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公开(公告)号：CN110295197B
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN201910603170.1
申请日：2019-07-05
IPC分类号： C12N15/866 , C07K14/10 , A61K39/12 , A61P31/14
摘要： 本发明提供了一种重组表达载体、制备得到的III型鸭甲型肝炎病毒样颗粒、制备方法及应用，包含III型鸭甲型肝炎病毒结构蛋白前体基因P1和蛋白水解酶基因3C；所述结构蛋白前体基因P1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述蛋白水解酶基因3C的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。经过密码子优化的基因在昆虫细胞中表达水平明显提高，可获得具有较好空间构型的蛋白，在胞内自发组装成病毒样颗粒(VLPs)，够获得高纯度、形态均一、性状稳定的病毒颗粒。
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公开(公告)号：CN108546302B
公开(公告)日：2022-06-10
申请号：CN201810394542.X
申请日：2018-04-27
摘要： 本发明涉及一种复合多表位表达盒、其组成的重组病毒及应用，尤其涉及一种新城疫病毒插入IBV表位盒嵌合重组病毒和采用这个病毒制备的疫苗，所述表达盒包含有：(a)来源于鸡传染性支气管炎病毒Holte株和鸡传染性支气管炎病毒QX样株的S1蛋白的T细胞表位；(b)来源于鸡传染性支气管炎病毒澳大利亚T株的S1蛋白的B细胞表位。本发明将鸡传染性支气管炎病毒的多表位嵌合S‑T/B基因插入至LaSota株的骨架中，使得LaSota株可以表达S1‑T/B蛋白，可达到同时预防ND和IB两种疫病的目的，且T细胞表位和B细胞表位协同增效，使得病毒免疫时间更早，免疫反应更全面。
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公开(公告)号：CN111534529A
公开(公告)日：2020-08-14
申请号：CN202010387557.0
申请日：2020-05-09
IPC分类号： C12N15/62 , C12N9/02 , C12N15/867 , C12N5/10 , G01N33/68 , G01N33/569
摘要： 本发明提供了一种报告基因细胞株及其构建方法和应用，所述报告基因细胞株的基因组中整合有嵌合基因，所述嵌合基因包括IFN-β启动子和报告基因；所述报告基因为分泌性荧光素酶基因。本发明构建的报告基因细胞株可以将荧光素酶分泌到细胞外，为检测IFN通路激活提供了简易手段，为进一步研究病毒诱导IFN-β的转录、调控，动态监测IFN-β启动子活性奠定了基础。
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公开(公告)号：CN118909954A
公开(公告)日：2024-11-08
申请号：CN202411230974.9
申请日：2024-09-04
摘要： 本发明提供一种稳定表达人源TMEM135基因的MDCK细胞系及其构建方法和应用，所述细胞株为犬肾细胞MDCK‑homoTMEM135，其培养物保藏编号为:CCTCC NO：C2024260，所述MDCK细胞系中含有人源TMEM135基因，可加快宿主细胞内胆固醇的转运，促进甲型流感病毒的内体逃逸，提高甲型流感病毒在感染宿主细胞后产生的病毒滴度。所述稳定表达人源TMEM135基因的MDCK细胞系的构建方法，通过先扩增人源TMEM135基因并构建稳表达载体，之后将所述稳表达载体与pxPAX2、pMD2G质粒共转染至293T细胞，孵育产生包装好的慢病毒；最后用包装好的慢病毒感染MDCK细胞后，进行嘌呤霉素药物筛选并扩大培养，即得所述稳定表达人源TMEM135基因的MDCK细胞系。
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公开(公告)号：CN113730428A
公开(公告)日：2021-12-03
申请号：CN202111164732.0
申请日：2021-09-30
IPC分类号： A61K31/7088 , A61P31/14 , C12N15/113
摘要： 本发明公开了一种治疗新城疫病毒感染的药物及其应用。所述药物包括长链非编码RNA lnc_000710，所述长链非编码RNA lnc_000710的核酸序列包括SEQ ID NO.1所示的序列。本发明首次发现长链非编码RNA lnc_000710与新城疫病毒复制有关，抑制lnc_000710的表达可以促进新城疫病毒复制，即lnc_000710能够抑制新城疫病毒复制，为开发治疗新城疫病毒感染药物及研究新城疫病毒复制提供新的思路和方法。
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公开(公告)号：CN110093319A
公开(公告)日：2019-08-06
申请号：CN201910426100.3
申请日：2019-05-21
IPC分类号： C12N5/10 , C12N15/867 , C12Q1/02
摘要： 本发明涉及一种实时指示凋亡水平的稳转细胞系及其构建方法和应用，所述细胞系含有线性多肽DnaEC-Fluc-C-DEVD-Fluc-N-DnaEN-PEST，且在Fluc-C-DEVD-Fluc-N的两端带有NotⅠ和XbaⅠ酶切位点。所述构建方法包括以下步骤：构建含有线性多肽的质粒；包装慢病毒；再感染宿主细胞，进行药物筛选、亚克隆培养。本发明选用萤火虫荧光素酶作为报告基因用以构建含有Caspase-3识别基序DEVD的稳转细胞系。当凋亡现象发生，DEVD被剪切出来，萤火虫荧光素酶基因的N、C端相互靠近激活发出荧光从而判定凋亡情况。该方法灵敏度高、操作简便且省时高效，有望成为筛选抗肿瘤药物的新方法。
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公开(公告)号：CN110093318A
公开(公告)日：2019-08-06
申请号：CN201910344592.1
申请日：2019-04-26
IPC分类号： C12N5/10 , C12N15/867 , C12N7/00 , C12R1/91
摘要： 本发明涉及一种稳定表达仓鼠TIGAR基因的BHK细胞系及其构建方法和应用，该细胞系含有TIGAR基因，保藏号为CCTCC NO:C201928。通过先扩增仓鼠TIGAR基因并构建质粒；再将构建的质粒与PAX、PMD2G质粒同时转入293T细胞，形成包装好的慢病毒；将其感染BHK细胞后，进行药物筛选，然后扩大培养，即得所述细胞系。该细胞系可增加细胞抗凋亡能力，从而延长细胞存活时间，提高新城疫在细胞中的病毒滴度；并成功构建筛选适合新城疫病毒繁殖的高产细胞株。
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公开(公告)号：CN117004580A
公开(公告)日：2023-11-07
申请号：CN202310818303.3
申请日：2023-07-05
摘要： 本发明提供了一株QX样传染性支气管炎病毒rH120‑QX(mS)的反向遗传操作方法和应用。首先构建涵盖H120毒株全基因组五个质粒和QX样传染性支气管炎病毒S基因质粒，再对QX S基因质粒突变成为含有Furin‑S2'酶切位点。通过体外连接获得rH120‑QX(mS)全长cDNA，经体外转录成基因组RNA和N的转录本，一起电击转染到BHK‑21细胞。转染2天后收集上清接种到10日龄SPF鸡胚尿囊液中，获得重组毒株rH120‑QX(mS)。本发明提供了有效的反向遗传操作系统，且该重组病毒可作为研究S蛋白Furin‑S2'酶切位点对冠状病毒的组织嗜性和致病性的模式病毒。
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公开(公告)号：CN112342244B
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202011211170.6
申请日：2020-11-03
摘要： 本发明提供了一种表达Furin蛋白的细胞株及其在禽传染性支气管炎病毒培养中的应用，所述表达Furin蛋白的细胞株为基因组中整合有鸡源Furin基因的哺乳动物细胞，所述鸡源Furin基因通过慢病毒导入哺乳动物细胞。本发明的表达Furin蛋白的细胞株可用于多株IBV的体外培养，克服了现有技术中大多数IBV毒株无法在哺乳动物细胞内生长的技术难题，简化了病毒的扩繁过程，也消除了可能因感染其他禽类而带来的生物隐患，在基础研究及疫苗研发中具有广泛的应用价值。
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公开(公告)号：CN108329386B
公开(公告)日：2021-08-03
申请号：CN201810367202.8
申请日：2018-04-23
摘要： 本发明涉及一种鹅源线粒体抗病毒信号蛋白及其应用，具体涉及一种具有抗病毒和免疫激活功能的鹅源线粒体抗病毒信号蛋白及其应用，所述信号蛋白包括活性区域、脯氨酸富集区、结构域A、结构域B或跨膜区中的任意一种或至少两种的组合。该鹅源线粒体抗病毒信号蛋白能够在原代鹅胚成纤维细胞中诱导高水平的先天性抗病毒反应，并能够抑制新城疫病毒的早期复制。
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