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    一种提高蛋白表达效率的方法及表达载体
    1.
    发明授权
    一种提高蛋白表达效率的方法及表达载体 失效

    公开(公告)号：CN102333870B

    公开(公告)日：2014-01-29

    申请号：CN201180001670.X

    申请日：2011-02-16

    申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所

    发明人： 张庆利 ,  黄倢 ,  刘笋 ,  刘庆慧 ,  史成银 ,  梁艳

    IPC分类号： C12N15/63 ,  C12N15/67

    CPC分类号： C12N15/67

    摘要： 本发明涉及一种提高蛋白表达效率的表达载体，该表达载体起始密码子ATG后含有一段编码特定氨基酸片段的核苷酸，其特征在于：(a)上述的特定氨基酸为有4个或以上密码子的氨基酸；(b)上述的特定氨基酸片段的氨基酸残基数目不少于3个。另外，本发明还提供了一种提高目的基因蛋白表达效率的方法，该方法通过在目的基因的起始密码子ATG后插入一段编码特定氨基酸片段的核苷酸来实现，其中特定氨基酸为有4个或以上密码子的氨基酸且氨基酸残基数目不少于3个。本发明提供的提高基因蛋白表达效率的方法，不仅可以用于改造任意目的基因以提高其表达效率，还可以用于构建具有高表达效率特征的表达载体。与现有技术相比，利用本发明的载体或方法，可以使目的基因的蛋白表达效率提高2～5倍。

    对虾白斑综合征病毒VP28酵母表面展示与应用
    2.
    发明公开
    对虾白斑综合征病毒VP28酵母表面展示与应用 无效

    公开(公告)号：CN102653723A

    公开(公告)日：2012-09-05

    申请号：CN200910215937.X

    申请日：2009-12-28

    申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所

    发明人： 刘庆慧 ,  李新新 ,  张秀丽 ,  黄捷

    IPC分类号： C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/93 ,  C12R1/865 ,  C12R1/19

    摘要： 本发明公开了一种表面展示对虾白斑综合征病毒蛋白VP28的重组酵母菌的制备方法，是利用酵母表面展示载体pYD1，与对虾白斑综合征病毒蛋白VP28基因重组，构建融合表达的重组质粒，并转化酿酒酵母菌EBY100，得到表面展示VP28的重组酵母菌。其特征在于含有对虾白斑综合征病毒蛋白VP28基因的重组酵母菌EBY100，所述的重组酵母菌表面有VP28。本发明的另一个目的是提供表面展示对虾白斑综合征病毒VP28重组酵母活疫苗在甲壳类动物养殖中的应用。所制备的重组酵母菌可以作为口服疫苗免疫对虾，用来保护对虾免受对虾白斑综合征病毒的侵染。本发明的基因工程活疫苗的优点在于，所用酿酒酵母菌安全，培养方法简单易行，便于大规模生产。相对于其它疫苗，展示的VP28蛋白易被免疫系统识别，展示的VP28蛋白稳定性好。

    一种提高蛋白表达效率的方法及表达载体
    3.
    发明公开
    一种提高蛋白表达效率的方法及表达载体 失效

    公开(公告)号：CN102333870A

    公开(公告)日：2012-01-25

    申请号：CN201180001670.X

    申请日：2011-02-16

    申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所

    发明人： 张庆利 ,  黄倢 ,  刘笋 ,  刘庆慧 ,  史成银 ,  梁艳

    IPC分类号： C12N15/63 ,  C12N15/67

    CPC分类号： C12N15/67

    摘要： 本发明涉及一种提高蛋白表达效率的表达载体，该表达载体起始密码子ATG后含有一段编码特定氨基酸片段的核苷酸，其特征在于：(a)上述的特定氨基酸为有4个或以上密码子的氨基酸；(b)上述的特定氨基酸片段的氨基酸残基数目不少于3个。另外，本发明还提供了一种提高目的基因蛋白表达效率的方法，该方法通过在目的基因的起始密码子ATG后插入一段编码特定氨基酸片段的核苷酸来实现，其中特定氨基酸为有4个或以上密码子的氨基酸且氨基酸残基数目不少于3个。本发明提供的提高基因蛋白表达效率的方法，不仅可以用于改造任意目的基因以提高其表达效率，还可以用于构建具有高表达效率特征的表达载体。与现有技术相比，利用本发明的载体或方法，可以使目的基因的蛋白表达效率提高2～5倍。

    功能食品的基料液及其制备方法
    4.
    发明授权
    功能食品的基料液及其制备方法 失效

    公开(公告)号：CN1270638C

    公开(公告)日：2006-08-23

    申请号：CN200410023690.9

    申请日：2004-03-13

    申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所

    发明人： 刘庆慧 ,  王彩理

    IPC分类号： A23L1/325 ,  A23L3/3463 ,  A23L3/40

    摘要： 本发明是一种功能食品的基料液，其由鱼鳞制成的。该基料液中含有分子量低于5000道尔顿的小分子肽类50-70%(质量比)，含有18种游离氨基酸20-30%(质量比)，含有钙、磷元素4.5-20%(质量比)，含有镁、铜、锌、铁、锰微量元素0.15-1%(质量比)，该基料液外观呈淡黄色透明液体。其制备方法是：以生物酶使鱼鳞酶解液化，通过鱼鳞酶解条件的优化，控制鱼鳞酶解，将不溶解的粗蛋白分解为小分子肽类及游离氨基酸，保留原料中的有效活性成分和微量元素。本发明的制备方法具有生产周期短，设备使用寿命长，能耗低等优点，其为制取功能性食品开发了新的——鱼鳞原料来源。

    功能食品的基料液及其制备方法
    6.
    发明公开
    功能食品的基料液及其制备方法 失效

    公开(公告)号：CN1561840A

    公开(公告)日：2005-01-12

    申请号：CN200410023690.9

    申请日：2004-03-13

    申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所

    发明人： 刘庆慧 ,  王彩理

    IPC分类号： A23L1/325 ,  A23L3/3463 ,  A23L3/40

    摘要： 本发明是一种功能食品的基料液，其由鱼鳞制成的。该基料液中含有分子量低于5000道尔顿的小分子肽类50－70％(质量比)，含有18种游离氨基酸20－30％(质量比)，含有钙、磷元素4.5－20％(质量比)，含有镁、铜、锌、铁、锰微量元素0.15－1％(质量比)，该基料液外观呈淡黄色透明液体。其制备方法是：以生物酶使鱼鳞酶解液化，通过鱼鳞酶解条件的优化，控制鱼鳞酶解，将不溶解的粗蛋白分解为小分子肽类及游离氨基酸，保留原料中的有效活性成分和微量元素。本发明的制备方法具有生产周期短，设备使用寿命长，能耗低等优点，其为制取功能性食品开发了新的——鱼鳞原料来源。

    对虾白斑综合征病毒VP37酵母表面展示与应用
    8.
    发明公开
    对虾白斑综合征病毒VP37酵母表面展示与应用 无效

    公开(公告)号：CN102021124A

    公开(公告)日：2011-04-20

    申请号：CN200910215936.5

    申请日：2009-12-28

    申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所

    发明人： 刘庆慧 ,  黄捷 ,  李新新 ,  张秀丽

    IPC分类号： C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/93 ,  C12R1/865 ,  C12R1/19

    摘要： 本发明公开了一种表面展示对虾白斑综合征病毒蛋白VP37的重组酵母菌的制备方法，是利用酵母表面展示载体pYD1，与对虾白斑综合征病毒蛋白VP37基因重组，构建融合表达的重组质粒，并转化酿酒酵母菌EBY100，得到表面展示VP37的重组酵母菌。其特征在于含有对虾白斑综合征病毒蛋白VP37基因的重组酵母菌EBY100，所述的重组酵母菌表面有VP37。本发明的另一个目的是提供表面展示对虾白斑综合征病毒VP37重组酵母活疫苗在甲壳类动物养殖中的应用。所制备的重组酵母菌可以作为口服疫苗免疫对虾，用来保护对虾免受对虾白斑综合征病毒的侵染。本发明的基因工程活疫苗的优点在于，所用酿酒酵母菌安全，培养方法简单易行，便于大规模生产。相对于其它疫苗，展示的VP37蛋白易被免疫系统识别，展示的VP37蛋白稳定性好。

    基于凝胶的多聚酶链式反应试剂保存方法及反应试剂
    10.
    发明授权
    基于凝胶的多聚酶链式反应试剂保存方法及反应试剂 失效

    公开(公告)号：CN102703428B

    公开(公告)日：2013-09-18

    申请号：CN201210178919.0

    申请日：2012-06-01

    申请人： 中国水产科学研究院黄海水产研究所

    发明人： 张庆利 ,  黄倢 ,  杨冰 ,  宋晓玲 ,  刘庆慧 ,  刘莉

    IPC分类号： C12N15/10 ,  C12Q1/68

    摘要： 本发明涉及一种基于凝胶的多聚酶链反应试剂保存方法及反应试剂，是将一种或几种多聚酶链式反应液的组分包埋在凝胶内进行保存，其中凝胶的熔点低于用于多聚酶链反应扩增的聚合酶的灭活温度。另外本发明还包括可以常温保存和运输的反应试剂和试剂盒，采用本发明方法处理后的多聚酶链反应试剂，可常温贮存和运输，使用时无需特殊处理，直接使用即可。由于处理后的多聚酶链扩增反应试剂混合物呈固态状，可以很方便的进行航空运输，克服了此前反应试剂混合物呈液态较难利用航空方式进行长距离运输的难题。