一种利用毛细管电泳技术自动化批量检测mRNA加帽率的方法

    公开(公告)号:CN116640833A

    公开(公告)日:2023-08-25

    申请号:CN202310642481.5

    申请日:2023-06-01

    IPC分类号: C12Q1/6813 G01N27/447

    摘要: 本发明提供了一种利用毛细管电泳技术自动化批量检测mRNA加帽率的方法,属于生物检测技术领域。将根据待测mRNA的5’UTR区序列设计的杂交探针与待测mRNA杂交得到杂合序列,对杂合序列进行酶解、纯化和高温变性解离,得到探针、加帽和未加帽mRNA序列。用毛细管电泳设备分析mRNA加帽率,通过设置反向电泳程序,以及特定的灌制凝胶和保存凝胶的程序,可实现mRNA加帽率的自动化批量定量检测。本发明得到的毛细管电泳图谱特征峰基线平滑,信噪比高,加帽与未加帽样品的分子量虽然相近,但两者信号峰之间的分离度高。本发明操作简单,耗材成本低廉,实验结果精准、可重复,非常适用于mRNA药物产业化中的质量检定。

    人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素-6融合蛋白及构建方法

    公开(公告)号:CN1506377A

    公开(公告)日:2004-06-23

    申请号:CN02127971.3

    申请日:2002-12-07

    IPC分类号: C07K19/00 C07K11/00 C12N15/62

    摘要: 本发明是人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素-6融合蛋白及构建方法。融合蛋白为:GM-CSF(9-127)-IL-6(29-184),GM-CSF(9-127)-IL-6(1-184),GM-CSF(1-127)-IL-6(1-184),GM-CSF(9-127)-IL-6(24-184)IL-6(1-184)-GM-CSF(9-127),IL-6(24-184)-GM-CSF(9-127)其构建方法是将GM-CSF N端的8个氨基酸切除,构成GM-CSF(9-127);将IL-6 N端的23个氨基酸切除构成IL-6(24-184),以及将N端28个氨基酸切除构成IL-6(29-184),然后与原来完整的GM-CSF(1-127)及IL-6(1-184)一起进行不同组合,并在两个蛋白连接处设置一个空间活动较大的连接肽而构成6种不同的融合蛋白。它们具有较高生物活性,能获得高效表达,并具有对人体造血功能恢复作用。

    一种预防手足口病和甲型肝炎的联合疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN108853490A

    公开(公告)日:2018-11-23

    申请号:CN201810661637.3

    申请日:2018-06-25

    摘要: 本发明公开了一种预防手足口病和甲型肝炎的联合疫苗及其制备方法,本联合疫苗包含灭活的EV71抗原、灭活的CA16抗原和灭活的HAV抗原;通过分别将肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CA16)以及用甲型肝炎病毒(HAV)通过接种人二倍体细胞经培养、病毒收获、纯化、灭活后制成病毒原液;再将灭活后的EV71、CA16和HAV病毒原液加入含铝佐剂吸附稀配合并,从而制得EV71‑CA16‑HAV预防手足口病和甲型肝炎联合疫苗。本发明提供的EV71‑CA16‑HAV三联疫苗,能同时满足EV71和CA16两种病毒型的手足口病及HAV型甲型肝炎的预防疫苗,解决了现有技术中需要分别注射的问题,通过两针次的接种,能大大减少传统的接种次数,降低了使用成本,有效降低了接种次数带来的风险。

    一种脊髓灰质炎病毒Ⅰ型D抗原预包被检测方法及其检测试剂盒和应用

    公开(公告)号:CN108303533A

    公开(公告)日:2018-07-20

    申请号:CN201810032964.2

    申请日:2018-01-13

    IPC分类号: G01N33/569

    摘要: 本发明提供一种预包被的可进行批量生产的脊髓灰质炎病毒(Polio virus)Ⅰ型D抗原检测方法,采用牛(兔、羊)抗Ⅰ型脊髓灰质炎病毒D抗原纯化抗体包被微孔板,并通过保护剂对包被板和包被抗体进行保护后制备成预包被板,同时配套辣根过氧化物酶标记的牛(兔、羊)抗Ⅰ型脊髓灰质炎病毒酶标抗体和其他试剂。该方法(试剂)可以对脊髓灰质炎病毒Ⅰ型D抗原进行特异性的定性和定量检测,对脊髓灰质炎病毒Ⅰ型C抗原,Ⅱ、Ⅲ型C、D抗原和其他肠道病毒无交叉,是一种特异性高、灵敏高,使用方便、用途广泛的Ⅰ型脊髓灰质炎病毒D抗原检测法,在IPV疫苗生产检定中有较高的应用价值。

    一种检测mRNA Poly(A)尾长度的方法
    7.
    发明公开

    公开(公告)号:CN116626142A

    公开(公告)日:2023-08-22

    申请号:CN202310601760.7

    申请日:2023-05-26

    IPC分类号: G01N27/447 C12Q1/68

    摘要: 本发明提供了一种检测mRNA Poly(A)尾长度的方法,属于生物技术领域。用具有非腺嘌呤核苷酸(U、C、G)酶切位点的RNA水解酶酶切待测mRNA,得到mRNA的Poly(A)尾序列片段和其他酶切小片段的水解产物,对水解产物中的Poly(A)尾序列用Oligo(dT)n磁珠捕获。用毛细管电泳设备检测mRNA Poly(A)尾的长度,通过设置反向电泳程序,以及特定的灌制凝胶和保存凝胶程序,可实现mRNA Poly(A)尾长度的自动化批量检测。本发明可准确、批量检测mRNA的Poly(A)尾序列长度,且灵敏度高,重复性好,结果易于判断,操作成本低,操作简单,广泛应用于mRNA的基础生物学研究、药物开发及生产质检。