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    一种PF1022A分离纯化的方法
    4.
    发明授权
    一种PF1022A分离纯化的方法 有权

    公开(公告)号：CN108570016B

    公开(公告)日：2021-11-26

    申请号：CN201710142259.3

    申请日：2017-03-10

    申请人： 上海医药工业研究院 ,  中国医药工业研究总院

    发明人： 陈少欣 ,  刘瑞 ,  马巧慧

    IPC分类号： C07D273/00

    摘要： 本发明提供了一种PF1022A分离纯化的方法。该方法包括如下步骤：从含PF1022A的发酵液中收集菌渣；将丙酮与菌渣混合，萃取、过滤，得提取液1，浓缩，得提取液2；将提取液2上样大孔树脂，预洗脱后，洗脱，收集活性部位，得含PF1022A的洗脱液，将其浓缩至除去有机溶剂，得含PF1022A的浓缩液；将含PF1022A的浓缩液用乙酸乙酯萃取后，得有机相和水相，将所得有机相浓缩、结晶即可；大孔树脂为H‑60反相吸附树脂和/或HB‑60反相吸附树脂。该方法操作简便、成本低、所用溶剂毒性较小、大孔树脂可反复使用、产物检测方法简单，适于工业化生产，所得PF1022A的收率可达70％，纯度可达91％以上。

    一种去甲基金霉素的提取方法
    6.
    发明授权
    一种去甲基金霉素的提取方法 有权

    公开(公告)号：CN108147976B

    公开(公告)日：2020-11-10

    申请号：CN201611110609.X

    申请日：2016-12-06

    申请人： 上海医药工业研究院 ,  中国医药工业研究总院

    发明人： 陈少欣 ,  沈晓放 ,  吴远杰 ,  杨松柏

    IPC分类号： C07C231/24 ,  C07C237/26

    摘要： 本发明提供一种去甲基金霉素的提取方法，其包括如下步骤：调发酵液的pH值至酸性，发酵液与菌体固液分离，得液体1；所得液体1与3‑4％的阳离子表面活性剂，在pH值为8.0‑8.5，发生络合反应，固液分离，得络合物1；阳离子表面活性剂为十四烷基三甲基氯化铵和/或十六烷基三甲基氯化铵；所述百分比为阳离子表面活性剂的质量占液体1的质量的百分比；调所得络合物1的pH值，与尿素发生络合反应，固液分离，得络合物2；调所得络合物2的pH值，使之溶解，固液分离，得液体2；用盐酸调节所得液体2的pH值，降温、结晶，得DMCTC盐酸盐。该甲基金霉素的提取方法，可获得纯度≥94％的DMCTC盐酸盐。

    一种基因工程菌生产β-胡萝卜素的方法及其基因工程菌
    8.
    发明公开
    一种基因工程菌生产β-胡萝卜素的方法及其基因工程菌 无效

    公开(公告)号：CN108118007A

    公开(公告)日：2018-06-05

    申请号：CN201611082146.0

    申请日：2016-11-30

    申请人： 上海医药工业研究院 ,  中国医药工业研究总院

    发明人： 陈少欣 ,  尹升明 ,  吴运杰 ,  杨松柏

    IPC分类号： C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12P23/00 ,  C12R1/645

    摘要： 本发明公开了一种基因工程菌生产β-胡萝卜素的方法及其基因工程菌。该基因工程菌是一种含有carRA基因和carB基因的耶罗维解脂酵母(Yarrowia lipotica)基因工程菌。本发明通过基因工程方法向耶罗维解脂酵母引入来源于三孢布拉霉(Blakeslea trispora)carRA基因和carB基因，进一步增强双香儿基焦磷酸合酶(GGS)和3-羟基3-甲基乙酰辅酶A还原酶(HMG-CoAcata reductase)的表达，敲除3-磷酸甘油脱氢酶(Gut2)与过氧化物酶(Pox2)，获得了异源表达β-胡萝卜素的耶罗维解脂酵母菌株，发酵条件简单，β-胡萝卜素产量较高，具有重要的生产价值。

    一种生产PF1022A的发酵培养基及发酵方法
    9.
    发明公开
    一种生产PF1022A的发酵培养基及发酵方法 有权

    公开(公告)号：CN107217007A

    公开(公告)日：2017-09-29

    申请号：CN201610165079.2

    申请日：2016-03-22

    申请人： 上海医药工业研究院 ,  中国医药工业研究总院

    发明人： 陈少欣 ,  刘瑞

    IPC分类号： C12N1/14 ,  C12P21/04 ,  C12R1/645

    摘要： 本发明公开了一种生产PF1022A的发酵培养基及发酵方法。其包括(i)7～13.5％有机碳源，有机碳源为选自山梨醇与乳糖中的一种或两种、葡萄糖和可溶性淀粉，(ii)0.5～0.7％无机盐，无机盐包括NaCl和CaCO3，和(iii)有机氮源，所述有机氮源为(1)1～6％的花生饼粉或(2)0.3～2％的酵母提取物；或(3)包括花生饼粉和酵母提取物，所述有机氮源的含量为3～4％，所述百分比为占所述发酵培养基的总体积的质量体积百分比。本发明所述的发酵培养基能够高产PF1022A。本发明所述的发酵生产PF1022A的方法采用了所述的发酵培养基，操作简单，有利于PF1022A的产业化生产。

    (R)-3,5-双(三氟甲基)苯乙醇的生物制备方法
    10.
    发明公开
    (R)-3,5-双(三氟甲基)苯乙醇的生物制备方法 有权

    公开(公告)号：CN106399398A

    公开(公告)日：2017-02-15

    申请号：CN201611008098.0

    申请日：2016-11-16

    申请人： 上海医药工业研究院 ,  中国医药工业研究总院

    发明人： 张福利 ,  陈少欣 ,  汤佳伟 ,  倪国伟 ,  谭支敏 ,  郭翔 ,  聂鑫 ,  孙文霞

    IPC分类号： C12P7/22

    CPC分类号： C12P7/22

    摘要： 本发明提供了一种(R)-3,5-双(三氟甲基)苯乙醇(Ⅰ)的生物制备方法。具体地，本发明方法包括以下步骤：(a)在液态反应体系中，以式Ⅱ化合物为底物，在辅酶存在下，在羰基还原酶催化下，进行不对称还原反应，从而形成式Ⅰ化合物；其中，所述反应体系中，式Ⅱ化合物浓度为50～1000g/L；和(b)任选地从步骤(a)反应后的反应体系中分离出式I化合物。本发明还提供了一种反应体系，包括：(i)水性溶剂；(ii)底物，所述底物为式II化合物；(iii)辅酶；(iv)羰基还原酶；(v)共底物；和(vi)用于辅酶再生的酶。