一种尿激酶与人尿胰蛋白酶抑制剂的分离方法

    公开(公告)号:CN103074319B

    公开(公告)日:2014-06-11

    申请号:CN201310020363.7

    申请日:2013-01-18

    IPC分类号: C12N9/72 C07K14/81 C07K1/30

    摘要: 本发明公开了一种尿激酶与人尿胰蛋白酶抑制剂的分离方法。该方法包括如下步骤:将含有尿激酶和人尿胰蛋白酶抑制剂的溶液,调节pH;缓慢加入硫酸铵粉末,一边加硫酸铵粉末,一边搅拌直到溶液中出现明显蛋白沉淀;调节pH至9.0±0.6;静置后,离心或者加硅藻土过滤,收集富含尿激酶的沉淀,获得尿激酶;上清继续加入硫酸铵至,一边加硫酸铵粉末,一边搅拌使其溶解;静置后,离心或者加硅藻土过滤,收集富含人尿胰蛋白酶抑制剂沉淀2,获得人尿胰蛋白酶抑制剂。该方法简便可行,周期短,有效保护UK和UTI活性,减少UK降解,提高UK质量,不需要特殊设备,降低设备的投入成本。

    一种制备人尿激肽原酶粗制品的方法

    公开(公告)号:CN102660525B

    公开(公告)日:2013-07-17

    申请号:CN201210148345.2

    申请日:2012-05-15

    IPC分类号: C12N9/64

    摘要: 本发明公开了一种制备人尿激肽原酶粗制品的方法。所述的制备人尿激肽原酶粗制品的方法为:吸附剂吸附尿液中的尿蛋白一定时间后,收集吸附尿蛋白后的吸附剂,集中洗脱,将洗脱出的尿蛋白溶液通过金属螯合亲和层析柱,其中的人尿胰蛋白酶抑制剂不吸附,而人尿激肽原酶则结合到该金属螯合亲和层析柱上,从而实现二者的分离,收集洗脱峰,制备人尿激肽原酶粗制品。采用该技术方案可以实现尿液中的人尿激肽原酶和人尿胰蛋白酶抑制剂的高效分离,便于人尿激肽原酶和人尿胰蛋白酶抑制剂后续纯化处理,提高纯化收率;实现了两种蛋白粗制品的联产,生产成本较低。

    一种尿激酶与人尿胰蛋白酶抑制剂的分离方法

    公开(公告)号:CN103074319A

    公开(公告)日:2013-05-01

    申请号:CN201310020363.7

    申请日:2013-01-18

    IPC分类号: C12N9/72 C07K14/81 C07K1/30

    摘要: 本发明公开了一种尿激酶与人尿胰蛋白酶抑制剂的分离方法。该方法包括如下步骤:将含有尿激酶和人尿胰蛋白酶抑制剂的溶液,调节pH;缓慢加入硫酸铵粉末,一边加硫酸铵粉末,一边搅拌直到溶液中出现明显蛋白沉淀;调节pH至9.0±0.6;静置后,离心或者加硅藻土过滤,收集富含尿激酶的沉淀,获得尿激酶;上清继续加入硫酸铵至,一边加硫酸铵粉末,一边搅拌使其溶解;静置后,离心或者加硅藻土过滤,收集富含人尿胰蛋白酶抑制剂沉淀2,获得人尿胰蛋白酶抑制剂。该方法简便可行,周期短,有效保护UK和UTI活性,减少UK降解,提高UK质量,不需要特殊设备,降低设备的投入成本。

    一种伊曲康唑的手性拆分方法

    公开(公告)号:CN104788437A

    公开(公告)日:2015-07-22

    申请号:CN201510176598.4

    申请日:2015-04-14

    IPC分类号: C07D405/14

    CPC分类号: C07D405/14

    摘要: 本发明公布了一种伊曲康唑的手性拆分方法。本发明方法利用超临界流体手性色谱法,通过手性色谱柱,用二氧化碳和强极性机溶剂组成的流动相进行洗脱,经两次分离纯化,得到四种伊曲康唑光学异构体。该方法工艺操作简单,原料容易获得,制备过程中所用有机试剂可回收利用,几乎不产生污染,产品光学纯度高,适合作为新药研发对照品使用,对进一步开发伊曲康唑的医药用途具有十分重要的意义。

    一种制备hEGF粗制品的方法

    公开(公告)号:CN103694334A

    公开(公告)日:2014-04-02

    申请号:CN201310715778.6

    申请日:2013-12-23

    CPC分类号: C07K14/485

    摘要: 本发明公开了一种制备hEGF制品的方法。该方法为收集吸附尿蛋白后的吸附剂,将洗脱下来的尿蛋白溶液上已经平衡好的金属螯合层析柱,hEGF结合到该金属螯合层析柱上,收集hEGF组分洗脱峰,经过硫酸铵沉淀,制备hEGF粗制品。该方法是一种从男性尿液中制备hEGF粗制品的方法,该粗制品可用于hEGF的后续纯化,纯化出的hEGF不含使人体产生过敏反应的异源蛋白,该方法操作简便,便于工业化生产,为规模化制备人来源的hEGF提供了基础。