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公开(公告)号：CN113584210B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202110908424.8
申请日：2021-08-09
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/29
Abstract: 本发明涉及一种基于NtPIF1基因表达水平筛选硃砂烟植株的方法，所述的基因为NtPIF1基因；序列为SEQ ID NO.1；所述的方法包括以下步骤：单株挂牌编号、叶片取样、RNA提取及cDNA合成、基因表达水平检测、套袋自交收种。本发明首次公开利用NtPIF1基因表达水平筛选硃砂烟植株，且烟草叶片不需进行任何处理直接取样检测，筛选出的植株烤后叶片呈现显著硃砂特征。
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公开(公告)号：CN113831397B
公开(公告)日：2022-11-25
申请号：CN202110953514.9
申请日：2021-08-19
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
Abstract: 本发明“一种原花青素物质调控因子NtMYB330及其表达载体、转化体、试剂盒与方法”属于遗传工程技术领域。所述一种原花青素物质调控因子NtMYB330的氨基酸序列中包含：R2重复序列、R3重复序列、[D/E]Lx2[R/K]x3Lx6Lx3R结构域、VI[R/P]TKAx1RC[S/T]结构域。所述一种原花青素物质调控因子NtMYB330的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。基于过表达原花青素物质调控因子NtMYB330获得的转基因植株花中的儿茶酸含量平均提高431.5％；表儿茶酸含量平均提高406.5％。说明烟草NtMYB330基因在提高烟草花中原花青素含量方面具有较大的应用前景。
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公开(公告)号：CN108642206B
公开(公告)日：2021-12-21
申请号：CN201810434959.4
申请日：2018-05-09
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种烟草赤星病抗性相关的QTL及其定位方法与应用。所述的烟草赤星病抗性相关的QTL由2个组成，1个位于第20号连锁群上的SSR标记TMs 05179和TMs 04022之间，1个位于第23号连锁群上的SSR标记TM 61049和TM 62212之间，两者一起解释了两亲本间~81%的病情指数差异及~64%的加性效应。应用为所述的烟草赤星病抗性相关的QTL在烟草抗赤星病的分子标记辅助育种中的应用。本发明利用抗、感烟草赤星病品种Beinhart 1000‑1和红花大金元衍生的F2作图群体构建一张高质量雪茄烟遗传连锁图谱，并结合组培快繁形成的F2株系的田间赤星病病情指数进行全基因组QTL定位分析，检测获得与烟草赤星病抗性相关的QTLs，为开展烟草抗赤星病的分子标记辅助育种工作奠定基础。
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公开(公告)号：CN107365777B
公开(公告)日：2021-04-16
申请号：CN201710803449.5
申请日：2017-09-08
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种烟草尼古丁含量调控基因NtCLC‑b，所述基因编码一种调控烟草尼古丁含量的多肽，所述多肽包含的氨基酸序列如SEQ ID：No.2所示；所述烟草尼古丁含量调控基因NtCLC‑b包含的核苷酸序列如SEQ ID：No.1所示本发明还公开了所述调控基因NtCLC‑b的克隆方法及其应用。在烟草植株内过量表达NtCLC‑b基因，可以明显降低烟叶中尼古丁的含量，在实际生产中拥有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN111662912A
公开(公告)日：2020-09-15
申请号：CN202010485376.1
申请日：2020-06-01
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
IPC: C12N15/29 , C12Q1/6895 , A01H1/06 , A01G22/45
Abstract: 一种烟草NtARF6基因突变体及分子鉴定方法和应用，所述烟草NtARF6基因突变体为Ntarf6-1，其为烟草Ntarf6基因第261位的G突变为A，形成终止密码子，使该基因提前终止，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明的烟草NtARF6基因突变体Ntarf6-1在基因发生突变后，烟草烟碱含量会明显上调，显著提高烟草品质，在烟草育种上具有极大的价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110452905A
公开(公告)日：2019-11-15
申请号：CN201910778244.5
申请日：2019-08-22
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
IPC: C12N15/10
Abstract: 一种提高烟草DNA沉淀效率的提取方法及其应用，包括前处理和提取，前处理是将待检烟草材料进行浸泡、烘干、取样和研磨得到前处理材料a；提取是在前处理材料a中加入前处理材料体积2～3倍的TPS提取缓冲液，于温度70～80℃下静置30～50min，然后离心得到上清液b，加入上清液b等体积的异丙醇，混匀，离心去除上清液得到沉淀c，沉淀c中加入乙醇溶液震荡，然后离心去除乙醇，风干底部的沉淀得到沉淀d，沉淀d加溶剂溶解，得到DNA提取样本。本发明形成了一套稳定、完整、可行、提取难度低、提取的DNA质量高且对环境友好的DNA提取方法，可应用于卷烟材料、烤后烟叶和烟草鲜叶DNA提取工艺中。
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公开(公告)号：CN110194792A
公开(公告)日：2019-09-03
申请号：CN201910627648.4
申请日：2019-07-12
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/82
Abstract: 本发明公开了一种能提高烟草抗旱的转录因子NtMYB44a及其定点突变方法与应用。所述的能提高烟草抗旱的转录因子NtMYB44a的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；采用CRISPR/Cas9技术，设计了2个sgRNA靶位点，分别位于距离终止密码子（TGA）236bp和230bp，通过转化烟草造成该基因在目标位点的突变；通过自交收种后，筛选得到了NtMYB44a基因定点纯合突变后代。生理实验表明突变烟草叶片失水速率显著慢于野生型的对照植株。干旱胁迫后的覆水实验表明突变植株存活率显著高于野生型植株。本发明表明利用CRISPR/Cas9技术针对NtMYB44a基因尾部（即距离NtMYB44a翻译终止密码子（TGA）200bp至300bp序列范围）所创制出的NtMYB44a基因纯合突变烟草材料比野生型烟草具有更高的抗旱能力。本发明为NtMYB44a基因及其编码蛋白应用于烟草抗旱育种提供基因资源与技术支持。
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公开(公告)号：CN109355419A
公开(公告)日：2019-02-19
申请号：CN201811386808.2
申请日：2018-11-20
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一组打破烟草TMV抗性基因N下游（3’端）连锁累赘的分子标记及其应用。所述的打破烟草TMV抗性基因N下游（3’端）连锁累赘的分子标记编号为TMn324、TMn330、TMn332、TMn349、TMn359、TMn360和TMn383，其PCR扩增产物核苷酸序列分别为SEQ ID No.1、SEQ IDNo.2、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5和SEQ ID No.6、SEQ ID No.7和SEQ ID No.8、SEQ ID No.9和SEQ ID No.10所示。本发明所述的一组分子标记具有简捷、高效和高通量的特点，可用于精准打破烟草N基因下游（3’端）不同位置上的连锁累赘，培育出既含有N基因又能完全或部分打破不利连锁累赘影响的烟草抗TMV新品种。
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公开(公告)号：CN108754028A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810666376.4
申请日：2018-06-26
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2600/13
Abstract: 本发明提供了一种检测抗烟草花叶病毒Np基因的分子标记及其应用。所述分子标记的序列如SEQ No.1所示。使用特异性引物对待测植株进行PCR扩增，根据扩增产物是否含有所述分子标记来判断植株是否含有Np基因。该分子标记的特异性引物对的序列如SEQ No.2和SEQ No.3所示。本发明所述的分子标记可用于筛选新的抗烟草花叶病毒种质资源。
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公开(公告)号：CN108642206A
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201810434959.4
申请日：2018-05-09
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种烟草赤星病抗性相关的QTL及其定位方法与应用。所述的烟草赤星病抗性相关的QTL由2个组成，1个位于第20号连锁群上的SSR标记TMs 05179和TMs 04022之间，1个位于第23号连锁群上的SSR标记TM 61049和TM 62212之间，两者一起解释了两亲本间~81%的病情指数差异及~64%的加性效应。应用为所述的烟草赤星病抗性相关的QTL在烟草抗赤星病的分子标记辅助育种中的应用。本发明利用抗、感烟草赤星病品种Beinhart 1000-1和红花大金元衍生的F2作图群体构建一张高质量雪茄烟遗传连锁图谱，并结合组培快繁形成的F2株系的田间赤星病病情指数进行全基因组QTL定位分析，检测获得与烟草赤星病抗性相关的QTLs，为开展烟草抗赤星病的分子标记辅助育种工作奠定基础。
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