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公开(公告)号：CN117233384A
公开(公告)日：2023-12-15
申请号：CN202311201226.3
申请日：2023-09-18
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： G01N33/569 , C08J3/075 , C08L33/26 , C08L89/00 , G01N33/574 , G01N33/58
摘要： 本发明公开了检测外泌体的DNA复合水凝胶及其制备方法和应用，DNA复合水凝胶由两条聚丙烯酰胺通过2个DNAⅠ‑适配体‑DNAⅡ交联结构将Cas蛋白封装于聚丙烯酰胺内，作为检测特定靶序列的传感平台，外泌体表面蛋白与靶序列杂交反应后，DNAⅠ‑适配体‑DNAⅡ交联结构崩塌，释放封装的Cas蛋白，利用Cas蛋白切割活性从而实现可视化的凝胶自放大光学信号定量分析，以达到对肿瘤细胞分泌的外泌体的特异性检测及定量分析，本发明的方法灵敏度高、特异性好，为临床肿瘤的早期筛查诊断提供技术支持。
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公开(公告)号：CN114934046A
公开(公告)日：2022-08-23
申请号：CN202210636342.7
申请日：2022-06-07
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： C12N15/11 , C12Q1/6806 , C12Q1/682 , C12Q1/6886
摘要： 本发明提供了熵驱动DNA链置换四面体的microRNA检测方法及其应用，涉及microRNA检测技术领域。本发明提供了熵驱动DNA四面体纳米探针，由P1‑P6六条单链DNA通过碱基互补配对得到。本发明利用DNA四面体的一条边作为双链复合体，一个顶点自组装燃料链，以DNA四面体作为穿膜载体，以熵驱动DNA链置换动态回路实现细胞内靶标microRNA的无酶恒温级联放大，可以实现细胞内单个分子在微‑纳尺度的原位在体检测，具有良好的灵敏度和特异性。
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公开(公告)号：CN116008546B
公开(公告)日：2024-07-09
申请号：CN202210891788.4
申请日：2022-07-27
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： G01N33/573 , G01N33/58 , C12Q1/682
摘要： 本发明公开了DNA链置换的四面体纳米探针在制备基于熵驱动检测ATP的试剂中的应用及方法和产品，通过精确编程设计双链复合体和燃料链，使得一条触发序列的存在即可启动双链复合体和燃料连的一系列级联链置换反应，并促使触发序列在杂交‑链置换‑解离‑再杂交过程的循环利用，将熵驱动DNA链置换动态回路与四面体有机结合，实现无酶恒温的情况下，成对ATP的高灵敏高特异检测，在操作的简单性及性价比上具有较大的优势。
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公开(公告)号：CN111926063B
公开(公告)日：2021-03-23
申请号：CN202010851879.6
申请日：2020-08-21
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
摘要： 本发明具体涉及一种利用3D条形码的DNA分子检测方法，属于基因诊断技术领域，所述检测方法具体为，根据待测DNA序列设计DNA单链环C1和DNA单链L2，DNA单链L2两端序列与DNA单链环C1的一段序列全部杂交，连接DNA单链L2两端序列缺口，形成DNA单链双环C1C2，再与3D条形码上的探针杂交连接，待测DNA与DNA单链双环C1C2杂交，得到的部分双链DNA上具有限制性酶切位点，通过限制性内切酶切割双链DNA释放拓扑结构，在3D条形码表面进行固相RCA反应，最后进行荧光解码。本发明的DNA分子检测方法可以实现DNA单碱基突变的检测，检测灵敏度高、特异性强，最低能检测到0.1％的突变。
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公开(公告)号：CN111926062B
公开(公告)日：2021-03-23
申请号：CN202010850525.X
申请日：2020-08-21
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
摘要： 本发明具体涉及一种基于DNA互锁结构的DNA分子检测方法，属于基因诊断技术领域，所述检测方法为，根据待测DNA序列设计DNA单链环C1和DNA单链L2，DNA单链L2两端序列与DNA单链环C1的一段序列全部杂交，形成DNA单链双环C1C2，再与待测DNA杂交形成部分双链DNA，通过限制性内切酶切割双链DNA释放拓扑结构，以C1为模板进行RCA反应，在RCA反应产物基础上进行支链RCA反应，最后检测反应产物。本发明的DNA分子检测方法操作简单，对待测DNA具有高特异性，通过支链RCA反应放大检测信号，可以应用于背景复杂、含量低的DNA分子溶液的检测。
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公开(公告)号：CN111926063A
公开(公告)日：2020-11-13
申请号：CN202010851879.6
申请日：2020-08-21
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
摘要： 本发明具体涉及一种利用3D条形码的DNA分子检测方法，属于基因诊断技术领域，所述检测方法具体为，根据待测DNA序列设计DNA单链环C1和DNA单链L2，DNA单链L2两端序列与DNA单链环C1的一段序列全部杂交，连接DNA单链L2两端序列缺口，形成DNA单链双环C1C2，再与3D条形码上的探针杂交连接，待测DNA与DNA单链双环C1C2杂交，得到的部分双链DNA上具有限制性酶切位点，通过限制性内切酶切割双链DNA释放拓扑结构，在3D条形码表面进行固相RCA反应，最后进行荧光解码。本发明的DNA分子检测方法可以实现DNA单碱基突变的检测，检测灵敏度高、特异性强，最低能检测到0.1％的突变。
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公开(公告)号：CN111187806A
公开(公告)日：2020-05-22
申请号：CN202010022659.2
申请日：2020-01-09
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： C12Q1/682 , C12Q1/6825
摘要： 本发明涉及一种基于3D DNA纳米网状结构双信号放大技术的microRNA检测方法，本发明基于靶标自循环的催化发卡自组装与3D DNA纳米网结构的整合，构建了一个双信号放大技术的电化学生物传感器。设计的两个发卡序列一旦被靶标启动，即可形成热力学稳定的杂交双链体结构，同时释放靶标进入下一个循环。该过程成功将靶标转换为更加稳定的结构，从而达到第一次信号放大的目的。随后引入了一个3D DNA纳米网结构，该结构由三条DNA序列杂交形成的X型DNA结构通过T4连接酶连接而成。3D DNA纳米网结构可与上述反应形成的双链体结构杂交，从而实现第二次信号放大。具有检测灵敏度高、检测特异性好等优点。
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公开(公告)号：CN118853963A
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202411121131.5
申请日：2024-08-15
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6816 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了DNA水凝胶介导纸基微流控3D打印的多种呼吸道病原体便携式检测平台及其应用，检测平台包括微流控纸分析装置、丙烯酰胺‑DNA凝胶和靶标解离R‑S互补结构；所述微流控纸分析装置包括纸基水凝胶反应层和检测显色层，所述纸基水凝胶反应层位于检测显色层上方；检测过程中将丙烯酰胺‑DNA凝胶和显色液加入反应区，检测样品制备成短靶RNA后加入样品区，经通道流至反应区；当存在靶标时，靶标序列打开靶标解离R‑S，释放的单链与凝胶交联序列互补从而解离水凝胶，凝胶解离后显色液流动至显色层并产生“颜色信号”；可用于多种目标检测，并且具有操作简单、低成本、快速、即时检测的优点。
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公开(公告)号：CN114934099B
公开(公告)日：2024-09-27
申请号：CN202210636366.2
申请日：2022-06-07
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： C12Q1/6825 , C12N15/11
摘要： 本发明提供了一种基于DNAzyme变构调节的DNA四面体样纳米机器、miRNA检测方法及应用，涉及miRNA检测技术领域技术领域。本发明提供了一种基于DNAzyme变构调节的DNA四面体样纳米机器，所述纳米机器由寡核苷酸链P1‑P5和一条抑制剂链组成。本发明所述的DNA四面体样纳米机器使DNAzyme和底物在空间上更加接近，并在一定程度上包裹DNAzyme，可显著增强DNAzyme的灵敏度、细胞渗透能力和抗酶降解能力。
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公开(公告)号：CN118599983A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202411030516.0
申请日：2024-07-30
申请人： 中国人民解放军陆军军医大学第一附属医院
IPC分类号： C12Q1/6876 , C12Q1/6818 , C12N15/11 , A61K45/00 , G01N21/64
摘要： 本发明公开了基于细胞内MicroRNA响应性的原位自组装分子机器及其应用，DNA分子机器是由4个发卡单体组成，当microRNA存在时，可通过H1的toehold打开H1发卡单体，打开后的H1的一段碱基序列又会和H2发卡单体的toehold序列杂交，打开H2单体，然后依次循环下去，直至不停打开发卡单体，最终形成无数个DNA分子机器，可同时实现检测和治疗的功能，且特异性好，灵敏度高。
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