
申请人： 北京市农林科学院 , 甘肃健顺生物科技有限公司
发明人： 刘月焕 , 罗顺 , 林健 , 张业炘 , 杨志远 , 王嘉琪 , 王小蕾 , 杨云 , 段会娟 , 杨贵君 , 刘立新 , 耿风廷 , 程慧敏 , 陈佩兰 , 赵际成 , 赵志欣 , 潘洁 , 钱建宁 , 王盟
摘要： 本发明公开了一种制备鸭坦布苏病毒病灭活疫苗的方法及其疫苗，病毒接种所用细胞系为EB66细胞系（一株鸭胚胎干细胞衍生细胞株），病毒培养采用生物反应器以无血清全悬浮方式培养；并经过1）毒种选育；2）建立毒种种子批；3）制备细胞毒液；4）灭活病毒；5）乳化等步骤完成疫苗的制备。本发明方法具有制备的细胞毒液病毒含量高、生产工艺稳定、智能化控制、可大规模无血清悬浮培养、易操作和成本低等特点，制备的鸭坦布苏病毒灭活疫苗具有安全、副反应低、免疫效力高、批间差异小、检验次数少和成本低等优点，为水禽产业预防鸭坦布苏病毒病发生和流行的理想疫苗。
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公开(公告)号：CN102749427A
公开(公告)日：2012-10-24
申请号：CN201210203611.7
申请日：2012-06-15
申请人： 北京市农林科学院畜牧兽医研究所 , 瑞普(保定)生物药业有限公司
IPC分类号： G01N33/15
摘要： 本发明提供了一种鸭出血性卵巢炎灭活疫苗的效力检验方法，该方法使用鸭出血性卵巢炎灭活疫苗免疫鸭，共免疫2次，首免后2周进行二免，二免后3～5周用鸭出血性卵巢炎病毒对免疫鸭进行攻毒；攻毒后采集鸭血清，将分离的血清接种SPF鸡胚或鸭胚，计算24-168h内死亡且鸭出血性卵巢炎病毒阳性的胚数，对照组鸭病毒分离阳性率为80%以上且免疫组鸭的病毒分离阴性率为70%以上判为疫苗效力检验合格。本发明提供的鸭出血性卵巢炎灭活疫苗的效力检验方法具有操作简便、结果准确的优势，可推广应用。
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公开(公告)号：CN107987135A
公开(公告)日：2018-05-04
申请号：CN201711319441.8
申请日：2017-12-12
申请人： 北京市农林科学院 , 浙江海隆生物科技有限公司
IPC分类号： C07K14/075 , C12N15/34 , C12N15/70 , A61K39/235 , A61P31/20
摘要： 本发明属于生物技术领域，公开了Ι群4型禽腺病毒具有免疫保护功能的亚单位蛋白，其为Ι群4型禽腺病毒短纤突蛋白球形区截短体蛋白，从氨基酸283位到氨基酸479位的抗原决定簇氨基酸序列，具有较好的抗原性和免疫原性。该Ι群4型禽腺病毒亚单位蛋白及药学上可以接受佐剂制成疫苗，该疫苗制备方法主要包括先将密码子优化后的Ι群4型禽腺病毒短纤突蛋白球形区截短体蛋白核苷酸序列克隆到载体中，再将重组载体转化、诱导表达、纯化后得到抗原蛋白，最后将抗原蛋白与佐剂乳化后得到疫苗。该疫苗安全、有效；且制备该亚单位疫苗的方法简单、成本低、易于放大。
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公开(公告)号：CN102749427B
公开(公告)日：2015-12-09
申请号：CN201210203611.7
申请日：2012-06-15
申请人： 北京市农林科学院畜牧兽医研究所 , 瑞普(保定)生物药业有限公司
IPC分类号： G01N33/15
摘要： 本发明提供了一种鸭出血性卵巢炎灭活疫苗的效力检验方法，该方法使用鸭出血性卵巢炎灭活疫苗免疫鸭，共免疫2次，首免后2周进行二免，二免后3～5周用鸭出血性卵巢炎病毒对免疫鸭进行攻毒；攻毒后采集鸭血清，将分离的血清接种SPF鸡胚或鸭胚，计算24-168h内死亡且鸭出血性卵巢炎病毒阳性的胚数，对照组鸭病毒分离阳性率为80%以上且免疫组鸭的病毒分离阴性率为70%以上判为疫苗效力检验合格。本发明提供的鸭出血性卵巢炎灭活疫苗的效力检验方法具有操作简便、结果准确的优势，可推广应用。
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公开(公告)号：CN102735808B
公开(公告)日：2015-07-08
申请号：CN201210202429.X
申请日：2012-06-15
申请人： 北京市农林科学院畜牧兽医研究所 , 瑞普(保定)生物药业有限公司
IPC分类号： G01N33/15
摘要： 本发明提供了一种鸭出血性卵巢炎灭活疫苗的效力检验方法，该方法使用鸭出血性卵巢炎灭活疫苗免疫鸭，共免疫2次，首免后2周进行二免，二免后3~5周用鸭出血性卵巢炎病毒对免疫鸭进行攻毒；攻毒后5～10日将试验鸭处死，进行剖检，观察生殖系统的大体病变，若雌鸭表现为雌鸭卵泡出血、变形和输卵管萎缩，或雄鸭表现为睾丸和输精管萎缩，则为发生了病变。免疫组鸭的生殖器官未发生病变的攻毒保护率为70%以上判为疫苗效力检验合格。
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公开(公告)号：CN102735807A
公开(公告)日：2012-10-17
申请号：CN201210202292.8
申请日：2012-06-15
申请人： 北京市农林科学院畜牧兽医研究所 , 瑞普(保定)生物药业有限公司
IPC分类号： G01N33/15 , G01N33/569
摘要： 本发明提供了鸭出血性卵巢炎灭活疫苗的血清学效力检验方法，该方法使用鸭出血性卵巢炎灭活疫苗免疫鸭，免疫2次，首免后2周进行二免，采集二免后3~5周的鸭血清进行ELISA抗体检测，非免疫组ELISA抗体阳性率为0%，免疫组ELISA抗体阳性率为不低于80%判为疫苗效力检验合格。本发明提供的鸭出血性卵巢炎灭活疫苗的血清学效力检验方法操作方便，结果准确、可广泛应用于鸭出血性卵巢炎灭活疫苗的效力评价。
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