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公开(公告)号：CN117126871A
公开(公告)日：2023-11-28
申请号：CN202211569360.4
申请日：2022-12-07
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明提供了弓形虫弱毒株PruΔpp2a‑b的构建方法及其应用，属于生物医药技术领域。本发明通过敲除TgPP2A‑B基因，获得了TgPP2A‑B基因缺失的弓形虫弱毒株，缺失该基因后大量淀粉颗粒在虫体间聚集，且弓形虫丧失形成包囊的能力；TgPP2A‑B基因缺失的弓形虫弱毒株体外增殖速度和致病性较野生株均显著降低；感染TgPP2A‑B基因缺失株后小鼠既不发病也不死亡，在小鼠脑组织中检测不到包囊，对宿主具有较高的安全性；TgPP2A‑B基因缺失的弓形虫弱毒株免疫小鼠后，小鼠的抗体水平显著提高，对高剂量的弓形虫RH速殖子和Pru包囊再次感染均能够提供显著免疫保护效力，可预防弓形虫的再次感染。
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公开(公告)号：CN110898216B
公开(公告)日：2021-12-03
申请号：CN201911412380.9
申请日：2019-12-31
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明提供了重组旋毛虫硫氧还蛋白过氧化物酶2在制备抗旋毛虫感染疫苗中的应用，属于免疫调节技术领域，所述重组旋毛虫硫氧还蛋白过氧化物酶2能够诱导小鼠机体产生Th2型免疫应答，诱导小鼠的CD4+T细胞的增殖以及巨噬细胞转化成M2型；而上述这些免疫应答反应在抗旋毛虫感染过程中发挥主要作用；因此，重组旋毛虫硫氧还蛋白过氧化物酶2作为抗原分子，能够用于制备抗旋毛虫感染疫苗。
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公开(公告)号：CN106755458B
公开(公告)日：2020-04-03
申请号：CN201710013354.3
申请日：2017-01-09
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C12Q1/6888
摘要： 本发明公开了用于检测和区分多种以犬为终末宿主的常见大中型绦虫的检测试剂盒，包括有四对特异引物，分别为泡状带绦虫特异性引物对，多头带绦虫特异性引物对，豆状带绦虫特异性引物对，犬复孔绦虫特异性引物对。本发明的有益效果为：本发明提供的检测试剂盒，不仅能够确定被检样品是否被感染，而且能够确定感染了四种寄生虫中的具体虫种种类，其既可以用于中间宿主感染病料的检测，也可以用于终末宿主的感染检测，而且能对终末宿主可能的混合感染进行检测。经过对比验证，本发明的四对引物同时在一个PCR反应体系内使用而互不干扰，表明其具有高效性、系统性和经济简便性，适用于临床和实验室进行快速准确的病原学鉴定。
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公开(公告)号：CN108088988B
公开(公告)日：2019-10-11
申请号：CN201711297851.7
申请日：2017-12-08
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： G01N33/53
摘要： 本发明公开了一种多肽抗原检测猪旋毛虫抗体的试剂盒及其检测方法，所述试剂盒包括多肽抗原、包被液、多肽抗原包被的酶标板、抗体稀释液、PBST洗涤液、阳性血清、阴性血清、封闭液、用辣根过氧化物酶标记的兔抗猪IgG二抗、底物显色液TMB、终止液，所述特异性多肽抗原为：TEp1，序列为：SWDEVFDEAHTKRKKGGGGSGGGGSFDE AHTKRKKFYPTPGGGGSGGGGTKRKKFYPTPHSSIKGQGQGQGFYPTPHSSIKIPMMT。本发明设计的多肽抗原检测猪旋毛虫抗体的试剂盒，其操作方法简单，检测速度快，利用TEp1多肽抗原作为包被抗原，与目标抗体的结合效率高，特异性好，TEp1多肽抗原制备方法和成分简单，降低了猪旋毛虫检测的成本。
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公开(公告)号：CN103243105B
公开(公告)日：2018-11-02
申请号：CN201310184056.2
申请日：2013-05-19
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明公开一种重组蛋白的制备方法，特别是一种TsSerpin重组蛋白，以及这种蛋白和它的用途。本发明的TsSerpin重组蛋白的制备方法是：以猪旋毛虫肌幼虫中提取总RNA为模板，以Oligo(dT)18 Primer为引物进行反转录；再用上述所得到的反转录cDNA为模板，用SEQ ID №1和SEQ ID №2为引物进行PCR扩增，得到猪旋毛虫TsSerpin基因；再经构建重组质粒、转化大肠杆菌等处理得到目标蛋白。本发明的重组蛋白可用于制备检测旋毛虫病的抗原。
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公开(公告)号：CN108220461A
公开(公告)日：2018-06-29
申请号：CN201810085551.0
申请日：2018-01-29
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/01
摘要： 本发明提供了一种基于重组酶聚合酶扩增方法检测布鲁氏菌的引物、探针和试剂盒，属于微生物诊断技术领域。本发明提供的基于重组酶聚合酶扩增方法检测布鲁氏菌的引物对和探针是以羊布鲁氏菌pb26基因序列的特异性保守区域为模板设计得到。将本发明提供的试剂盒利用重组酶聚合酶扩增方法检测布鲁氏菌的pb26基因时，检测灵敏度达到6CFU。同时本发明提供的引物对检测布鲁氏菌具有较强的特异性。
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公开(公告)号：CN105153287B
公开(公告)日：2018-05-08
申请号：CN201510405279.6
申请日：2015-07-13
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C07K14/00 , C12Q1/6888 , C12N15/11 , C12N15/70 , G01N33/68
摘要： 本发明公开了一种用于诊断羊脑多头蚴病的重组蛋白，其氨基酸序列为SEQ ID No.1，基因序列SEQ ID No.2，其保藏号为M2015388；同时公开了合成该重组蛋白的上下游引物SEQ ID No.3和SEQ ID No.4以及合成该重组蛋白的制备方法。通过west‑blotern及ELISA检测发现该重组蛋白对羊脑多头蚴感染血清反应明显，表明这种重组蛋白对羊脑多头蚴病具有诊断价值。
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公开(公告)号：CN103243105A
公开(公告)日：2013-08-14
申请号：CN201310184056.2
申请日：2013-05-19
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明公开一种重组蛋白的制备方法，特别是一种TsSerpin重组蛋白，以及这种蛋白和它的用途。本发明的TsSerpin重组蛋白的制备方法是：以猪旋毛虫肌幼虫中提取总RNA为模板，以Oligo(dT)18Primer为引物进行反转录；再用上述所得到的反转录cDNA为模板，用SEQID№1和SEQID№2为引物进行PCR扩增，得到猪旋毛虫TsSerpin基因；再经构建重组质粒、转化大肠杆菌等处理得到目标蛋白。本发明的重组蛋白可用于制备检测旋毛虫病的抗原。
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公开(公告)号：CN118006605A
公开(公告)日：2024-05-10
申请号：CN202410104950.2
申请日：2024-01-25
IPC分类号： C12N15/113 , C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12N15/11
摘要： 本发明提供了一种基于RAA结合CRISPR‑Cas12a检测棘球绦虫用crRNA及其试剂盒和应用，属于医学检测技术领域。一种基于RAA结合CRISPR‑Cas12a检测棘球绦虫用crRNA，核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还提供了一种检测试剂盒，包括所述crRNA、Cas12a、ssDNA‑FQ和RAA扩增用引物。本发明提供的试剂盒具有良好的检测特异性和较高的灵敏度，与PCR扩增方法相比，具有较明显的优势，为临床检测细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫的感染提供了新手段。
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公开(公告)号：CN116656499A
公开(公告)日：2023-08-29
申请号：CN202310651884.6
申请日：2023-06-02
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
摘要： 本发明提供了一种基于流式细胞技术分离单个球虫卵囊的方法,属于生物技术领域。本发明确定了针对球虫卵囊单个分离的参数，在流式细胞仪从细胞群中高速分选出被指定的细胞，具有分选准确度高、分选速度快等优点。其分选时间较短，且分选得到的细胞活性良好，它可以精准的将细胞分选至培养皿、细胞培养板及细胞管中。尤其是利用流式细胞仪分选单个细胞至96孔板中，很好地简化了分选单个细胞过程。从样品制备到仪器操作分选入96孔板，全程仅需要1h，操作简便。
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