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公开(公告)号：CN114438131A
公开(公告)日：2022-05-06
申请号：CN202210181171.3
申请日：2022-02-25
申请人： 上海健士拜生物科技有限公司 , 澳斯康生物(南通)股份有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司 , 健顺生物科技(南通)有限公司
摘要： 本发明公开了293细胞的转染方法，包括以下步骤：将293细胞与待转染物质混合，进行流式电转转染，所述流式电转转染的电压值为100V～300V，脉冲值为1000μs～5000μs，电击次数为1～10次，间隔为100ms～600ms，转染液流速为1mL/min～10mL/min，转染时的所述293细胞的细胞密度为1×105cells/mL～5×107cells/mL；将转染后的293细胞接种到转染培养基进行培养，所述转染培养基中含有L‑酪氨酸、烟酰胺、硫酸镁和氢化可的松，流式电转染条件和转染后营养环境相互配合，可使细胞的转染损伤修复并获得更好的生长环境，实现较高的基因表达强度、细胞密度和细胞存活率。
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公开(公告)号：CN114106154A
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN202210082970.5
申请日：2022-01-25
申请人： 上海健士拜生物科技有限公司 , 澳斯康生物(南通)股份有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
摘要： 本发明涉及一种纳米抗体的层析方法，包括如下步骤：S1：对纳米抗体收获液进行亲和层析，收集亲和层析洗脱液；S2：调节所述亲和层析洗脱液的pH为5±0.5、纳米抗体浓度小于等于6mg/mL，然后加入(NH4)2SO4调节电导率至80±20mS/cm，制备待层析液；S3：对所述待层析液进行疏水层析。该纳米抗体的层析方法有效去除聚集体、宿主细胞蛋白（HCP）和宿主细胞DNA（HCD）。
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公开(公告)号：CN115369069A
公开(公告)日：2022-11-22
申请号：CN202211006805.8
申请日：2022-08-22
申请人： 上海健士拜生物科技有限公司 , 澳斯康生物(南通)股份有限公司 , 上海澳斯康生物制药有限公司 , 健顺生物科技(南通)有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
摘要： 本发明涉及一种293细胞补料培养基及其制备和应用，所述293细胞补料培养基包含氨基酸、维生素无机盐、葡萄糖、丙酮酸钠、次黄嘌呤、胸腺嘧啶核苷和水。相对于传统技术，本发明具备如下有益效果：本发明通过氨基酸、维生素和无机盐种类的选择，并搭配葡萄糖、丙酮酸钠、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷，形成特定配方的培养基配方，在采用生长培养基培养293细胞的过程中补加该培养基配方，能够很好地维持细胞密度增长并保持较高的细胞活率，同时维持细胞蛋白抗体浓度持续升高，同时该补料对于病毒的表达滴度亦有帮助作用。
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公开(公告)号：CN114106154B
公开(公告)日：2022-04-22
申请号：CN202210082970.5
申请日：2022-01-25
申请人： 上海健士拜生物科技有限公司 , 澳斯康生物(南通)股份有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
摘要： 本发明涉及一种纳米抗体的层析方法，包括如下步骤：S1：对纳米抗体收获液进行亲和层析，收集亲和层析洗脱液；S2：调节所述亲和层析洗脱液的pH为5±0.5、纳米抗体浓度小于等于6mg/mL，然后加入(NH4)2SO4调节电导率至80±20mS/cm，制备待层析液；S3：对所述待层析液进行疏水层析。该纳米抗体的层析方法有效去除聚集体、宿主细胞蛋白（HCP）和宿主细胞DNA（HCD）。
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公开(公告)号：CN114934053B
公开(公告)日：2024-02-06
申请号：CN202210757360.0
申请日：2022-06-30
申请人： 澳斯康生物(南通)股份有限公司 , 上海健士拜生物科技有限公司 , 健顺生物科技(南通)有限公司 , 上海澳斯康生物制药有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
发明人： 牛庆田 , 刘兵 , 施赛赛 , 林健芬 , 马燕 , 周亲亲 , 殷翔宇 , 孙超 , 何家玲 , 郑海峰 , 卜纪斌 , 郜诗炯 , 顾如林 , 胡加慧 , 刘峰 , 仇金树 , 阚子义 , 罗顺
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/54 , C12N5/10 , C12R1/91
摘要： 本发明公开了一种岩藻糖基转移酶8缺陷型CHO细胞系的制备方法，包括：采用三种sgRNA与FUT8基因编码SH3结构域的外显子区域片段重组敲除CHO细胞的FUT8基因，以获得岩藻糖基转移酶8缺陷型CHO细胞系；其中，外显子区域片段包含如SEQ ID NO.1所示的序列；三种sgRNA的序列分别如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。本发明创造性地采用三种sgRNA与FUT8基因编码SH3结构域的外显子区域片段重组以敲除CHO细胞的FUT8基因，显著提高sgRNA的打靶效率，进而显著提高了FUT8基因的敲除效率，更容易获得岩藻糖基转移酶8缺陷型CHO细胞系。
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公开(公告)号：CN114774369B
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202210324380.9
申请日：2022-03-30
申请人： 上海健士拜生物科技有限公司 , 澳斯康生物(南通)股份有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司 , 健顺生物科技(南通)有限公司 , 上海澳斯康生物制药有限公司
摘要： 本发明涉及一种腺病毒生产用无血清培养基及腺病毒生产方法，所述培养基包含氨基酸、维生素、无机盐、葡萄糖、PF68、透明质酸钠和水；其中，所述维生素包含氯化胆碱、泛酸钙、烟酰胺、盐酸吡哆醇、核黄素、盐酸硫胺素和肌醇。本发明采用盐酸吡哆醇代替叶酸和盐酸吡哆辛，与氯化胆碱、泛酸钙、烟酰胺、核黄素、盐酸硫胺素和肌醇构成维生素源，并配合PF68和透明质酸钠，与氨基酸、无机盐和葡萄糖一起构成特定培养基配方，采用该培养基配方生产腺病毒的过程中，接入的腺病毒能高效转染宿主细胞。
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公开(公告)号：CN115807040A
公开(公告)日：2023-03-17
申请号：CN202210856914.2
申请日：2022-07-20
申请人： 上海澳斯康生物制药有限公司 , 澳斯康生物(南通)股份有限公司 , 上海健士拜生物科技有限公司 , 健顺生物科技(南通)有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
IPC分类号： C12N15/864 , C12N15/12 , C12N5/10 , A61K48/00 , A61P35/00
摘要： 本发明公开了一种PD‑1蛋白表达载体及其应用，其中，PD‑1蛋白表达载体包括AAV载体，AAV载体的多克隆位点的酶切位点间插入有PD‑1基因片段。本发明的PD‑1蛋白表达载体，能够在人体内长期表达PD‑1蛋白，PD‑1蛋白和肿瘤细胞的PD‑L1特异性结合，从而降低肿瘤细胞对T细胞的负调节作用，提高T淋巴细胞对肿瘤细胞生长的抑制作用。
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公开(公告)号：CN114539351B
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202210094984.9
申请日：2022-01-26
申请人： 上海健士拜生物科技有限公司 , 澳斯康生物(南通)股份有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司 , 健顺生物科技(南通)有限公司
摘要： 本发明涉及一种纳米抗体的纯化方法，包括如下步骤：将纳米抗体收获液依次进行阳离子层析和阴离子层析，收集阴离子层析洗脱液；其中，所述阴离子层析采用的洗脱液的pH为7±0.5，所述洗脱液包含：10±2mM的Na2HPO4、10±2mM的NaH2PO4、0.01M～0.03M的精氨酸以及2mM～8mM的(NH4)2SO4。上述纳米抗体的纯化方法能够有效提高纳滤过程中的纳滤膜可滤过载量，同时还能够有效去除纳米抗体制品中的宿主细胞蛋白(HCP)，并在层析过程中维持纳米抗体的稳定性，减少聚集体的形成。
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公开(公告)号：CN114934053A
公开(公告)日：2022-08-23
申请号：CN202210757360.0
申请日：2022-06-30
申请人： 澳斯康生物(南通)股份有限公司 , 上海健士拜生物科技有限公司 , 健顺生物科技(南通)有限公司 , 上海澳斯康生物制药有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
发明人： 牛庆田 , 刘兵 , 施赛赛 , 林健芬 , 马燕 , 周亲亲 , 殷翔宇 , 孙超 , 何家玲 , 郑海峰 , 卜纪斌 , 郜诗炯 , 顾如林 , 胡加慧 , 刘峰 , 仇金树 , 阚子义 , 罗顺
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/54 , C12N5/10 , C12R1/91
摘要： 本发明公开了一种岩藻糖基转移酶8缺陷型CHO细胞系的制备方法，包括：采用三种sgRNA与FUT8基因编码SH3结构域的外显子区域片段重组敲除CHO细胞的FUT8基因，以获得岩藻糖基转移酶8缺陷型CHO细胞系；其中，外显子区域片段包含如SEQ ID NO.1所示的序列；三种sgRNA的序列分别如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。本发明创造性地采用三种sgRNA与FUT8基因编码SH3结构域的外显子区域片段重组以敲除CHO细胞的FUT8基因，显著提高sgRNA的打靶效率，进而显著提高了FUT8基因的敲除效率，更容易获得岩藻糖基转移酶8缺陷型CHO细胞系。
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公开(公告)号：CN115155320B
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202210929272.4
申请日：2022-08-03
申请人： 澳斯康生物(南通)股份有限公司 , 上海澳斯康生物制药有限公司 , 上海健士拜生物科技有限公司 , 健顺生物科技(南通)有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
摘要： 本发明涉及一种超滤膜清洗方法以及蛋白类溶液的超滤方法。所述超滤膜清洗方法包括如下步骤：对超滤结束后的超滤膜进行第一次水洗；对第一次水洗后的超滤膜进行碱洗；对碱洗后的超滤膜进行第二次水洗；对第二次水洗后的超滤膜进行酸洗；对酸洗后的超滤膜进行第三次水洗；其中，酸洗采用的溶液包括浓度为0.3M～0.7M的乙酸以及浓度为15mM～25mM的硫酸铵。
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