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公开(公告)号：CN117551729A
公开(公告)日：2024-02-13
申请号：CN202311462776.0
申请日：2023-11-06
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明公开了一种通过MSTN和FGF5双基因编辑抑制绵羊成肌细胞二次融合的方法与应用。本发明提供了对MSTN和FGF5进行基因编辑的物质在如下任一种的应用：1)抑制成肌细胞的二次融合；2)降低肌管融合指数；3)降低单个肌管中的细胞核数；4)抑制骨骼肌卫星细胞中胞内Ca2+的释放；本发明提供了MSTN和FGF5双基因编辑绵羊骨骼肌卫星细胞，将其诱导分化，发现MSTN和FGF5双基因编辑抑制绵羊成肌细胞二次融合，MSTN和FGF5可以作为筛选抑制绵羊成肌细胞二次融合物质的作用靶点，在实践中用于提高动物产肉性能，为优质高产肉羊新品种的快速培育和肉质改良提供理论参考。
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公开(公告)号：CN111793654A
公开(公告)日：2020-10-20
申请号：CN201910277213.1
申请日：2019-04-08
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12N15/90 , C12N15/10 , A01K67/027
摘要： 本发明涉及基因工程和分子遗传育种技术领域，具体涉及一种提高CRISPR/Cas9介导的双等位基因突变效率的方法及其应用。本发明提供的CRISPR/Cas9基因编辑方法包括向原核期胚胎中导入基因编辑核酸的步骤，所述基因编辑核酸包括Cas9 mRNA和sgRNA；所述基因编辑核酸中，所述Cas9 mRNA和sgRNA的摩尔浓度比例为1：10～1：20。本发明提供的基因编辑方法，显著提高了双等位基因突变的效率，进而有效降低了基因编辑嵌合个体的比例，提高了双等位基因突变个体的比例，对于目标性状动物的构建和遗传育种具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN111793123A
公开(公告)日：2020-10-20
申请号：CN201910277191.9
申请日：2019-04-08
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C07K14/475 , C12N15/12 , C12Q1/6888
摘要： 本发明涉及基因工程及遗传育种技术领域，具体涉及一种肌肉生长抑制素MSTN的突变体及其应用。本发明提供的MSTN蛋白突变体，具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。所述突变体能够明显促进动物的骨骼肌的生长发育，携带本发明所述的MSTN突变体的动物的肌纤维密度显著提高，动物表现明显的双肌臀性状，产肉量也可随之增加。本发明提供的MSTN蛋白突变体及其编码基因可在实践中用于制备双肌臀表型动物模型或用于双臀肌性状动物的遗传育种。
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公开(公告)号：CN117025602A
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202310964623.X
申请日：2023-08-02
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/867 , C12N5/077 , C12N5/10
摘要： 本发明公开了一种lncRNA促进绵羊骨骼肌卫星细胞增殖和成肌分化的方法与应用。本发明发现了一个新的绵羊lncRNA lnc522，并发现了其在绵羊骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化中的作用。通过使用慢病毒过表达lnc522可显著促进绵羊骨骼肌卫星细胞的增殖和成肌分化。本发明提供的lnc522对骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化的作用，可在实践中用于构建动物模型或用于提高动物产肉性能，为优质高产肉牛新品种的快速培育和肉质改良提供理论参考。
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公开(公告)号：CN116103342A
公开(公告)日：2023-05-12
申请号：CN202211612527.0
申请日：2022-12-14
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12N15/85 , C12N15/113 , C12N15/90 , C12Q1/6888 , C12Q1/6897 , C12N15/11
摘要： 本发明公开了基于CRISPR‑Cas9系统和PB转座子系统的羊早期胚胎发育的谱系示踪方法，具体是CRISPR‑Cas9介导的羊Rosa26基因敲除和定点插入Cas9‑T2A‑EGFP基因的方法，用来对合成靶DNA进行编辑。本发明还提供由合成靶DNA介导的谱系示踪载体。该载体包含40种整合条码和合成靶DNA及相应的三个独立转录sgRNA。该合成靶DNA嵌入在表达红色荧光蛋白tdTomato的PB转座子载体上。此系统能够产生大量的可遗传修复结果，并可通过整合条形码对这些序列进行区分。该谱系示踪载体体系可直接转染目标细胞，随着发育对目标细胞进行追踪，提供反刍动物发育的综合分子细胞图谱，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN108441519A
公开(公告)日：2018-08-24
申请号：CN201810191682.7
申请日：2018-03-08
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12N15/90
摘要： 本发明提供一种在CRISPR/CAS9基因编辑中提高同源修复效率的新方法，其是利用CRISPR/CAS9系统进行基因编辑，通过将MTR值控制在1×105-5×105的范围内，来提高同源修复效率。其中，所述MTR值为待敲入的外源基因DNA的摩尔数与待打靶基因摩尔数的比值。本发明依据细胞自身的同源修复机制和细胞周期特点，在基因编辑过程中通过增加修复模板DNA的用量，为基因准确修复提供丰富的模板，进而减少非同源末端连接的比例，使得修复的平衡更倾向于同源修复。本方法可使体外培养体细胞的基因修复效率提升到90％以上，比国际现行方法高出30％，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN106947779B
公开(公告)日：2021-02-26
申请号：CN201710113626.7
申请日：2017-02-28
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12N15/90 , C12N9/22 , A01K67/027
摘要： 本发明提供一种利用乳腺生物反应器提高乳汁中褪黑素含量的方法，其是将褪黑素关键合成酶AANAT和HIOMT基因的cDNA序列连接酪蛋白启动子，通过高效的CRISPR/Cas9系统，整合到羊的染色体基因中，通过乳腺反应器表达酶AANAT和HIOMT，从而在乳腺中合成天然褪黑素。转基因羊乳腺反应器具有较高的重组褪黑素合成酶表达水平，并且能够提高乳汁中褪黑素含量。
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公开(公告)号：CN111793606A
公开(公告)日：2020-10-20
申请号：CN201910277216.5
申请日：2019-04-08
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种提高CRISPR/Cas9介导的同源修复效率的方法。本发明提供一种转染后培养基因编辑细胞的细胞培养液，所述培养液包含基础培养液和p53蛋白小分子激动剂；所述p53蛋白小分子激动剂包括RITA、CTX1、Nutlin-3中的一种或多种。本发明还提供利用所述培养液提高基因编辑的同源修复效率的方法。通过在转染后培养基因编辑细胞的细胞培养液中添加p53蛋白的小分子激动剂，极大地提高了基因编辑过程的同源修复效率，进而提高了基因编辑效率，有效降低了阳性细胞的筛选工作量，同时具有操作简便、成本低等优势，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN106652998A
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201710000708.0
申请日：2017-01-03
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： G10L13/047
摘要： 本发明提供一种基于FFT短时傅里叶算法的语音综合电路实现结构。实现语音信号的实时综合。本发明的电路及方法采用一种基于FFT的短时傅里叶算法原理，电路模块工作在并行方式下，能够相互配合实现流水线并行工作，从而提高数据吞吐率,降低处理时延，快速实现语音信号的时域重建。在满足实时地将频谱数据转换成时域数据，并完成语音信号实时综合的前提下，根据不同模块的工作频率需求不相同，可以配置不同的时钟频率，达到最佳的工作频率配置，这样既提高了硬件资源的利用率又有效降低了系统功耗。
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公开(公告)号：CN116656603A
公开(公告)日：2023-08-29
申请号：CN202310725156.5
申请日：2023-06-19
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12N5/077 , C12N5/071 , C12N15/113 , C12N15/85 , A01K67/027
摘要： 本发明公开了一种通过抑制FOSL1表达和活性促进绵羊骨骼肌卫星细胞成肌分化的方法与应用。本发明提供了抑制FOSL1基因表达的物质在如下任一中的应用：促进人或动物骨骼肌卫星细胞成肌分化；促进人或动物骨骼肌卫星细胞向肌管细胞分化；构建人或动物骨骼肌卫星细胞成肌分化细胞模型；提高动物产肉性能。本发明发现了FOSL1的表达和活性在绵羊骨骼肌卫星细胞成肌分化中的作用，可在实践中用于构建动物模型或用于提高动物产肉性能。
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