公开(公告)号：CN107988155A

公开(公告)日：2018-05-04

申请号：CN201711272620.0

申请日：2017-12-06

申请人： 暨赛再生医学科技有限公司

发明人： 吴琨 ,  陈汉森 ,  徐丽婉 ,  徐家科

IPC分类号： C12N5/0783

CPC分类号： C12N5/0638 ,  C12N2500/90 ,  C12N2501/2302 ,  C12N2501/24 ,  C12N2501/515 ,  C12N2533/52

摘要： 本发明涉及免疫细胞的体外培养，更具体涉及一种CIK细胞的体外诱导培养。本发明所述制备方法包括：纤连蛋白和CD3单抗包被细胞培养瓶；制备自体血浆；获取外周血单个核细胞PBMC；IL-2、IFN-γ和自体血浆诱导PBMC；扩增培养。本发明制备得到的CIK细胞，CIK细胞数量多、细胞活率高、CD3+CD56+效应细胞比例高、细胞毒活性强，均可达到临床要求，抗肿瘤能力强。

公开(公告)号：CN107217027A

公开(公告)日：2017-09-29

申请号：CN201710527029.9

申请日：2017-06-30

申请人： 太仓东浔生物科技有限公司

发明人： 曹先艳 ,  王文峰 ,  施亮

IPC分类号： C12N5/00

CPC分类号： C12N5/00 ,  C12N5/0018 ,  C12N2500/12 ,  C12N2500/14 ,  C12N2500/16 ,  C12N2500/24 ,  C12N2500/30 ,  C12N2500/32 ,  C12N2500/34 ,  C12N2500/35 ,  C12N2500/36 ,  C12N2500/38 ,  C12N2500/46 ,  C12N2501/115 ,  C12N2501/20 ,  C12N2501/2302 ,  C12N2501/2304 ,  C12N2501/2314 ,  C12N2501/24

摘要： 本发明提供了一种高营养细胞扩大培养的方法，用移液枪将培养基吸尽，加入3‑5ml PBS洗涤细胞2‑3次，向细胞培养皿中加入1‑2ml 0.38%的胰蛋白酶，于37℃条件下消化3‑5min，加入2‑3ml的新鲜培养基，使用移液枪吹打细胞培养皿底40‑50次；将液体移至细胞离心管中，在1000‑1500g/min条件下离心3‑10min，用移液枪去除上清液，加入2‑3ml新鲜培养基，使用移液枪上下吹打细胞40‑50次；平均加入到3‑8个细胞培养皿中，进行扩大培养。方法合理，易于实现，细胞生长速度快，细胞状态好，边界清晰，镜下观察透亮、分裂相更多、形态及分散度佳，可以有利于生物与健康相关研究。

公开(公告)号：CN107151652A

公开(公告)日：2017-09-12

申请号：CN201710527163.9

申请日：2017-06-30

申请人： 苏州北开生化设备有限公司

发明人： 马荣华

IPC分类号： C12N5/071

CPC分类号： C12N5/0686 ,  C12N2500/12 ,  C12N2500/14 ,  C12N2500/16 ,  C12N2500/24 ,  C12N2500/30 ,  C12N2500/32 ,  C12N2500/34 ,  C12N2500/35 ,  C12N2500/36 ,  C12N2500/38 ,  C12N2501/115 ,  C12N2501/23 ,  C12N2501/2302 ,  C12N2501/2304 ,  C12N2501/2314 ,  C12N2501/24 ,  C12N2501/998 ,  C12N2501/999

摘要： 本发明提供了一种Vero细胞培养基，包括葡萄糖、碳酸氢钠、丙酮酸钠、人血白蛋白、氯化钾、无水硫酸镁、氯化钠、无水磷酸二氢钠、PHA‑植物血球凝集素、叶酸、肌醇、烟酰胺、无水氯化钙、硝酸铁、丁二酸、丁二酸钠、D‑泛酸钙、酒石酸胆碱、核黄素、盐酸硫胺、盐酸吡哆辛、还原谷胱甘肽、胆固醇、抗坏血酸磷酸酯、聚碳酸酯、酚红钠和去离子水。本发明所述的Vero细胞培养基，其组分合理，营养丰富，富含生长因子，可以为Vero细胞培养提供更多的营养物，细胞生长速度快，细胞状态好，边界清晰，镜下观察透亮、分裂相更多、形态及分散度佳，用于Vero细胞的培养以及研究。

公开(公告)号：CN107151650A

公开(公告)日：2017-09-12

申请号：CN201710524382.1

申请日：2017-06-30

申请人： 苏州北开生化设备有限公司

发明人： 马荣华

IPC分类号： C12N5/071

CPC分类号： C12N5/0686 ,  C12N2500/12 ,  C12N2500/14 ,  C12N2500/16 ,  C12N2500/24 ,  C12N2500/30 ,  C12N2500/32 ,  C12N2500/34 ,  C12N2500/35 ,  C12N2500/36 ,  C12N2500/38 ,  C12N2501/115 ,  C12N2501/23 ,  C12N2501/2302 ,  C12N2501/2304 ,  C12N2501/2314 ,  C12N2501/24 ,  C12N2501/998 ,  C12N2501/999

摘要： 本发明提供了一种Vero细胞的复苏方法，将冻存的Vero细胞冻存管从液氮或者‑80℃冰箱中取出，在取出后1min内于37℃摇晃至含有Vero细胞专用冻存液的Vero细胞液完全融化将Vero细胞液加入到盛有2‑3ml新鲜Vero细胞专用培养基的离心管中，用移液枪上下吹打20‑30次，于1000‑1500g/min的转速下离心3‑10min；移去上清液，加入1‑2ml的新鲜Vero细胞专用培养基，用移液枪上下吹打40‑50次，然后均匀的加入到盛有7‑9ml的新鲜Vero细胞专用培养基，于37℃，5%CO2培养箱中培养。

公开(公告)号：CN107142245A

公开(公告)日：2017-09-08

申请号：CN201710401454.3

申请日：2017-05-31

申请人： 东莞市保莱生物科技有限公司

发明人： 罗天恩

IPC分类号： C12N5/0783

CPC分类号： C12N5/0638 ,  C12N2500/50 ,  C12N2501/2302 ,  C12N2501/24 ,  C12N2501/515 ,  C12N2501/90 ,  C12N2501/91

摘要： 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种CIK细胞培养方法，包括以下步骤：（1）将外周血单个核细胞在CIK培养液重悬，得到细胞悬液；（2）将细胞悬液加入到已预先用抗CD3单克隆抗体和retronectin包被好的培养瓶中，之后置于37℃，5%CO2饱和湿度培养箱中培养；（3）培养的第3天补充CIK培养液；（4）培养的第6天，补加完CIK培养液后，进行扩大培养；（5）培养的第9天补充CIK培养液；（6）培养至第13‑14天，收获细胞。本发明可显著提高免疫细胞的增殖率，尤其是CD3+CD56+效应细胞的增殖率，提高其杀伤活性。

公开(公告)号：CN106635986A

公开(公告)日：2017-05-10

申请号：CN201611094578.3

申请日：2016-12-02

申请人： 中国计量大学

发明人： 陈春 ,  胡华军 ,  杨连阳 ,  谢昕

IPC分类号： C12N5/0783 ,  C08B37/00 ,  A61K35/17 ,  A61P35/00

CPC分类号： C12N5/0638 ,  A61K35/17 ,  C08B37/0003 ,  C12N2501/24 ,  C12N2501/515 ,  C12N2501/90

摘要： 本发明涉及一种能促进CIK细胞增殖分化的人参多糖、培养基、培养方法和应用。所述人参多糖是由人参制备而成。所述制备方法包括以下步骤：人参加水煎煮，过滤浓缩，冷藏静置，离心收集沉淀，干燥后重复水煮醇沉、冷藏离心，重复冻融离心后，减压浓缩干燥得到人参多糖。人参多糖提取液对CIK细胞有明显的诱导增殖作用，CD3和CD56双阳性明显提高且诱导培养后的CIK细胞对肿瘤生长有较强的杀伤作用，具有临床应用的潜力。

公开(公告)号：CN106544319A

公开(公告)日：2017-03-29

申请号：CN201610043808.7

申请日：2016-01-24

申请人： 聊城市奥润生物医药科技有限公司

发明人： 张跃茹 ,  袁红 ,  谭瀛轩 ,  向道凤

IPC分类号： C12N5/0784 ,  A61K35/15 ,  A61P35/00

CPC分类号： C12N5/0639 ,  A61K35/15 ,  C12N2501/24 ,  C12N2501/999

摘要： 本发明提供了一种用于刺激树突状细胞成熟的组合物及其用于刺激树突状细胞成熟的方法，该组合物包括环二核苷酸与IFN-γ。采用该组合物能够诱导树突状细胞成熟，刺激树突状细胞持续分泌IL-12，能持续保持树突状细胞的生物学活性，能表达更高水平的MHC-II、CD40、CD80、CD86，进而能更有效地诱导T细胞的抗肿瘤免疫及抗肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞反应，有助于提高树突状细胞在临床抗肿瘤等疾病治疗过程中的疗效。

公开(公告)号：CN106434553A

公开(公告)日：2017-02-22

申请号：CN201610552689.8

申请日：2016-07-13

申请人： 深圳市合一康生物科技股份有限公司

发明人： 高东 ,  李旺 ,  陈艳媛 ,  王宇环 ,  魏志璋 ,  罗晓玲

IPC分类号： C12N5/0783

CPC分类号： C12N5/0646 ,  C12N2501/2301 ,  C12N2501/2302 ,  C12N2501/24 ,  C12N2501/50 ,  C12N2501/515

摘要： 本发明提供一种联合Tlr4和Tlr7激动剂共刺激扩增人NK细胞的方法，本发明技术中NK细胞是从外周血分离获得的高活性淋巴细胞群、体外培养体系加入一系列细胞因子、Tlr4a（MPLA）和Tlr7a（GD），通过这种鸡尾酒式培养，NK细胞CD3-CD56+）得到活化和大量扩增，达到应用于临床治疗肿瘤的水平。通过本发明所制备的NK细胞与普通NK细胞比较，所获得NK细胞对肿瘤靶细胞杀伤效果明显高于常规。本方法可在体外培养条件下获得大量、安全及杀伤活性强的NK细胞，同时具有制备成本低廉、工序简单、条件易控、对设备的要求较低、易于规模化生产等优势。本发明还提供了NK细胞体外制备的诱导培养体系。通过本发明所制备的NK细胞（Tlr4a-Tlr7a-NK），可用于癌症病人的治疗或者癌症高危人群的预防及抗病毒的治疗等。

公开(公告)号：CN106350486A

公开(公告)日：2017-01-25

申请号：CN201610818913.3

申请日：2016-09-13

申请人： 青海七彩花生物科技有限公司

发明人： 杨廷伟 ,  陈子扬 ,  朱荣富 ,  陈四海 ,  朱晓翔 ,  邓凯旋

IPC分类号： C12N5/0783 ,  C12N5/0784

CPC分类号： C12N5/0639 ,  C12N5/0638 ,  C12N2501/2301 ,  C12N2501/2302 ,  C12N2501/2304 ,  C12N2501/24 ,  C12N2501/515 ,  C12N2501/998 ,  C12N2502/00

摘要： 本发明公开了一种提高DC-CIK细胞杀伤力的细胞培养方法，将培养得到的DC细胞和CIK细胞使用混合培养液混合培养，所述混合培养液中添加有如SEQ ID NO.1所示的激发肽，利用激发肽作用于混合培养的DC细胞和CIK细胞，以激发形成DC-CIK细胞。本发明提供的方法通过改变培养体系成分，将DC与CIK之间由抑制作用变成促进、激发作用，可以提高共培养后的DC-CIK细胞对靶细胞的杀伤力，有助于提高免疫治疗效果。

公开(公告)号：CN104379730B

公开(公告)日：2016-12-14

申请号：CN201380029061.4

申请日：2013-05-30

申请人： JW可瑞基因株式会社

发明人： 李润 ,  康惠媛 ,  韩承洙 ,  金永穆 ,  裵容洙 ,  安瑞姬

IPC分类号： C12N5/02 ,  C12N5/0784

CPC分类号： C12N5/0639 ,  A61K2039/5154 ,  C12N2500/72 ,  C12N2501/02 ,  C12N2501/05 ,  C12N2501/056 ,  C12N2501/2301 ,  C12N2501/2306 ,  C12N2501/24 ,  C12N2501/25 ,  C12N2501/999 ,  C12N2506/11

摘要： 本发明涉及一种使树突细胞成熟的组合物，包括：作为成熟促进因子的白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)、前列腺素E2(PGE2)、溶链菌制剂(OK432)和/或聚肌胞。本发明的使树突细胞成熟的组合物可具有不仅改进树突细胞诱导免疫应答的能力，而且可以降低树突细胞的抗原非特异性的免疫应答，并且提高树突细胞的抗原特异性的免疫应答，从而使免疫疗法的效果最大化。