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公开(公告)号：CN118460561A
公开(公告)日：2024-08-09
申请号：CN202410735626.0
申请日：2024-06-07
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
IPC分类号： C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H6/82 , A01H5/12
摘要： 本发明属于遗传工程技术领域，具体涉及一种调节烟叶烟碱含量的NtMYC2a基因突变体及其应用。所述NtMYC2a基因突变体，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，其为核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的烟草NtMYC2a基因的第490位核苷酸由G突变为T所得；或，其核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，其为核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的烟草NtMYC2a基因的第490位核苷酸由G突变为A所得；或，其核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示，其为核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的烟草NtMYC2a基因的第503位核苷酸由C突变为T所得。所述NtMYC2a基因突变体能够实现烟叶中烟碱含量的调节。
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公开(公告)号：CN113917045B
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202111363327.1
申请日：2021-11-17
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
摘要： 本发明涉及气相色谱‑氢焰检测器定量分析烟叶11种酰胺生物碱方法，通过氢氧化钠溶液浸泡使酰胺生物碱从烟末样品基质中游离出来，通过甲基叔丁基醚的萃取将目标化合物转入醚层，取甲基叔丁基醚萃取液浓缩后进行气相色谱‑氢火焰离子检测器分析，将仪器获得的色谱峰面积输入对应的酰胺生物碱的标准校准曲线拟合方程，得到对应的目标化合物浓度，通过换算得到对应的酰胺生物碱在烟叶中的含量。该方法可同时定量分析11种酰胺生物碱，具有简单、快速、稳定等优势。填补了目前不存在定量分析烟叶中11种酰胺生物碱的方法的空白，在此基础上可发展多种应用。
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公开(公告)号：CN111505157B
公开(公告)日：2022-11-15
申请号：CN202010385199.X
申请日：2020-05-09
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
摘要： 本发明公开了一种基于非孵化处理的尼古丁转化烟株色质快速筛查方法，包括育苗采样、生物碱提取、仪器分析及数据分析，与现有技术相比，本发明取消了样品研磨和称样步骤，缩短了样品提取时间；本方案还简化了尼古丁和降烟碱的测定方法，省去了样品孵化过程，优化了气质联用分析方法，即采用270℃恒温模式而不是程序升温，最终使得整个鉴定过程只需5‑6分钟，极大提高了鉴定效率，适用于大规模烟株样本的筛选；另外，本发明首次引入了PPNC作为PNC的简化方案，PPNC比PNC更容易获得，且不受标准品纯度、标准曲线质量等因素影响，一定程度上比PNC具有更好的筛选效果。
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公开(公告)号：CN110646603B
公开(公告)日：2022-11-15
申请号：CN201910938841.X
申请日：2019-09-30
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
IPC分类号： G01N33/531 , G01N33/537 , G01N33/543 , G01N21/78
摘要： 本发明公开了一种烯酰吗啉胶体金检测试剂盒及其应用。所述的烯酰吗啉胶体金检测试剂盒包括试剂盒盒体、检测试纸条、样品提取液、样品复溶液；其中，所述检测试纸条包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫、PVC底板；所述结合物释放垫上包被有烯酰吗啉特异性抗体‑胶体金标记物；所述反应膜上包被有烯酰吗啉半抗原‑OVA偶联物构成的检测线和包被抗抗体构成的质控线。本发明烯酰吗啉胶体金检测试剂盒，能够实现对烟草中烯酰吗啉的半定量检测，具有检测快速，准确，便捷的优点，且能够同时检测大批量样本，能满足市场对烟草中烯酰吗啉残留的快速检测需求。
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公开(公告)号：CN114778654A
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN202210618876.7
申请日：2022-06-01
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
摘要： 一种卷烟主流烟气粒相物全组分化学指纹的分析方法，包括以下步骤：(1)对样品进行前处理，通过剑桥滤片捕集卷烟主流烟气粒相物，(2)通过二氯甲烷萃取将烟气粒相物转入溶液，(3)通过向浓缩提取液加入硅烷化试剂提高酸性化合物的响应灵敏度和稳定性，(4)最后将硅烷化后的混合溶液进行气相色谱‑质谱分析。本方法在样品处理时，不进行酸性、碱性、中性馏分的分离，只是向浓缩提取液中加入硅烷化试剂，提高酸性化合物在非极性色谱柱上的响应灵敏度和稳定性，简单、快速、准确，只需一次进样，可以同时分析卷烟烟气粒相物中的酸性、碱性和中性化合物。
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公开(公告)号：CN110542736B
公开(公告)日：2022-05-06
申请号：CN201910973990.X
申请日：2019-10-14
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
摘要： 本发明公开了一种同时分析烟叶中的9种生物碱和11种香气成分的方法，所述的同时分析烟叶中的9种生物碱和11种香气成分的方法包括样品前处理、标准曲线定量分析步骤。本发明是通过碱液浸泡使目标生物碱和香气物质从样品基质中游离出来，通过加入三氯甲烷并涡旋震荡将生物碱和香气物质转入三氯甲烷相，通过离心分层后取三氯甲烷相进行仪器分析；与现有技术相比，本发明的有益效果：目前无同时分析烟叶中9生物碱和11香气成分的方法报导；与现有的烟叶中生物碱和香气成分分析方法相比，本发明操作更简单、稳定性更高。
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公开(公告)号：CN113774069A
公开(公告)日：2021-12-10
申请号：CN202111293671.8
申请日：2021-11-03
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
IPC分类号： C12N15/29 , C12N15/82 , C12Q1/6895 , A01H5/12 , A01H6/82
摘要： 本发明公开了一种烟草NtCLC‑f基因突变体及分子鉴定方法和应用，所述烟草NtCLC‑f基因突变体为Ntclc‑f，其为烟草NtCLC‑f基因第1003位的C突变为T，形成终止密码子，使该基因提前终止；所述基因突变体Ntclc‑f的核苷酸序列如SEQ ID N0.2所示。本发明通过系统研究，首次提出了一种烟草NtCLC‑f基因突变体及分子鉴定方法和应用，本发明提出的降低烟草烟叶中氯离子含量的NtCLC‑f基因突变体Ntclc‑f获得的烟草植株，烟叶中氯离子含量比对照降低28.6％，使烟叶的氯离子含量显著降低。
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公开(公告)号：CN107365777B
公开(公告)日：2021-04-16
申请号：CN201710803449.5
申请日：2017-09-08
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
摘要： 本发明公开了一种烟草尼古丁含量调控基因NtCLC‑b，所述基因编码一种调控烟草尼古丁含量的多肽，所述多肽包含的氨基酸序列如SEQ ID：No.2所示；所述烟草尼古丁含量调控基因NtCLC‑b包含的核苷酸序列如SEQ ID：No.1所示本发明还公开了所述调控基因NtCLC‑b的克隆方法及其应用。在烟草植株内过量表达NtCLC‑b基因，可以明显降低烟叶中尼古丁的含量，在实际生产中拥有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN111662912A
公开(公告)日：2020-09-15
申请号：CN202010485376.1
申请日：2020-06-01
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
IPC分类号： C12N15/29 , C12Q1/6895 , A01H1/06 , A01G22/45
摘要： 一种烟草NtARF6基因突变体及分子鉴定方法和应用，所述烟草NtARF6基因突变体为Ntarf6-1，其为烟草Ntarf6基因第261位的G突变为A，形成终止密码子，使该基因提前终止，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明的烟草NtARF6基因突变体Ntarf6-1在基因发生突变后，烟草烟碱含量会明显上调，显著提高烟草品质，在烟草育种上具有极大的价值。
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公开(公告)号：CN107831258A
公开(公告)日：2018-03-23
申请号：CN201711031268.1
申请日：2017-10-30
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
IPC分类号： G01N30/88
CPC分类号： G01N30/88
摘要： 本发明公开了一种基于气相色谱-串联质谱的烟叶马来酰肼及其糖苷的定量分析方法，所述的定量分析方法包括以下步骤：1）样品前处理：准确称取烟叶样品粉末，然后进行离心冷冻干燥，取出冻干样品，加入吡啶和MSTFA，涡旋混合，恒温静置硅烷化30 min，得到衍生后的待测样品，转至气相色谱-串联质谱仪进行分析；2）标准曲线绘制；3）样品分析：将步骤（1）处理后的待测样品进行气相色谱-串联质谱分析，得到待测样品中马来酰肼及其糖苷的色谱质谱峰面积，输入校准曲线方程，计算得到相对应的物质浓度。本发明通过创造性的检测烟叶中马来酰肼自由态及马来酰肼糖苷结合态的含量，极大的提高了分析结果的准确性，方法简便、效率高。
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