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公开(公告)号：CN113354698A
公开(公告)日：2021-09-07
申请号：CN202110630095.5
申请日：2021-06-07
申请人： 江苏海飞生物科技有限公司
摘要： 本发明涉及利用一种复合絮凝剂制备N‑乙酰氨糖高密度发酵清液的方法。属于生物工程领域，具体步骤：将N‑乙酰氨基葡萄糖发酵液进行灭活；加入无机絮凝剂，搅拌，得到含有无机絮凝剂的N‑乙酰氨基葡萄糖发酵液；加入吸附剂和助滤剂，搅拌，加入已配置的有机高分子絮凝剂，搅拌均匀，静止絮凝30‑60min，得到N‑乙酰氨基葡萄糖发酵液的絮凝液；经过板框压滤，得到N‑乙酰氨基葡萄糖发酵清液。本发明中絮凝除杂工艺效果明显板框过滤后清液得率高，菌渣含水量低，复合絮凝减少了絮凝剂的用量。本工艺操作简单，且无三废排放，是一种环保、简单高效的制备乙酰氨糖发酵清液的方法。
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公开(公告)号：CN113336806A
公开(公告)日：2021-09-03
申请号：CN202110630079.6
申请日：2021-06-07
申请人： 江苏海飞生物科技有限公司
IPC分类号： C07H5/06 , C07H1/00 , C07C51/41 , C07C59/255 , C07C59/265
摘要： 本发明涉及一种氨基葡萄糖有机酸盐的制备方法，属于生物工程技术领域，包括氨糖的吸附分离、氨糖有机酸的浓缩、结晶、产品制备等步骤。首先将氨糖盐酸盐与阳离子树脂进行离子交换，用阳离子树脂吸附分离氨基葡萄糖盐酸盐中的氨糖，再用10‑30％浓度有机酸盐解析阳离子树脂上氨糖，形成粗品的氨基葡萄糖有机酸盐解析液，对得到的粗品的氨基葡萄糖有机酸盐解析液进行脱酸浓缩、结晶，得到高浓度的氨基葡萄糖有机酸盐，再进一步冷冻干燥。该工艺可制得较高纯度的氨糖有机酸盐产品，工艺简单，条件温和，无废酸排放，是一种环保、高效的氨糖有机酸盐的生产方法。
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公开(公告)号：CN113265439A
公开(公告)日：2021-08-17
申请号：CN202110636442.5
申请日：2021-06-08
申请人： 江苏海飞生物科技有限公司
IPC分类号： C12P23/00 , C12N1/38 , C12N1/20 , C12N1/16 , C12N1/02 , C12N1/06 , A23L33/10 , A23P10/30 , A23L29/30 , A23L29/00 , C12R1/19 , C12R1/645
摘要： 本发明公开了一种制备反式虾青素的方法。属于生物制剂领域；具体步骤：以葡萄糖、氨水及硫酸铵作为原料，法夫酵母或大肠杆菌微生物作为生产菌种进行发酵，代谢合成虾青素，在合成过程中添加诱导剂进行细胞催化促使菌体合成反式虾青素；对发酵液进行浓缩并收集菌体，得含有菌体的浓缩液；再进行细胞破壁，得到破壁溶液；向破壁溶液中添加预胶化淀粉、倍他环糊精、普鲁兰多糖、明胶或羟丙甲纤维素，用乳化机进行均质乳化，进行包埋处理；对包埋过的混有虾青素的菌泥进行干燥成粉，获得反式虾青素。本发明具有生产工艺简单，生物利用率高，生产规模容易放大，生产成本低的优点，同时，本发明所获得的的虾青素为全反式结构，生物活性高，应用范围广。
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公开(公告)号：CN111647027A
公开(公告)日：2020-09-11
申请号：CN202010527878.6
申请日：2020-06-11
申请人： 江苏海飞生物科技有限公司 , 拜启私人有限公司
摘要： 本发明N-乙酰氨基葡萄糖的分离和纯化方法，属于生物工程技术领域。本发明通过微生物发酵或者水解几丁质得到的含有N-乙酰氨基葡萄糖的原料液，对原料液进行絮凝预处理，通过连续离心或压滤后去除微生物、蛋白质和多糖等悬浮固形物，获得澄清液。再经过双级离子交换层析去除带电荷的有机分子和无机盐等杂质。通过膜浓缩高效去除水分，提高目标产物的浓度。最后通过喷雾干燥或者进一步蒸发浓缩和结晶，最后干燥获得纯度超过99％的N-乙酰氨基葡萄糖晶体。
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公开(公告)号：CN114990174B
公开(公告)日：2023-10-20
申请号：CN202210557773.4
申请日：2022-05-19
申请人： 江苏海飞生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种从头合成壳寡糖的多酶催化体系及其全细胞生产方法，属于合成生物学领域和生物医药制备技术领域。本发明通过AmgK、GlmU、NodC、NodB的组合，构建了以乙酰氨基葡萄糖为底物单元从头合成壳寡糖的一种多酶催化体外途径；利用该酶组合与辅因子再生系统的偶联，底物磷酸化速率和聚合速率得到调控，壳寡糖聚合度可控(DP
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公开(公告)号：CN116004599A
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202310060606.3
申请日：2023-01-17
申请人： 江苏海飞生物科技有限公司
IPC分类号： C12N9/90 , C12N9/12 , C12N9/10 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12P19/26 , C12R1/19 , C12R1/125 , C12R1/865
摘要： 本发明公开了一种不可逆合成燕窝酸的多酶催化体系及其全细胞转化方法，属于合成生物学领域、食品加工和生物医药制备技术领域。本发明通过三种定向进化后优选的酶组合，构建了以乙酰基氨糖和丙酮酸为底物单元不可逆合成燕窝酸的一种多酶催化途径；利用该酶组合与辅因子再生系统的偶联，体外酶催化得到20.2g/L燕窝酸，底物转化率65％。在此基础上采用食品安全菌种为底盘菌，将所述酶催化途径的基因整合到表达载体或基因组中进行过表达，同时构建dCas9/CRISPRi系统，定向调节底物竞争途径对燕窝酸合成前体的消耗，所得到的全细胞在5L发酵罐中燕窝酸最高产量为～160g/L，底物转化率超过60％，展现了巨大的工业生产价值。
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公开(公告)号：CN113248553A
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN202110630101.7
申请日：2021-06-07
申请人： 江苏海飞生物科技有限公司
摘要： 本发明涉及一种D‑氨基葡萄糖盐酸盐的制备方法。属于生物工程技术领域，具体步骤：首先，得到N‑乙酰氨基葡萄糖澄清溶液；将其进入到离子交换树脂柱中进行离交，得到纯净的N‑乙酰氨基葡萄糖溶液；再对其进行脱乙酰反应，得到脱乙酰反应的清液；再加入盐酸，制得D‑氨基葡萄糖盐酸盐溶液；对D‑氨基葡萄糖盐酸盐溶液进行蒸发浓缩、降温及过滤；得到D‑氨基葡萄糖盐酸盐粗晶体；将得到的D‑氨基葡萄糖盐酸盐粗晶进行溶解、过滤、重结晶，收集晶体、烘干；最终得纯品的D‑氨基葡萄糖盐酸盐。该工艺制得的盐酸氨糖纯度较高，工艺简单，生产过程酶反应条件温和，且树脂用量少，废盐酸的排放少，是一种环保、高效的氨基葡萄糖生产工艺。
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公开(公告)号：CN111518857A
公开(公告)日：2020-08-11
申请号：CN202010527880.3
申请日：2020-06-11
申请人： 江苏海飞生物科技有限公司 , 拜启私人有限公司
摘要： 本发明公开了酶法生产氨基葡萄糖盐及其提纯方法，属于生物工程技术领域。本发明以N‑乙酰氨基葡萄糖为原料，经过脱乙酰酶水解得到氨基葡萄糖和乙酸，再通过酸溶液洗脱阳离子交换柱分离得到氨基葡萄糖盐，同时通过阴离子交换回收得到副产品乙酸钠。所得氨基葡萄糖盐经过浓缩、结晶、脱色、干燥得到高纯度的氨基葡萄糖盐晶体。本发明结合了酶的循环利用工艺、残余底物循环回收工艺和乙酸回收工艺，在提升N‑乙酰氨基葡萄糖的转化率和氨基葡萄糖盐产品总得率的同时，使酶得到循环利用，使残余底物循环得到充分转化，乙酸得到资源化利用，并通过常温下的操作条件，使树脂损耗率低，盐酸废液产生量极少，实现了节能降耗的经济效益和环保安全的效果。
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公开(公告)号：CN113373134B
公开(公告)日：2024-02-20
申请号：CN202110873349.6
申请日：2021-07-30
申请人： 江苏海飞生物科技有限公司
IPC分类号： C12N9/80
摘要： 本发明公开了一种N‑乙酰氨基葡萄糖脱乙酰酶的提取方法，属于生物工程技术领域。本发明以含有N‑乙酰氨基葡萄糖脱乙酰酶的发酵液为原料，经过絮凝离心或陶瓷微滤膜收集微生物浓悬液，同时去除发酵过程中残留营养物成分；再通过高压均质使细胞壁破裂，释放出细胞内容物和目标酶，最后通过陶瓷微滤膜或超滤膜透析出富含有N‑乙酰氨基葡萄糖脱乙酰酶的溶液，同时截留去除细胞碎片成分。本发明在提升酶的提取回收率的同时，提取过程中物耗和废水产生量较少，实现了良好的经济效益和环保安全的效果。
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公开(公告)号：CN114990174A
公开(公告)日：2022-09-02
申请号：CN202210557773.4
申请日：2022-05-19
申请人： 江苏海飞生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种从头合成壳寡糖的多酶催化体系及其全细胞生产方法，属于合成生物学领域和生物医药制备技术领域。本发明通过AmgK、GlmU、NodC、NodB的组合，构建了以乙酰氨基葡萄糖为底物单元从头合成壳寡糖的一种多酶催化体外途径；利用该酶组合与辅因子再生系统的偶联，底物磷酸化速率和聚合速率得到调控，壳寡糖聚合度可控(DP
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