一种兽用腐败梭菌毒素及其制备方法与专用培养基

    公开(公告)号:CN108342434B

    公开(公告)日:2021-08-31

    申请号:CN201810115846.8

    申请日:2018-02-06

    摘要: 本发明公开了一种兽用腐败梭菌毒素及其制备方法与专用培养基。每100ml培养基由下述物质组成:示蛋白胨(proteose peptone)1.5‑2.0g,酪蛋白胨1.5‑2.0g,酵母浸粉0.5‑0.75g,ZnSO4·7H2O 0.14‑0.28mg,Na2HPO4·12H2O 0.5‑0.75g,KH2PO40.03‑0.045g,葡萄糖1‑1.5g,余量为水;所述培养基的pH值为7.5‑8.0。所述腐败梭菌毒素是将腐败梭菌生产菌株接种于培养基中,收集培养物并离心,将上清液过滤即得。按本发明方法毒力最高可提至《中国兽用生物制品规程》制苗标准的10倍,产出投入比可提高至原传统工艺的20倍。并且,用其制备的类毒素疫苗在家兔和绵羊上的相应血清中和效价也分别提高至规程标准的8和8倍。

    一种兽用A型产气荚膜梭菌类毒素的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN109943507B

    公开(公告)日:2021-08-17

    申请号:CN201910230951.0

    申请日:2019-03-26

    摘要: 本发明公开了一种兽用A型产气荚膜梭菌类毒素的制备方法及其应用。所述类毒素制备方法如下:将A型产气荚膜梭菌生产菌株接种于培养基中发酵培养,得到发酵产物,然后将发酵产物在L‑赖氨酸、甲醛水溶液和pH6.8下灭活脱毒,灭活脱毒合格的菌液离心上清即为类毒素。所述培养基包括如下物质:酪蛋白胨、酵母浸粉、CaCl2、ZnSO4·7H2O、Na2HPO4·12H2O、KH2PO4、葡萄糖。按本发明方法制备的A型产气荚膜梭菌毒素的毒力最高可提至制苗标准的12.5倍,用其制备的类毒素在家兔上的一免、二免血清中和效价也分别最高可提至传统工艺的4和50倍,血清效价成本比可最高提至传统工艺的48.8、1216.4倍。

    一种兽用腐败梭菌毒素及其制备方法与专用培养基

    公开(公告)号:CN108342434A

    公开(公告)日:2018-07-31

    申请号:CN201810115846.8

    申请日:2018-02-06

    摘要: 本发明公开了一种兽用腐败梭菌毒素及其制备方法与专用培养基。每100ml培养基由下述物质组成:示蛋白胨(proteose peptone)1.5-2.0g,酪蛋白胨1.5-2.0g,酵母浸粉0.5-0.75g,ZnSO4·7H2O 0.14-0.28mg,Na2HPO4·12H2O 0.5-0.75g,KH2PO40.03-0.045g,葡萄糖1-1.5g,余量为水;所述培养基的pH值为7.5-8.0。所述腐败梭菌毒素是将腐败梭菌生产菌株接种于培养基中,收集培养物并离心,将上清液过滤即得。按本发明方法毒力最高可提至《中国兽用生物制品规程》制苗标准的10倍,产出投入比可提高至原传统工艺的20倍。并且,用其制备的类毒素疫苗在家兔和绵羊上的相应血清中和效价也分别提高至规程标准的8和8倍。

    一种兽用D型产气荚膜梭菌毒素及其制备方法与专用培养基

    公开(公告)号:CN107299070A

    公开(公告)日:2017-10-27

    申请号:CN201710684340.4

    申请日:2017-08-11

    摘要: 本发明公开了兽用D型产气荚膜梭菌毒素的制备方法及其专用培养基。每100ml培养基由下述物质组成:大豆蛋白胨1~1.5g,酪蛋白胨1~1.5g,酵母浸粉0.5~0.75g,Na2HPO4·12H2O 0.5~0.75g、糊精1~1.5g,余量为水;所述培养基的pH值为8.0~8.5。所述D型产气荚膜梭菌毒素是将D型产气荚膜梭菌生产菌株接种于培养基中,收集培养物并离心,将上清液过滤即得。按本发明方法毒力最高可提至《中国兽用生物制品规程》制苗标准的45倍,产出投入比可提高至原传统工艺的30~225倍。并且,用其制备的类毒素疫苗在家兔和绵羊上的相应血清中和效价也分别提高至规程标准的8.3和13.3倍。

    一种串联优势表位的重组猪丹毒杆菌表面保护抗原A及其应用

    公开(公告)号:CN115850404B

    公开(公告)日:2024-02-09

    申请号:CN202211616754.0

    申请日:2022-12-13

    摘要: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种串联优势表位的重组猪丹毒杆菌表面保护抗原A(surface protective antigen A,SpaA)及其应用。该串联优势表位的重组猪丹毒杆菌表面保护抗原A的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,编码上述蛋白的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明进一步构建了含有上述核苷酸序列的表达载体,序列如SEQ ID No.3所示。转化大肠杆菌,获得重组表达菌株。本发明提供的串联优势表位的重组猪丹毒杆菌表面保护抗原A与佐剂混匀,免疫小鼠后可诱导机体产生免疫反应,能为攻毒小鼠提供抵抗1000MLD强毒攻击的100%免疫保护作用;免疫猪后,能为攻毒猪提供抵抗2MLD强毒攻击的67%免疫保护作用,能为攻毒猪提供抵抗1MLD强毒攻击的100%免疫保护作用。

    一种串联优势表位的重组猪丹毒杆菌表面保护抗原A及其应用

    公开(公告)号:CN115850404A

    公开(公告)日:2023-03-28

    申请号:CN202211616754.0

    申请日:2022-12-13

    摘要: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种串联优势表位的重组猪丹毒杆菌表面保护抗原A(surface protective antigen A,SpaA)及其应用。该串联优势表位的重组猪丹毒杆菌表面保护抗原A的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,编码上述蛋白的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明进一步构建了含有上述核苷酸序列的表达载体,序列如SEQ ID No.3所示。转化大肠杆菌,获得重组表达菌株。本发明提供的串联优势表位的重组猪丹毒杆菌表面保护抗原A与佐剂混匀,免疫小鼠后可诱导机体产生免疫反应,能为攻毒小鼠提供抵抗1000MLD强毒攻击的100%免疫保护作用;免疫猪后,能为攻毒猪提供抵抗2MLD强毒攻击的67%免疫保护作用,能为攻毒猪提供抵抗1MLD强毒攻击的100%免疫保护作用。

    一种兽用D型产气荚膜梭菌毒素及其制备方法与专用培养基

    公开(公告)号:CN107299070B

    公开(公告)日:2020-09-04

    申请号:CN201710684340.4

    申请日:2017-08-11

    摘要: 本发明公开了兽用D型产气荚膜梭菌毒素的制备方法及其专用培养基。每100ml培养基由下述物质组成:大豆蛋白胨1~1.5g,酪蛋白胨1~1.5g,酵母浸粉0.5~0.75g,Na2HPO4·12H2O 0.5~0.75g、糊精1~1.5g,余量为水;所述培养基的pH值为8.0~8.5。所述D型产气荚膜梭菌毒素是将D型产气荚膜梭菌生产菌株接种于培养基中,收集培养物并离心,将上清液过滤即得。按本发明方法毒力最高可提至《中国兽用生物制品规程》制苗标准的45倍,产出投入比可提高至原传统工艺的30~225倍。并且,用其制备的类毒素疫苗在家兔和绵羊上的相应血清中和效价也分别提高至规程标准的8.3和13.3倍。