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公开(公告)号:CN103215231B
公开(公告)日:2014-01-22
申请号:CN201310115921.8
申请日:2013-04-03
申请人: 中国农业科学院油料作物研究所
IPC分类号: C12N5/20 , C07K16/14 , G01N33/577 , C12R1/91
摘要: 本发明提供了杂交瘤细胞株1H2、其产生的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体及其在免疫层析时中应用。杂交瘤细胞株1H2,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO.C201329。杂交瘤细胞株1H2可以用于制备高效价抗赭曲霉毒素A单克隆抗体,采用鼠腹水抗体酶联免疫吸附分析(ELISA)法测得的效价可达7.2×105。该抗赭曲霉毒素A单克隆抗体灵敏度高,对赭曲霉毒素A的50%抑制浓度IC50为52pg/mL,与赭曲霉毒素B,黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2,呕吐毒素,玉米赤霉烯酮,伏马毒素的交叉反应率均小于0.1%,可用于赭曲霉毒素A含量的快速测定。
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公开(公告)号:CN103869065A
公开(公告)日:2014-06-18
申请号:CN201410121748.7
申请日:2014-03-28
申请人: 中国农业科学院油料作物研究所
IPC分类号: G01N33/569 , G01N33/544 , G01N33/531
CPC分类号: G01N30/48 , G01N33/54346 , G01N2030/486 , B01J20/24 , B01J20/281 , B01J20/3071 , C07K16/14 , C12N15/70 , G01N1/34
摘要: 本发明涉及黄曲霉毒素M1纳米抗体免疫吸附剂、免疫亲和柱及其制备方法和应用。本发明免疫吸附剂包括固相载体和与该固相载体偶联的黄曲霉毒素M1纳米抗体2014AFM-G2,所述黄曲霉毒素M1纳米抗体2014AFM-G2对黄曲霉毒素M1的50%抑制浓度IC50为0.208ng/mL,与黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2交叉反应率分别为9.43%、5.93%、4.87%和6.17%;其氨基酸序列如SEQ?ID?NO:7所示,编码基因序列如SEQ?ID?NO:8所示,本发明黄曲霉毒素纳米抗体免疫亲和柱可用于净化与浓缩上机检测前样品提取液,且该免疫亲和柱可以多次重复使用。
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公开(公告)号:CN103232975A
公开(公告)日:2013-08-07
申请号:CN201310115825.3
申请日:2013-04-03
申请人: 中国农业科学院油料作物研究所
IPC分类号: C12N5/20 , C07K16/14 , G01N33/577 , C12R1/91
摘要: 本发明提供了杂交瘤细胞株2D3、其分泌产生的抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体及其应用。杂交瘤细胞株2D3,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO.C201328。杂交瘤细胞株2D3可以用于制备高效价抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体,鼠腹水经纯化制得的抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体用酶联免疫吸附分析法(ELISA)测得的效价可达1.5×105。该抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体灵敏度高,对玉米赤霉烯酮的50%抑制浓度IC50为20pg/mL,与β-玉米赤霉烯醇,α-玉米赤霉烯醇,β-玉米赤霉醇的交叉反应分别为84.9%,3.3%,3.2%。可用于玉米赤霉烯酮含量的测定。
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公开(公告)号:CN103869065B
公开(公告)日:2015-03-11
申请号:CN201410121748.7
申请日:2014-03-28
申请人: 中国农业科学院油料作物研究所
IPC分类号: G01N33/569 , G01N33/544 , G01N33/531
CPC分类号: G01N30/48 , G01N33/54346 , G01N2030/486
摘要: 本发明涉及黄曲霉毒素M1纳米抗体免疫吸附剂、免疫亲和柱及其制备方法和应用。本发明免疫吸附剂包括固相载体和与该固相载体偶联的黄曲霉毒素M1纳米抗体2014AFM-G2,所述黄曲霉毒素M1纳米抗体2014AFM-G2对黄曲霉毒素M1的50%抑制浓度IC50为0.208ng/mL,与黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2交叉反应率分别为9.43%、5.93%、4.87%和6.17%;其氨基酸序列如SEQIDNO:7所示,编码基因序列如SEQIDNO:8所示,本发明黄曲霉毒素纳米抗体免疫亲和柱可用于净化与浓缩上机检测前样品提取液,且该免疫亲和柱可以多次重复使用。
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公开(公告)号:CN103215231A
公开(公告)日:2013-07-24
申请号:CN201310115921.8
申请日:2013-04-03
申请人: 中国农业科学院油料作物研究所
IPC分类号: C12N5/20 , C07K16/14 , G01N33/577 , C12R1/91
摘要: 本发明提供了杂交瘤细胞株1H2、其产生的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体及其在免疫层析时中应用。杂交瘤细胞株1H2,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO.C201329。杂交瘤细胞株1H2可以用于制备高效价抗赭曲霉毒素A单克隆抗体,采用鼠腹水抗体酶联免疫吸附分析(ELISA)法测得的效价可达7.2×105。该抗赭曲霉毒素A单克隆抗体灵敏度高,对赭曲霉毒素A的50%抑制浓度IC50为52pg/mL,与赭曲霉毒素B,黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2,呕吐毒素,玉米赤霉烯酮,伏马毒素的交叉反应率均小于0.1%,可用于赭曲霉毒素A含量的快速测定。
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公开(公告)号:CN103898615A
公开(公告)日:2014-07-02
申请号:CN201410121773.5
申请日:2014-03-28
申请人: 中国农业科学院油料作物研究所
CPC分类号: G01N33/56961 , C07K16/14 , C07K2317/565 , C07K2317/569 , G01N2333/38 , G01N2469/10
摘要: 本发明涉及黄曲霉毒素纳米抗体基因库、构建方法、用途及黄曲霉毒素M1纳米抗体2014AFM-G2。所述黄曲霉毒素纳米抗体基因库是通过提取免疫黄曲霉毒素M1完全抗原后的羊驼血液中的RNA,并采用反转录PCR的方法特异性扩增羊驼重链抗体可变区基因得到黄曲霉毒素纳米抗体VHH基因,然后与pCANTAB5E(his)载体连接后转化得到。本发明筛选得到的黄曲霉毒素M1纳米抗体2014AFM-G2具有耐有机试剂、耐高温、耐酸碱等特点,稳定性好;对黄曲霉毒素M1的50%抑制浓度IC50为0.208ng/mL;与黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2交叉反应率分别为9.43%、5.93%、4.87%和6.17%。
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公开(公告)号:CN103232975B
公开(公告)日:2014-04-09
申请号:CN201310115825.3
申请日:2013-04-03
申请人: 中国农业科学院油料作物研究所
IPC分类号: C12N5/20 , C07K16/14 , G01N33/577 , C12R1/91
摘要: 本发明提供了杂交瘤细胞株2D3、其分泌产生的抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体及其应用。杂交瘤细胞株2D3,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO.C201328。杂交瘤细胞株2D3可以用于制备高效价抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体,鼠腹水经纯化制得的抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体用酶联免疫吸附分析法(ELISA)测得的效价可达1.5×105。该抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体灵敏度高,对玉米赤霉烯酮的50%抑制浓度IC50为20pg/mL,与β-玉米赤霉烯醇,α-玉米赤霉烯醇,β-玉米赤霉醇的交叉反应分别为84.9%,3.3%,3.2%。可用于玉米赤霉烯酮含量的测定。
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公开(公告)号:CN103898615B
公开(公告)日:2014-11-26
申请号:CN201410121773.5
申请日:2014-03-28
申请人: 中国农业科学院油料作物研究所
CPC分类号: G01N33/56961 , C07K16/14 , C07K2317/565 , C07K2317/569 , G01N2333/38 , G01N2469/10
摘要: 本发明涉及黄曲霉毒素纳米抗体基因库、构建方法、用途及黄曲霉毒素M1纳米抗体2014AFM-G2。所述黄曲霉毒素纳米抗体基因库是通过提取免疫黄曲霉毒素M1完全抗原后的羊驼血液中的RNA,并采用反转录PCR的方法特异性扩增羊驼重链抗体可变区基因得到黄曲霉毒素纳米抗体VHH基因,然后与pCANTAB5E(his)载体连接后转化得到。本发明筛选得到的黄曲霉毒素M1纳米抗体2014AFM-G2具有耐有机试剂、耐高温、耐酸碱等特点,稳定性好;对黄曲霉毒素M1的50%抑制浓度IC50为0.208ng/mL;与黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2交叉反应率分别为9.43%、5.93%、4.87%和6.17%。
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