公开(公告)号：CN108342434B

公开(公告)日：2021-08-31

申请号：CN201810115846.8

申请日：2018-02-06

申请人： 中国兽医药品监察所

发明人： 蒋玉文 ,  彭小兵 ,  李旭妮 ,  彭国瑞

IPC分类号： C12N1/20 ,  C12P21/00 ,  A61K39/08 ,  A61P31/04 ,  C12R1/145

摘要： 本发明公开了一种兽用腐败梭菌毒素及其制备方法与专用培养基。每100ml培养基由下述物质组成：示蛋白胨(proteose peptone)1.5‑2.0g，酪蛋白胨1.5‑2.0g，酵母浸粉0.5‑0.75g，ZnSO4·7H2O 0.14‑0.28mg，Na2HPO4·12H2O 0.5‑0.75g，KH2PO40.03‑0.045g，葡萄糖1‑1.5g，余量为水；所述培养基的pH值为7.5‑8.0。所述腐败梭菌毒素是将腐败梭菌生产菌株接种于培养基中，收集培养物并离心，将上清液过滤即得。按本发明方法毒力最高可提至《中国兽用生物制品规程》制苗标准的10倍，产出投入比可提高至原传统工艺的20倍。并且，用其制备的类毒素疫苗在家兔和绵羊上的相应血清中和效价也分别提高至规程标准的8和8倍。

公开(公告)号：CN101979502A

公开(公告)日：2011-02-23

申请号：CN201010504354.1

申请日：2010-10-13

申请人： 中国兽医药品监察所

发明人： 丁家波 ,  支海兵 ,  彭小兵 ,  王楠 ,  李旭妮 ,  戴志红

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/42 ,  C12N15/63 ,  A61K39/295 ,  A61K39/135 ,  A61K39/10 ,  A61P31/04 ,  A61P31/14 ,  C12R1/01

摘要： 本发明涉及表达O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因的重组布鲁氏菌及其疫苗的生产方法。该重组菌株通过在布鲁氏菌S2株菌基因组中稳定地整合进O型FMDV缅甸株(Mya)的VP1基因，并同时破坏了光滑型布鲁氏菌细胞壁LPS结构中O链形成的条件，使重组菌由光滑型转变为粗糙型，使菌株的安全性进一步提高，但仍保留了对布鲁氏菌病良好的免疫效果，该重组菌被命名为重组布鲁氏菌rS2-Mya株。该重组菌能够表达O型FMDV Mya株VP1蛋白，并诱导相应抗体产生，对O型FMD有良好的基础免疫作用。以此菌株生产疫苗将改变布鲁氏菌疫苗免疫动物与野毒株感染动物难以区分的现状，同时实现了FMD疫苗的细胞免疫，并将为布鲁氏菌病和FMD的防控提供了一种良好的疫苗。

公开(公告)号：CN116676269A

公开(公告)日：2023-09-01

申请号：CN202310589362.8

申请日：2023-05-23

申请人： 中国兽医药品监察所

发明人： 张媛 ,  王甲 ,  李俊平 ,  张一帜 ,  李建 ,  赵浩然 ,  李巧玲 ,  王秀丽 ,  刘元杰 ,  李旭妮

IPC分类号： C12N5/20 ,  C07K16/12 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/68 ,  G01N33/58 ,  G01N33/543

摘要： 本发明公开了抗猪丹毒杆菌表面抗原SpaA蛋白单克隆抗体及其应用，本发明提供一种抗猪丹毒杆菌表面抗原SpaA蛋白单克隆抗体由保藏号为CCTCC NO.45350杂交瘤细胞分泌。本发明基于所述的单克隆抗体和表达的重组猪丹毒杆菌表面抗原SpaA蛋白建立了猪丹毒杆菌的竞争ELISA抗体检测方法，该方法用于评价猪丹毒灭活疫苗效力，可降低检验过程生物安全风险、缩减检验成本、缩短检验周期、提高检验结果准确性。

公开(公告)号：CN110041437B

公开(公告)日：2020-12-25

申请号：CN201910352988.0

申请日：2019-04-29

申请人： 中国兽医药品监察所

发明人： 杜吉革 ,  刘莹 ,  张莹辉 ,  陈小云 ,  李旭妮 ,  李启红 ,  薛麒 ,  朱真 ,  王磊 ,  印春生 ,  姚文生

IPC分类号： C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  A61K39/08 ,  A61P31/04

摘要： 本发明涉及一种无毒性破伤风毒素和诺维梭菌α毒素重组融合蛋白。本发明制备的重组融合蛋白，系采用经过密码子优化、破伤风毒素C片段与诺维梭菌α毒素的C末端以及N端的无毒性抗原表位的重组融合蛋白生产，即最大限度地保留两种毒素蛋白的免疫原性，又避免了天然毒素的生物安全隐患。该重组融合蛋白可用来制备破伤风梭菌和诺维梭菌亚单位疫苗，与我国目前商品化的破伤风梭菌和诺维梭菌天然毒素灭活疫苗相比，具有制备工艺简单、免疫剂量低、疫苗效力优良等优点，并大大降低了疫苗生产过程中的生物安全风险，是上述两种梭菌毒素疫苗升级换代的理想候选疫苗抗原；而且在与其它抗原共同制备联苗时，无需增大联苗的使用剂量，即可制备联苗。

公开(公告)号：CN110041437A

公开(公告)日：2019-07-23

申请号：CN201910352988.0

申请日：2019-04-29

申请人： 中国兽医药品监察所

发明人： 杜吉革 ,  刘莹 ,  张莹辉 ,  陈小云 ,  李旭妮 ,  李启红 ,  薛麒 ,  朱真 ,  王磊 ,  印春生 ,  姚文生

IPC分类号： C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  A61K39/08 ,  A61P31/04

摘要： 本发明涉及一种无毒性破伤风毒素和诺维梭菌α毒素重组融合蛋白。本发明制备的重组融合蛋白，系采用经过密码子优化、破伤风毒素C片段与诺维梭菌α毒素的C末端以及N端的无毒性抗原表位的重组融合蛋白生产，即最大限度地保留两种毒素蛋白的免疫原性，又避免了天然毒素的生物安全隐患。该重组融合蛋白可用来制备破伤风梭菌和诺维梭菌亚单位疫苗，与我国目前商品化的破伤风梭菌和诺维梭菌天然毒素灭活疫苗相比，具有制备工艺简单、免疫剂量低、疫苗效力优良等优点，并大大降低了疫苗生产过程中的生物安全风险，是上述两种梭菌毒素疫苗升级换代的理想候选疫苗抗原；而且在与其它抗原共同制备联苗时，无需增大联苗的使用剂量，即可制备联苗。

公开(公告)号：CN101979503A

公开(公告)日：2011-02-23

申请号：CN201010504371.5

申请日：2010-10-13

申请人： 中国兽医药品监察所

发明人： 丁家波 ,  蒋玉文 ,  赵启祖 ,  宁宜宝 ,  李旭妮 ,  毛开荣 ,  程君生

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/42 ,  C12N15/63 ,  A61K39/295 ,  A61K39/135 ,  A61K39/10 ,  A61P31/04 ,  A61P31/14 ,  C12R1/01

摘要： 本发明涉及表达Asia I型口蹄疫病毒VP1基因的重组布鲁氏菌及其疫苗的生产方法。该重组菌株通过在布鲁氏菌S2株菌基因组中稳定地整合进Asia I口蹄疫病毒(FMDV)江苏株VP1基因，并同时破坏了光滑型布鲁氏菌细胞壁LPS结构中O链形成的条件，使重组菌由光滑型转变为粗糙型，使菌株的安全性进一步提高，但仍保留了对布鲁氏菌病良好的免疫效果，该重组菌被命名为重组布鲁氏菌rS2-JS株。该菌能够表达Asia I FMDV VP1蛋白，并诱导相应抗体产生，对Asia I FMD有良好的基础免疫作用。以此菌株生产疫苗将改变布鲁氏菌疫苗免疫动物与野毒株感染动物难以区分的现状，同时实现了FMD疫苗的细胞免疫，并将为布鲁氏菌病和FMD的防控提供了一种良好的疫苗。

公开(公告)号：CN110075288B

公开(公告)日：2022-04-26

申请号：CN201910370033.8

申请日：2019-05-06

申请人： 中国兽医药品监察所

发明人： 陈小云 ,  薛麒 ,  刘莹 ,  李旭妮 ,  杜吉革 ,  李启红 ,  朱真 ,  张莹辉 ,  印春生 ,  姚文生

IPC分类号： A61K39/08 ,  A61P31/04

摘要： 本发明涉及一种无毒C型肉毒梭菌基因工程亚单位疫苗及其生产方法，本发明制备的无毒性C型肉毒梭菌亚单位疫苗，系采用经过密码子优化、含有麦芽糖蛋白(MBP)标签的肉毒梭菌毒素(BoNTs)重链的无毒区域HC(BoHC)的重组蛋白(rMBP‑BoHC)生产，即最大限度地保证疫苗的安全性，又保持其有效性。同时，还疫苗的抗原能够以可溶的形式表达，因此具有制备工艺简单、免疫剂量低、免疫效力好等优点，是我国现行C型肉毒梭菌疫苗升级换代的理想候选疫苗。

公开(公告)号：CN109943507B

公开(公告)日：2021-08-17

申请号：CN201910230951.0

申请日：2019-03-26

申请人： 中国兽医药品监察所

发明人： 彭小兵 ,  彭国瑞 ,  李旭妮 ,  蒋玉文

IPC分类号： C12N1/20 ,  C12P21/02 ,  C07K14/33 ,  A61K39/08 ,  A61K39/39 ,  A61P31/04 ,  C12R1/145

摘要： 本发明公开了一种兽用A型产气荚膜梭菌类毒素的制备方法及其应用。所述类毒素制备方法如下：将A型产气荚膜梭菌生产菌株接种于培养基中发酵培养，得到发酵产物，然后将发酵产物在L‑赖氨酸、甲醛水溶液和pH6.8下灭活脱毒，灭活脱毒合格的菌液离心上清即为类毒素。所述培养基包括如下物质：酪蛋白胨、酵母浸粉、CaCl2、ZnSO4·7H2O、Na2HPO4·12H2O、KH2PO4、葡萄糖。按本发明方法制备的A型产气荚膜梭菌毒素的毒力最高可提至制苗标准的12.5倍，用其制备的类毒素在家兔上的一免、二免血清中和效价也分别最高可提至传统工艺的4和50倍，血清效价成本比可最高提至传统工艺的48.8、1216.4倍。

公开(公告)号：CN109942718B

公开(公告)日：2020-12-25

申请号：CN201910352909.6

申请日：2019-04-29

申请人： 中国兽医药品监察所

发明人： 杜吉革 ,  刘莹 ,  王磊 ,  陈小云 ,  李旭妮 ,  李启红 ,  朱真 ,  薛麒 ,  张莹辉 ,  姚文生 ,  印春生

IPC分类号： C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  A61K39/116 ,  A61K39/114 ,  A61P31/04 ,  C12R1/19

摘要： 本发明涉及一种无毒性破伤风毒素和产气荚膜梭菌β毒素重组融合蛋白。本发明系采用经过密码子优化、破伤风梭菌毒素C片段与含有多个氨基酸突变的产气荚膜梭菌β毒素突变体的重组融合蛋白，即最大限度地保留两种毒素蛋白的免疫原性，又避免了单个氨基酸突变带来的生物安全隐患。该重组融合蛋白可用来制备破伤风梭菌、B型产气荚膜梭菌和C型产气荚膜梭菌的单位疫苗，与我国目前商品化的梭菌类天然毒素灭活疫苗相比，具有制备工艺简单、免疫剂量低、疫苗效力优良等优点，并大大降低了疫苗生产过程中的生物安全风险，是上述三种梭菌毒素疫苗升级换代的理想候选疫苗抗原；而且在与其它抗原共同制备联苗时，无需增大联苗的使用剂量，即可制备联苗。

公开(公告)号：CN108342434A

公开(公告)日：2018-07-31

申请号：CN201810115846.8

申请日：2018-02-06

申请人： 中国兽医药品监察所

发明人： 蒋玉文 ,  彭小兵 ,  李旭妮 ,  彭国瑞

IPC分类号： C12P21/00 ,  C12N1/20 ,  A61K39/08 ,  A61P31/04 ,  C12R1/145

摘要： 本发明公开了一种兽用腐败梭菌毒素及其制备方法与专用培养基。每100ml培养基由下述物质组成：示蛋白胨(proteose peptone)1.5-2.0g，酪蛋白胨1.5-2.0g，酵母浸粉0.5-0.75g，ZnSO4·7H2O 0.14-0.28mg，Na2HPO4·12H2O 0.5-0.75g，KH2PO40.03-0.045g，葡萄糖1-1.5g，余量为水；所述培养基的pH值为7.5-8.0。所述腐败梭菌毒素是将腐败梭菌生产菌株接种于培养基中，收集培养物并离心，将上清液过滤即得。按本发明方法毒力最高可提至《中国兽用生物制品规程》制苗标准的10倍，产出投入比可提高至原传统工艺的20倍。并且，用其制备的类毒素疫苗在家兔和绵羊上的相应血清中和效价也分别提高至规程标准的8和8倍。