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公开(公告)号:CN110628717A
公开(公告)日:2019-12-31
申请号:CN201911029541.6
申请日:2019-10-28
申请人: 上海科医联创生物科技有限公司
IPC分类号: C12N5/0783
摘要: 一种浸润性T细胞的培养方法,包括以下步骤:1)制备形成效应T细胞,2)使用退分化培养基,使效应T细胞退分化为TIL-TCM,3)使用扩增培养基扩增TCM。本发明所培养的TIL-TCM有更强的瘤体趋向性,能归巢到肿瘤位置;能特异性识别肿瘤细胞,特异性杀瘤;能适应肿瘤微环境;能长时间在体内存活,起到长期抗肿瘤作用;少量的细胞,就能发挥强效的抗肿瘤作用,培养时间短,副反应几率低,操作简单,细胞增殖速度快。
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公开(公告)号:CN107354129A
公开(公告)日:2017-11-17
申请号:CN201710734675.2
申请日:2017-08-24
申请人: 上海科医联创生物科技有限公司
CPC分类号: C12N5/0656 , C12N5/0625 , C12N2501/105 , C12N2501/11
摘要: 一种自体皮肤来源的成纤维细胞培养方法,包括下述步骤:1)取自体皮肤,分为多个组织块,将所述组织块贴在培养皿中,往所述组织块上滴加浓缩胎牛血清,充分浸润组织块,使组织块不易干燥,并促进成纤维细胞爬出;2)往所述步骤1)中的培养皿中加入选择培养基,将培养皿置于培养箱中培养直至成纤维细胞融合完成;所述选择培养基促进成纤维细胞生长,抑制其他杂细胞生长;3)将所述步骤2)的培养皿从培养箱中取出,加入胰酶消化,使成纤维细胞从培养皿中脱落;4)将所述步骤3)得到的成纤维细胞使用完全培养基接种至培养瓶中,并使成纤维细胞密度达到90%,得到原代成纤维细胞;所述完全培养基终止步骤3)的消化,并作为成纤维细胞生长增殖的培养基;5)将所述步骤4)中的原代成纤维细胞传代扩瓶培养。
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公开(公告)号:CN107418926B
公开(公告)日:2018-07-06
申请号:CN201710735226.X
申请日:2017-08-24
申请人: 上海科医联创生物科技有限公司
IPC分类号: C12N5/071
摘要: 一种皮肤成纤维细胞培养的选择性培养基,包括基础培养基、胎牛血清、人血清白蛋白、牛脑垂体提取物、胰岛素、维生素C、生物素、胰岛素样生长因子和表皮生长因子,并且按照1ml:0.0125ml‑0.05ml:0.005ml‑0.025ml:80μg‑423μg:7μg‑18μg:22μg‑60μg:37μg‑214μg:1μg‑20μg:0.1μg‑1μg的比例混合;所述基础培养包括DMEM培养基和F12培养基。本发明的优点在于对成纤维细胞具有选择性,提高成纤维细胞的纯度,避免杂细胞污染,有效缩短细胞传代数,细胞增殖速度快。本发明的选择性培养基还能够降低血清使用量,节约成本。
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公开(公告)号:CN105177169B
公开(公告)日:2016-10-26
申请号:CN201510707423.1
申请日:2015-10-27
申请人: 上海科医联创生物科技有限公司
IPC分类号: C12Q1/68
摘要: 本发明涉及一种含有染料EvaGreen和双热启动酶的定量PCR方法,其特征在于包括如下步骤:(1)构建PCR反应体系,包括:待测样品;与所述待测样品中待测模板互补的正向引物和反向引物;荧光染料EvaGreen;及双热启动酶,包括HotStar Taq DNA聚合酶和Anti Taq DNA聚合酶;(2)在所述PCR反应体系中,对所述待测模板进行PCR扩增,以形成双链DNA‑EvaGreen荧光染料复合物;(3)PCR扩增过程之中或之后,检测所述PCR反应体系的荧光值,以确定扩增产物的数量,从而确定待测模板的数量。本发明的定量PCR方法具有高精确度、高效率、高灵敏度、高特异性且价格低廉的特点。
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公开(公告)号:CN105194731B
公开(公告)日:2016-07-13
申请号:CN201510706379.2
申请日:2015-10-27
申请人: 上海科医联创生物科技有限公司
摘要: 本发明提供了一种体外构建组织工程软骨用的凝胶状支架配方及制备方法,配方包括凝胶和添加剂,凝胶为纤维蛋白、胶原蛋白、透明质酸、凝血酶,添加剂为维生素C、亚油酸、胆固醇、地塞米松、转铁蛋白、生物素等。通过使用该配方及方法制备的支架,使得在体外培养的软骨细胞保持原代活性,且在软骨组织工程临床应用中能根据病人软骨缺损形状,提供塑性的凝胶状支架。
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公开(公告)号:CN110628717B
公开(公告)日:2020-10-30
申请号:CN201911029541.6
申请日:2019-10-28
申请人: 上海科医联创生物科技有限公司
IPC分类号: C12N5/0783
摘要: 一种浸润性T细胞的培养方法,包括以下步骤:1)制备形成效应T细胞,2)使用退分化培养基,使效应T细胞退分化为TIL‑TCM,3)使用扩增培养基扩增TCM。本发明所培养的TIL‑TCM有更强的瘤体趋向性,能归巢到肿瘤位置;能特异性识别肿瘤细胞,特异性杀瘤;能适应肿瘤微环境;能长时间在体内存活,起到长期抗肿瘤作用;少量的细胞,就能发挥强效的抗肿瘤作用,培养时间短,副反应几率低,操作简单,细胞增殖速度快。
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公开(公告)号:CN109355256A
公开(公告)日:2019-02-19
申请号:CN201811431804.1
申请日:2018-11-27
申请人: 上海科医联创生物科技有限公司
IPC分类号: C12N5/0775 , C12N5/077
摘要: 本发明其中一种技术方案提供了一种脂肪干细胞的培养方法,该方法中使用灭活的成纤维细胞进行选择性培养。本发明使用灭活的成纤维细胞能释放凋亡信号,抑制成纤维细胞的扩增,且不影响脂肪干细胞的扩增;灭活的成纤维细胞能释放各种因子如bfgf、igf-1,TGF等,所以用该细胞当滋养层细胞培养脂肪干细胞不需要额外再添加因子,只需用基础培养基加血清替代物即可,且其扩增效率是传统方法的一倍以上。
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公开(公告)号:CN107418926A
公开(公告)日:2017-12-01
申请号:CN201710735226.X
申请日:2017-08-24
申请人: 上海科医联创生物科技有限公司
IPC分类号: C12N5/071
CPC分类号: C12N5/0656 , C12N2500/32 , C12N2500/36 , C12N2500/38 , C12N2500/84 , C12N2501/105 , C12N2501/11 , C12N2501/135 , C12N2501/33 , C12N2501/998
摘要: 一种皮肤成纤维细胞培养的选择性培养基,包括基础培养基、胎牛血清、人血清白蛋白、牛脑垂体提取物、胰岛素、维生素C、生物素、胰岛素样生长因子和表皮生长因子,并且按照1ml:0.0125ml-0.05ml:0.005ml-0.025ml:80μg-423μg:7μg-18μg:22μg-60μg:37μg-214μg:1μg-20μg:0.1μg-1μg的比例混合;所述基础培养包括DMEM培养基和F12培养基。本发明的优点在于对成纤维细胞具有选择性,提高成纤维细胞的纯度,避免杂细胞污染,有效缩短细胞传代数,细胞增殖速度快。本发明的选择性培养基还能够降低血清使用量,节约成本。
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公开(公告)号:CN106754730A
公开(公告)日:2017-05-31
申请号:CN201710096536.1
申请日:2017-02-22
申请人: 上海科医联创生物科技有限公司
IPC分类号: C12N5/10 , C12N5/0783 , C12N13/00
CPC分类号: C12N5/0646 , C12N5/0634 , C12N13/00 , C12N2501/2302 , C12N2502/30
摘要: 本发明公开了一种高效扩增NK细胞的方法,具体是一种使用高表达膜蛋白CD19、CD137L、CD86、CD64及跨膜蛋白IL‑21的K562工程细胞联合人IL‑2突变体高效扩增NK细胞的方法。本发明方法操作简单,成本低,获得的NK细胞数量大、纯度高、杀伤效果好,适合NK细胞的大规模制备,为NK细胞过继性免疫治疗应用于临床打下了良好的基础。
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公开(公告)号:CN105177169A
公开(公告)日:2015-12-23
申请号:CN201510707423.1
申请日:2015-10-27
申请人: 上海科医联创生物科技有限公司
IPC分类号: C12Q1/68
CPC分类号: C12Q1/686 , C12Q2561/101 , C12Q2545/114 , C12Q2531/113
摘要: 本发明涉及一种含有染料EvaGreen和双热启动酶的定量PCR方法,其特征在于包括如下步骤:(1)构建PCR反应体系,包括:待测样品;与所述待测样品中待测模板互补的正向引物和反向引物;荧光染料EvaGreen;及双热启动酶,包括HotStar Taq DNA聚合酶和Anti Taq DNA聚合酶;(2)在所述PCR反应体系中,对所述待测模板进行PCR扩增,以形成双链DNA-EvaGreen荧光染料复合物;(3)PCR扩增过程之中或之后,检测所述PCR反应体系的荧光值,以确定扩增产物的数量,从而确定待测模板的数量。本发明的定量PCR方法具有高精确度、高效率、高灵敏度、高特异性且价格低廉的特点。
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