一种人树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法

    公开(公告)号:CN104491853A

    公开(公告)日:2015-04-08

    申请号:CN201410841515.4

    申请日:2014-12-29

    发明人: 崔兴日 张涤平

    IPC分类号: A61K39/00 A61P35/00

    摘要: 本发明提供了一种人树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法,属于细胞工程技术领域。本发明在树突状细胞DC从未成熟向成熟的转变过程中加入DC促成熟剂,所述DC促成熟剂包括OK-432和gp100的组合型DC促成熟剂。通过本发明所制备的疫苗,其应用主要为癌症病人的治疗或者癌症高危人群的预防。采用本发明的技术方案制备的人树突状细胞肿瘤疫苗的DC纯度和成熟度得到大大提高;而且促进了DC与肿瘤抗原的融合,有利于肿瘤的治疗;同时制备工艺简单、成本低廉。

    一种从人脂肪组织中分离人脂肪干细胞的方法

    公开(公告)号:CN104357387A

    公开(公告)日:2015-02-18

    申请号:CN201410742169.4

    申请日:2014-12-08

    IPC分类号: C12N5/0775

    摘要: 本发明涉及细胞工程技术领域,具体为一种从人脂肪组织中分离人脂肪干细胞的方法。本发明通过在生理盐水中加入少量的低分子肝素钙,以此作为清洗液清洗人脂肪组织,可很好的去除人脂肪组织中残留的红细胞等杂质,从而可分离出纯度更高的人脂肪干细胞,杂细胞含量显著减少,有利于人脂肪干细胞的分化诱导,并且可减少Ⅰ型胶原酶、胰蛋白酶及无血清培养基的消耗量,降低工艺成本。此外,以150r/min的速度离心消化人脂肪组织1h,可得到活性明显较好的人脂肪干细胞。

    一种体外活化扩增自然杀伤细胞的方法

    公开(公告)号:CN108004211B

    公开(公告)日:2019-02-01

    申请号:CN201711403438.4

    申请日:2017-12-22

    IPC分类号: C12N5/0783

    摘要: 本发明属于生物医药领域,尤其是涉及一种NK细胞的体外活化扩增培养方法。在激活剂预处理中,是在培养瓶中加入激活剂和PBS进行混合后,所述激活剂含有0.10mg‑100.00mg/ml的透明质酸和0.1μg‑20μg/ml的CD16抗体,激活剂和PBS的体积比为1:40;活化处理,吸除激活剂,然后加入生理盐水,轻晃培养瓶,最后吸除生理盐水,得到已包被的培养瓶。在培养单个核细胞时向培养基中添加GM‑CSF(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子),使其终浓度在0.05μg‑1.00μg/ml之间。相比于已有的专利方法,更为简单有效,有效地降低了NK细胞的体外扩增培养成本。在包被步骤中,加入透明质酸,显著地增加NK细胞的比例和扩增倍数;具有极大的市场前景和经济价值。

    一种从人脂肪组织中分离人脂肪干细胞的方法

    公开(公告)号:CN104357387B

    公开(公告)日:2017-02-22

    申请号:CN201410742169.4

    申请日:2014-12-08

    IPC分类号: C12N5/0775

    摘要: 本发明涉及细胞工程技术领域,具体为一种从人脂肪组织中分离人脂肪干细胞的方法。本发明通过在生理盐水中加入少量的低分子肝素钙,以此作为清洗液清洗人脂肪组织,可很好的去除人脂肪组织中残留的红细胞等杂质,从而可分离出纯度更高的人脂肪干细胞,杂细胞含量显著减少,有利于人脂肪干细胞的分化诱导,并且可减少Ⅰ型胶原酶、胰蛋白酶及无血清培养基的消耗量,降低工艺成本。此外,以150r/min的速度离心消化人脂肪组织1h,可得到活性明显较好的人脂肪干细胞。

    一种人脐带间充质干细胞源外泌体及其获取方法和应用

    公开(公告)号:CN107217034A

    公开(公告)日:2017-09-29

    申请号:CN201710262727.0

    申请日:2017-04-20

    IPC分类号: C12N5/0775 A61K8/98 A61Q19/00

    摘要: 本发明属于生物医药领域,具体涉及一种人脐带间充质干细胞源外泌体及其获取方法和应用。所述外泌体的外膜为磷脂双层结构,所述外泌体内部含有micro‑RNA、所述外泌体源细胞的mRNA、DNA和核酸中的至少一种。所述方法步骤如下:1)对人间充质干细胞进行培养,培养阶段在细胞培养基中添加干扰素、EPO和PDGF‑BB;2)对培养后的干细胞进行预处理;3)在预处理后的培养基的上清液中提取所述人脐带间充质干细胞源外泌体。本发明所得外泌体可以进入内皮细胞,进而促进内皮细胞的增殖和管网结构形成,可以作为护肤美容制品的活性成分,具有极大的市场前景和应用价值。

    一种体外活化扩增自然杀伤细胞的方法

    公开(公告)号:CN108004211A

    公开(公告)日:2018-05-08

    申请号:CN201711403438.4

    申请日:2017-12-22

    IPC分类号: C12N5/0783

    摘要: 本发明属于生物医药领域,尤其是涉及一种NK细胞的体外活化扩增培养方法。在激活剂预处理中,是在培养瓶中加入激活剂和PBS进行混合后,所述激活剂含有0.10mg-100.00mg/ml的透明质酸和0.1μg-20μg/ml的CD16抗体,激活剂和PBS的体积比为1:40;活化处理,吸除激活剂,然后加入生理盐水,轻晃培养瓶,最后吸除生理盐水,得到已包被的培养瓶。在培养单个核细胞时向培养基中添加GM-CSF(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子),使其终浓度在0.05μg-1.00μg/ml之间。相比于已有的专利方法,更为简单有效,有效地降低了NK细胞的体外扩增培养成本。在包被步骤中,加入透明质酸,显著地增加NK细胞的比例和扩增倍数;具有极大的市场前景和经济价值。