公开(公告)号：CN117089605B

公开(公告)日：2024-05-03

申请号：CN202311061603.8

申请日：2023-08-22

申请人： 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

发明人： 李金泽 ,  张琴琴 ,  周连群 ,  郭振 ,  李传宇 ,  李莹雪 ,  姚佳 ,  张威 ,  李超 ,  杨弃 ,  张芷齐

IPC分类号： C12Q1/6858 ,  C12N15/11

摘要： 本发明涉及一种基于FQ‑RCA的RNA等温实时基因分型方法，属于分子生物学技术领域。本发明提供了一种基于FQ‑RCA的RNA等温实时基因分型方法，先通过splintR DNA连接酶连接分别与野生型RNA和突变型RNA完全匹配的两条锁式探针，形成DNA环状模板，再通过含有两套FQ探针的RCA反应进行实时荧光信号检测。此方法将FQ探针和RCA技术结合，实现了对RCA反应中突变位点的实时检测，并结合了splintR DNA连接酶能够以RNA为夹板高效连接DNA的特性，以及两套锁式探针相互竞争减少非特异性连接的方法，可以直接以RNA为靶标进行SNP基因分型检测，无需逆转录成cDNA。

公开(公告)号：CN117089605A

公开(公告)日：2023-11-21

申请号：CN202311061603.8

申请日：2023-08-22

申请人： 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

发明人： 李金泽 ,  张琴琴 ,  周连群 ,  郭振 ,  李传宇 ,  李莹雪 ,  姚佳 ,  张威 ,  李超 ,  杨弃 ,  张芷齐

IPC分类号： C12Q1/6858 ,  C12N15/11

摘要： 本发明涉及一种基于FQ‑RCA的RNA等温实时基因分型方法，属于分子生物学技术领域。本发明提供了一种基于FQ‑RCA的RNA等温实时基因分型方法，先通过splintR DNA连接酶连接分别与野生型RNA和突变型RNA完全匹配的两条锁式探针，形成DNA环状模板，再通过含有两套FQ探针的RCA反应进行实时荧光信号检测。此方法将FQ探针和RCA技术结合，实现了对RCA反应中突变位点的实时检测，并结合了splintR DNA连接酶能够以RNA为夹板高效连接DNA的特性，以及两套锁式探针相互竞争减少非特异性连接的方法，可以直接以RNA为靶标进行SNP基因分型检测，无需逆转录成cDNA。