公开(公告)号：CN104774182A

公开(公告)日：2015-07-15

申请号：CN201410008812.0

申请日：2014-01-09

申请人： 中国科学院天津工业生物技术研究所

发明人： 姜文侠 ,  刘琦 ,  王洪宇 ,  李运华 ,  刘伟 ,  梅保良 ,  张维亚

IPC分类号： C07D233/84 ,  C12P13/04 ,  C12R1/645

CPC分类号： C07D233/84

摘要： 本发明涉及一种麦角硫因的提取和纯化方法，包括以下步骤：(1)以热水浸提蕈菌菌丝体发酵液，获得菌丝体和麦角硫因水溶液；(2)对所述麦角硫因水溶液以截留分子量为1kDa～30kDa的超滤膜进行超滤，并收集超滤透过液；和(3)对所述超滤透过液进行色谱纯化，色谱的条件为：色谱填料为HILIC填料，流动相组成为体积比80∶20～88∶12的乙腈-水，麦角硫因进样量为每100g填料0.01g～0.323g。本发明的提取和纯化方法简单，易操作，成本低，可快速大量地制备不同纯度的麦角硫因，样品纯度可达99.0％。

公开(公告)号：CN114774442B

公开(公告)日：2023-10-17

申请号：CN202210476510.0

申请日：2022-04-29

申请人： 中国科学院天津工业生物技术研究所

发明人： 江会锋 ,  王益娜 ,  刘晓楠 ,  陈碧环 ,  刘伟 ,  卢丽娜 ,  张广辉 ,  杨生超

IPC分类号： C12N15/60 ,  C12N15/53 ,  C12N15/52 ,  C12N15/54 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P19/60 ,  C12R1/645

摘要： 本发明公开了一种产灯盏乙素的重组解脂耶氏酵母及其构建方法和用途。所述的构建方法包括如下步骤：首先通过在解脂耶氏酵母中异源表达灯盏乙素通路合成的9个关键酶实现了灯盏乙素在解脂耶氏酵母中的从头生产，并进一步通过优化改造使灯盏乙素的产量在摇瓶条件下达到94.79mg/L，经补料分批发酵以后灯盏乙素产量可达346mg/L，所占比例达到80％以上，副产物占比少。本发明的方法为人工细胞高效合成灯盏乙素奠定了基础。

公开(公告)号：CN104774182A8

公开(公告)日：2018-01-09

申请号：CN201410008812.0

申请日：2014-01-09

申请人： 中国科学院天津工业生物技术研究所

发明人： 姜文侠 ,  刘琦 ,  王洪宇 ,  李运华 ,  刘伟 ,  梅保良 ,  张维亚

IPC分类号： C07D233/84 ,  C12P13/04 ,  C12R1/645

CPC分类号： C07D233/84

摘要： 本发明涉及一种麦角硫因的提取和纯化方法，包括以下步骤：(1)以热水浸提蕈菌菌丝体发酵液，获得菌丝体和麦角硫因水溶液；(2)对所述麦角硫因水溶液以截留分子量为1kDa～30kDa的超滤膜进行超滤，并收集超滤透过液；和(3)对所述超滤透过液进行色谱纯化，色谱的条件为：色谱填料为HILIC填料，流动相组成为体积比80∶20～88∶12的乙腈-水，麦角硫因进样量为每100g填料0.01g～0.323g。本发明的提取和纯化方法简单，易操作，成本低，可快速大量地制备不同纯度的麦角硫因，样品纯度可达99.0％。

公开(公告)号：CN104774182B

公开(公告)日：2018-06-01

申请号：CN201410008812.0

申请日：2014-01-09

申请人： 中国科学院天津工业生物技术研究所

发明人： 姜文侠 ,  刘琦 ,  王洪宇 ,  李运华 ,  刘伟 ,  梅保良 ,  张维亚

IPC分类号： C07D233/84 ,  C12P13/04 ,  C12R1/645

CPC分类号： C07D233/84

摘要： 本发明涉及一种麦角硫因的提取和纯化方法，包括以下步骤：(1)以热水浸提蕈菌菌丝体发酵液，获得菌丝体和麦角硫因水溶液；(2)对所述麦角硫因水溶液以截留分子量为1kDa～30kDa的超滤膜进行超滤，并收集超滤透过液；和(3)对所述超滤透过液进行色谱纯化，色谱的条件为：色谱填料为HILIC填料，流动相组成为体积比80∶20～88∶12的乙腈‑水，麦角硫因进样量为每100g填料0.01g～0.323g。本发明的提取和纯化方法简单，易操作，成本低，可快速大量地制备不同纯度的麦角硫因，样品纯度可达99.0％。

公开(公告)号：CN114774442A

公开(公告)日：2022-07-22

申请号：CN202210476510.0

申请日：2022-04-29

申请人： 中国科学院天津工业生物技术研究所

发明人： 江会锋 ,  王益娜 ,  刘晓楠 ,  陈碧环 ,  刘伟 ,  卢丽娜 ,  张广辉 ,  杨生超

IPC分类号： C12N15/60 ,  C12N15/53 ,  C12N15/52 ,  C12N15/54 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P19/60 ,  C12R1/645

摘要： 本发明公开了一种产灯盏乙素的重组解脂耶氏酵母及其构建方法和用途。所述的构建方法包括如下步骤：首先通过在解脂耶氏酵母中异源表达灯盏乙素通路合成的9个关键酶实现了灯盏乙素在解脂耶氏酵母中的从头生产，并进一步通过优化改造使灯盏乙素的产量在摇瓶条件下达到94.79mg/L，经补料分批发酵以后灯盏乙素产量可达346mg/L，所占比例达到80％以上，副产物占比少。本发明的方法为人工细胞高效合成灯盏乙素奠定了基础。

公开(公告)号：CN104749263B

公开(公告)日：2018-11-23

申请号：CN201310738112.2

申请日：2013-12-26

申请人： 中国科学院天津工业生物技术研究所

发明人： 姜文侠 ,  刘琦 ,  王洪宇 ,  刘伟 ,  李运华

IPC分类号： G01N30/02

摘要： 本发明涉及一种麦角硫因的高压液相色谱检测方法，包括采用亲水作用色谱（HILIC）分析色谱柱对含有麦角硫因的样品进行高压液相色谱分析，所述色谱柱采用HILIC填料作为固定相，采用（80～95）∶（20～5）的乙腈‑水（v/v）溶液作为流动相，所述溶液的pH为5.6～8.0，柱温为25～45℃。本发明还涉及麦角硫因的定量检测方法。

公开(公告)号：CN104749263A

公开(公告)日：2015-07-01

申请号：CN201310738112.2

申请日：2013-12-26

申请人： 中国科学院天津工业生物技术研究所

发明人： 姜文侠 ,  刘琦 ,  王洪宇 ,  刘伟 ,  李运华

IPC分类号： G01N30/02

摘要： 本发明涉及一种麦角硫因的高压液相色谱检测方法，包括采用亲水作用色谱（HILIC）分析色谱柱对含有麦角硫因的样品进行高压液相色谱分析，所述色谱柱采用HILIC填料作为固定相，采用（80～95）∶（20～5）的乙腈-水（v/v）溶液作为流动相，所述溶液的pH为5.6～8.0，柱温为25～45℃。本发明还涉及麦角硫因的定量检测方法。