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公开(公告)号：CN110305884B
公开(公告)日：2022-11-04
申请号：CN201910716797.8
申请日：2019-08-05
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
摘要： 本发明公开了一种提高烟草叶片茉莉酸含量的基因NtAOS1及其克隆方法与应用。所述的能提高烟草茉莉酸含量的NtAOS1的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；采用核酸干扰（RNAi）技术，设计了1段干扰片段，采用gateway技术构建了植物表达载体并转化烟草，采用qPCR技术挑选NtAOS1基因转录水平显著降低转基因植株。茉莉酸含量检测表明：NtAOS1基因表达水平降低反而造成其茉莉酸含量显著高于野生型对照。本发明为NtAOS1基因及其编码蛋白应用于烟草抗逆育种与后续烟草中茉莉酸合成代谢途径的研究提供了材料基础。
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公开(公告)号：CN109439669B
公开(公告)日：2022-03-29
申请号：CN201811369666.9
申请日：2018-11-17
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
摘要： 本发明公开了一种烟草砷转运基因NtNIP7‑1及其克隆方法与应用，烟草砷转运基因NtNIP7‑1核苷酸序列如SEQ ID：No.1所示，编码的氨基酸序列如SEQ ID：No.2所示。本发明还公开了烟草砷转运基因NtNIP7‑1的克隆方法，具体步骤包括：提取烟草RNA，反转录得到第一链cDNA；以反转录得到的第一链cDNA作为模板，根据NtNIP7‑1基因序列设计合成特异性引物，进行PCR扩增，回收和纯化PCR扩增产物，并测序。本发明中，在烟草植株内抑制烟草内源基因NtNIP7‑1的表达，会使烟草烟叶的砷含量明显降低，在植物低砷含量育种领域具有广阔的应用前景，其经济效益潜力巨大。
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公开(公告)号：CN107815454B
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN201711217958.6
申请日：2017-11-28
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
摘要： 本发明公开了一种烟草开花期调控基因NtMADS1及其克隆方法与应用。所述烟草开花期调控基因NtMADS1包含的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；其编码的多肽包含的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。在烟草中敲低NtMADS1基因的表达可提前烟草的开花期，另外，通过比对NtMADS1多肽序列，寻找相同功能的同源基因，并利用VIGS技术验证同源基因的功能。因此，NtMADS1基因具有广阔的应用前景。本发明的烟草开花期调控基因为烟草优化开花时期育种提供基因与技术的支持。
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公开(公告)号：CN112094864A
公开(公告)日：2020-12-18
申请号：CN202011032661.4
申请日：2020-09-27
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
摘要： 利用烟草细胞色素C基因NtCYP94B3s提高烟草叶片数与生物量的方法，所述烟草细胞色素C基因NtCYP94B3s的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示，方法是先构建植物RNAi载体。然后鉴定农杆菌介导的烟草转化及转基因植株，之后提取野生型植株和25株转pHellsgate12的RNA基因T0代植株的总RNA，进行Real time‑PCR分析，内参基因为26s，分析不同株系的表达情况，选取表达量最低的2株植株。本发明中，在烟草植株内抑制烟草内源基因NtCYP94B3s的表达会使烟草叶片数及生物量明显提高。该方法具有广阔的应用前景，经济效益潜力巨大。
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公开(公告)号：CN110393147A
公开(公告)日：2019-11-01
申请号：CN201910723876.1
申请日：2019-08-07
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
摘要： 通过筛选烟草根系快速获得高烟碱烟草突变体的方法，将烟草云烟87突变二代种子和云烟87对照种子分别点播，待云烟87对照种子长出两片真叶时，将云烟87突变二代材料与云烟87对照材料幼苗拔出洗净比对根系，筛选出具有更加发达根系的突变体材料KH65并培养移栽，待烟株成熟后按照上、中、下部烟叶取样测定单株KH65的烟碱含量，待KH65烟株开花，自交收种，于第二年再次播种，再次鉴定突变体材料的根系情况，待烟株成熟后再次取样测定单株成熟突变体材料的烟碱含量，待成熟突变体烟株生长至开花，自交收种，获得高烟碱烟草突变体。本发明通过筛选烟草EMS突变材料的根系表现，快速的鉴定获得高烟碱含量的烟草突变材料。
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公开(公告)号：CN110305884A
公开(公告)日：2019-10-08
申请号：CN201910716797.8
申请日：2019-08-05
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
摘要： 本发明公开了一种提高烟草叶片茉莉酸含量的基因NtAOS1及其克隆方法与应用。所述的能提高烟草茉莉酸含量的NtAOS1的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；采用核酸干扰（RNAi）技术，设计了1段干扰片段，采用gateway技术构建了植物表达载体并转化烟草，采用qPCR技术挑选NtAOS1基因转录水平显著降低转基因植株。茉莉酸含量检测表明：NtAOS1基因表达水平降低反而造成其茉莉酸含量显著高于野生型对照。本发明为NtAOS1基因及其编码蛋白应用于烟草抗逆育种与后续烟草中茉莉酸合成代谢途径的研究提供了材料基础。
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公开(公告)号：CN109097373A
公开(公告)日：2018-12-28
申请号：CN201811090560.5
申请日：2018-09-19
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
摘要： 本发明公开了一种烟草尼古丁含量调控基因TIFY6B及其克隆方法与应用；所述的烟草尼古丁含量调控基因TIFY6B核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；克隆方法包括烟草叶片cDNA合成：提取烟草叶片总RNA，反转录得到第一链cDNA；TIF6B基因的PCR扩增：以烟草叶片cDNA为模板，根据TIFY6B基因序列设计引物，进行PCR扩增，回收和纯化PCR扩增产物，并测序。应用为所述的烟草尼古丁含量调控基因TIFY6B在获得高尼古丁含量的转基因烟草植株中的应用。本发明在烟草植株内抑制TIFY6B基因的表达，可以明显提高烟叶中尼古丁的含量，在实际生产中拥有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN108300717A
公开(公告)日：2018-07-20
申请号：CN201810141854.X
申请日：2018-02-11
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
IPC分类号： C12N15/11 , C12Q1/6895 , C12Q1/6869
摘要： 本发明公开了一种特异性引物对，所述特异性引物对的上游引物序列如SEQ No.1所示，下游引物序列如SEQ No.2所示。本发明还提供一种所述引物对在鉴定卷烟植物源性成分中的应用及其应用方法。所述方法包括提取待测食品卷烟总DNA，PCR扩增、克隆与测序、确定成分等步骤。利用本发明所述特异性引物对和PCR技术，能够快速、准确、灵敏地检测卷烟植物源性成分，并可在生产现场应用。
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公开(公告)号：CN108192897A
公开(公告)日：2018-06-22
申请号：CN201810143029.3
申请日：2018-02-11
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
IPC分类号： C12N15/29 , C12Q1/6895
摘要： 本发明公开了一种烟草rbcl基因片段，所述rbcl基因片段序列如SEQ No.1所示。所述烟草rbcl基因片段可用于鉴定烟草成分，即将所述rbcl基因片段作为烟草成分标记，在成分分析中若检测出相同序列片段，就说明成分组成中存在烟草。
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公开(公告)号：CN107815454A
公开(公告)日：2018-03-20
申请号：CN201711217958.6
申请日：2017-11-28
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
CPC分类号： C07K14/415 , C12N15/827
摘要： 本发明公开了一种烟草开花期调控基因NtMADS1及其克隆方法与应用。所述烟草开花期调控基因NtMADS1包含的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；其编码的多肽包含的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。在烟草中敲低NtMADS1基因的表达可提前烟草的开花期，另外，通过比对NtMADS1多肽序列，寻找相同功能的同源基因，并利用VIGS技术验证同源基因的功能。因此，NtMADS1基因具有广阔的应用前景。本发明的烟草开花期调控基因为烟草优化开花时期育种提供基因与技术的支持。
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