表达两种外源基因的重组火鸡疱疹病毒HVT-H9-IBD及其应用

    公开(公告)号:CN118879643A

    公开(公告)日:2024-11-01

    申请号:CN202410395561.X

    申请日:2024-04-02

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了表达两种外源基因的重组火鸡疱疹病毒HVT‑H9‑IBD,于火鸡疱疹病毒的UL区的HVT053位点和HVT054位点之间和HVT065位点和HVT066位点之间分别插入目标基因1和目标基因2;或,于火鸡疱疹病毒的UL区的HVT053位点和HVT054位点之间和HVT087位点和HVT088位点之间分别插入目标基因1和目标基因2;所述目标基因1为带有CMV启动子和bgH终止子的HA基因,所述目标基因2为带有mCMV启动子和SV40终止子的VP2基因;分别得到重组病毒1和重组病毒2。两株表达两种外源基因的重组火鸡疱疹病毒HVT‑H9‑IBD在体外能够生长复制并稳定遗传,对H9N2亚型禽流感和nVarIBDV提供良好的免疫保护效果。同时,本发明还提供该重组火鸡疱疹病毒的用途。

    一种表达新冠病毒Spike蛋白重组副流感病毒5型制备和应用

    公开(公告)号:CN113073116A

    公开(公告)日:2021-07-06

    申请号:CN202110362266.0

    申请日:2021-04-02

    Abstract: 本发明提供一种表达冠状病毒Spike蛋白的重组副流感病毒5型载体,所述重组副流感病毒5型载体包含一种副流感病毒5型基因组,所述基因组包含冠状病毒Spike蛋白突变体的编码序列;所述冠状病毒Spike蛋白突变体的编码序列不含有副黏病毒转录终止序列,且冠状病毒Spike蛋白突变体的氨基酸序列上不含有Furin蛋白酶裂解位点。结果表明,免疫重组病毒rPIV5‑SH‑Spike组小鼠体内产生抗体针对新冠病毒Spike蛋白的特异性抗体,而rPIV5对照组小鼠未能检测到针对新冠病毒Spike蛋白的特异性抗体。表明rPIV5‑SH‑Spike重组病毒免疫小鼠能够刺激小鼠产生针对Spike蛋白的特异性抗体。

    流感病毒基质蛋白M1的单克隆抗体及其应用

    公开(公告)号:CN110627901B

    公开(公告)日:2021-02-23

    申请号:CN201910912806.0

    申请日:2019-09-25

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及流感病毒基质蛋白M1的单克隆抗体及其应用。本发明提供流感病毒基质蛋白M1的单克隆抗体,所述单克隆抗体包含重链可变区和轻链可变区,所述重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1‑3所示;所述轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.4‑6所示。该单克隆抗体能够特异识别并结合多种亚型的流感病毒基质蛋白M1、在流感病毒亚型间具有广谱适用性,同时具有较高的特异性和敏感性,可以很好地应用于免疫印迹实验、间接免疫荧光实验以及免疫沉淀等技术,具有较高的应用价值。

    一种检测H7N9亚型禽流感病毒基因组包装变异的实时荧光绝对定量RT-PCR方法

    公开(公告)号:CN111088397A

    公开(公告)日:2020-05-01

    申请号:CN201911303737.X

    申请日:2019-12-17

    Abstract: 本发明涉及病毒检测技术领域,具体涉及一种检测H7N9亚型禽流感病毒基因组包装变异的实时荧光绝对定量RT-PCR方法。本发明提供分别针对HA、NA、PB2、PB1、PA、NP、M、NS基因的高度保守区的特异性引物对,利用这些特异性引物对进行实时荧光定量RT-PCR检测H7N9亚型流感病毒基因组中HA、NA、PB2、PB1、PA、NP、M、NS基因的拷贝数,进而检测H7N9亚型流感病毒的基因组包装变异。该方法具有特异性高、灵敏度高、准确性高、检测时间较短,成本低等优势,能够对病毒滴度较低的临床样品做出准确诊断,适用于H7N9亚型禽流感病毒的临床诊断和流行病控制。

    辅助鉴定H9亚型禽流感病毒和鸡传染性支气管炎病毒的引物组合物及其应用

    公开(公告)号:CN104232624B

    公开(公告)日:2017-03-29

    申请号:CN201310230937.3

    申请日:2013-06-09

    Abstract: 本发明公开了一种辅助鉴定H9亚型禽流感病毒和鸡传染性支气管炎病毒的引物组合物及其应用。本发明提供的特异引物对,由序列表的序列3所示单链DNA分子和序列表的序列4所示单链DNA分子组成。本发明还保护一种引物组合物,由引物对甲和所述特异引物对组成;所述引物对甲由序列表的序列1所示单链DNA分子和序列表的序列2所示单链DNA分子组成。本发明提供的特异引物对可鉴定鸡传染性支气管炎病毒,本发明提供的引物组合物结合双重RT-PCR可同时鉴定鸡传染性支气管炎病毒和H9亚型禽流感病毒,均具有灵敏度高、特异性强、普适性强、所需时间短、成本低等优点,可以对多种临床样本进行检测,操作简单、容易推广,便于基层操作和应用。

    一种检测不同流感病毒的引物组合物及其应用

    公开(公告)号:CN104131009B

    公开(公告)日:2016-09-14

    申请号:CN201410363681.8

    申请日:2014-07-28

    Abstract: 本发明公开了一种检测不同流感病毒的引物组合物及其应用。本发明公开的一组引物组合物,由如下(1)‑(4)任意所示的引物对组成:(1)SEQ ID No.1所示的DNA分子和SEQ ID No.2所示的DNA分子;(2)SEQ ID No.3所示的DNA分子和SEQ ID No.4所示的DNA分子;(3)SEQ ID No.5所示的DNA分子和SEQ ID No.6所示的DNA分子;(4)SEQ ID No.7所示的DNA分子和SEQ ID No.8所示的DNA分子。本发明对及时诊断、及时治疗发病犬,及时预测流行趋势,预防流感大流行,以及开展大规模犬流感病毒的流行病学监测有着积极的意义。

    鉴定新城疫病毒和多亚型禽流感病毒的引物对及其应用

    公开(公告)号:CN102321769B

    公开(公告)日:2013-05-29

    申请号:CN201110303463.1

    申请日:2011-10-09

    Abstract: 本发明公开了一种鉴定新城疫病毒和多亚型禽流感病毒的引物对及其应用。本发明提供的PCR引物对组合物由引物对NDV、引物对H3V、引物对H5V和引物对H9V组成;该PCR引物对组合物可用于制备诊断或辅助诊断新城疫和禽流感试剂,或制备鉴定或辅助鉴定新城疫病毒和多亚型禽流感病毒试剂。使用本发明所提供的PCR引物对组合物同时检测新城疫病毒、H3、H5和H9亚型禽流感病毒的特异性强,灵敏度分别为1EID50/100μl、1EID50/100μl、1×10-2EID50/100μl和1EID50/100μl,与病毒分离和血凝抑制实验等常规实验方法的鉴定结果相比,符合率达100%,适合开发相应的多重RT-PCR试剂盒,以用于新城疫和禽流感的临床诊断和流行病控制。

    双表达盒的表达载体及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN101463361B

    公开(公告)日:2011-07-20

    申请号:CN200910076381.0

    申请日:2009-01-14

    Abstract: 本发明公开了一种双表达盒的表达载体及其制备方法与应用。该表达载体是一种环状载体,包含原核复制起点、两个真核复制起点、筛选标记基因和两个外源基因表达盒;所述两个外源基因表达盒分别为外源基因表达盒1和外源基因表达盒2;所述外源基因表达盒1自上游至下游依次含有两个转录方向相同的启动子、连接片段1和多聚腺苷酸加尾信号,所述连接片段1含有EcoRV识别序列;所述外源基因表达盒2自上游至下游依次含有两个转录方向相同的启动子、连接片段2和多聚腺苷酸加尾信号,所述连接片段2含有StuI识别序列。本发明的pDP-EX-vector含有两个外源基因表达盒、两个真核复制起点,可以在表达T抗原的细胞中大量增值,从而提高蛋白表达的水平,具有很好的应用前景。

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