一种无精子症小鼠模型的构建方法

    公开(公告)号:CN108815152A

    公开(公告)日:2018-11-16

    申请号:CN201810947058.5

    申请日:2018-08-17

    IPC分类号: A61K31/255

    摘要: 本发明公开了无精子症小鼠模型的构建方法,包括如下步骤:(1)提供性成熟的雄性小鼠,体重为25~35g;(2)取白消安溶解于DMSO,以生理盐水稀释得稀释液;(3)小鼠下腹部酒精消毒,晾干后,吸取步骤(2)所得稀释液并进针,回抽确认无误后,完成首次腹腔注射;之后,同一天内再间隔注射3次,35~37天后,即得所述无精子症小鼠模型。本发明的方法成模率高、稳定性好;依据本发明,已累计完成84只C57BL/6小鼠无精子症建模,经睾丸HE染色鉴定成模总数为84/84,成模率为100%;采用本发明的方法构建模型,小鼠的死亡率为0%;依据本发明的方法,已累计注射的84只C57BL/6小鼠,死亡总数为0,死亡率为0%。

    一种基于精浆外泌体mRNA表达谱术前评估无精子症的试剂盒

    公开(公告)号:CN113667742A

    公开(公告)日:2021-11-19

    申请号:CN202111041729.X

    申请日:2021-09-07

    IPC分类号: C12Q1/6883 C12N15/11

    摘要: 本发明提供一组用于无精子症精确分型的生物分子标记物以及试剂盒,所述分子标记为精浆外泌体mRNA,所述mRNA包括PRM2、ADAM28、WFDC13、WFDC9、SEMG2、PSA。本发明以精浆外泌体为标志物来源,聚焦至生殖腺体特异性mRNA,通过全面检测精浆外泌体中各部位特异性mRNA表达,以明确是否有梗阻以及梗阻部位或取精结局。本发明试剂盒基于外泌体的RNA富集效应及其稳定性,同时结合精浆外泌体长链RNA模板扩增及qRT‑PCR检测技术,对精浆中生殖腺体特异性mRNA信号进行放大并获取,以实现检测的敏感性与稳定性。

    一种无精子症小鼠模型的构建方法

    公开(公告)号:CN108815152B

    公开(公告)日:2021-04-06

    申请号:CN201810947058.5

    申请日:2018-08-17

    IPC分类号: A61K31/255

    摘要: 本发明公开了无精子症小鼠模型的构建方法,包括如下步骤:(1)提供性成熟的雄性小鼠,体重为25~35g;(2)取白消安溶解于DMSO,以生理盐水稀释得稀释液;(3)小鼠下腹部酒精消毒,晾干后,吸取步骤(2)所得稀释液并进针,回抽确认无误后,完成首次腹腔注射;之后,同一天内再间隔注射3次,35~37天后,即得所述无精子症小鼠模型。本发明的方法成模率高、稳定性好;依据本发明,已累计完成84只C57BL/6小鼠无精子症建模,经睾丸HE染色鉴定成模总数为84/84,成模率为100%;采用本发明的方法构建模型,小鼠的死亡率为0%;依据本发明的方法,已累计注射的84只C57BL/6小鼠,死亡总数为0,死亡率为0%。

    一种从精液中分离提纯外泌体的方法

    公开(公告)号:CN108414334A

    公开(公告)日:2018-08-17

    申请号:CN201810154782.2

    申请日:2018-02-23

    IPC分类号: G01N1/34

    摘要: 本发明提供了一种从精液中分离提纯外泌体的方法,本发明与常规的外泌体分离提取方法相比,删减300g、2000g的低转速离心步骤,尽量避免外泌体被粘性物质带入下一步离心的细胞沉淀中,减少外泌体的损失。采用两步稀释法,减少了外泌体的损耗,提高了其纯度。采用8%PEG6000过夜处理,使外泌体纯度得到进一步提升。所使用PBS均采用0.1μm滤器过滤处理,减少了外来杂质的带入。采取两步过滤法(0.22μm滤器过滤处理),减少了较大粒径颗粒混入。通过该方法可以获得质量较高且纯度更加符合实验要求的精液来源外泌体。在对精液来源外泌体保质保量的前提下,最大限度的提高了其纯度。