一种遗传分析仪测试专用等位基因标准对照试剂制备方法

    公开(公告)号:CN108085367A

    公开(公告)日:2018-05-29

    申请号:CN201810075586.6

    申请日:2018-01-26

    Abstract: 本发明公开了一种遗传分析仪测试专用等位基因标准对照试剂制备方法,包括:1)进行特定数量生物样本的获取;2)PCR法获得指定位点的系列等位基因;3)核心序列定点突变;4)获得指定位点全部基因克隆载体;5)设计并合成荧光引物;6)等位基因克隆载体浓度条件摸索并进行调平测试;6)多模板荧光复合扩增并检测;7)等位基因标准物扩增制备、纯化、保存。本发明采用克隆技术将特定STR位点系的列等位基因克隆进入选定克隆载体,进而通过多模板复合扩增技术对上述载体进行荧光扩增,实现等位基因标准对照试剂的可持续性制备。

    一种用于毛细管电泳的无胶筛分介质及其制备方法

    公开(公告)号:CN105367693B

    公开(公告)日:2018-02-02

    申请号:CN201510481811.2

    申请日:2015-08-03

    Abstract: 本发明涉及毛细管电泳技术领域,具体涉及一种用于毛细管电泳的无胶筛分介质及其制备方法。本发明提供的一种用于毛细管电泳的无胶筛分介质,包括聚合物单体为丙烯酰胺,溶剂为去离子水,链转移剂是异丙醇,引发剂是过硫酸铵,催化剂是N,N,N,N‑四甲基二乙胺混合物。本发明提供用于毛细管电泳的无胶筛分介质的制备方法将聚合物单体、溶剂、链转移剂、引发剂和催化剂混合经透析步骤、冷冻干燥之后在溶胶缓冲液中进行溶胀,筛分介质是聚丙烯酰胺。本发明制备的筛分介质具有良好的筛分性能、溶解能力和高亲水性,有效减少DNA与毛细管管壁之间的吸附作用,具有高分子量、低粘度,便于注入和更换介质,利于DNA分析和分离的自动化,能满足法医STR分析检测的要求。

    一种利用定点突变及酶切技术制备荧光分子量内标的方法

    公开(公告)号:CN106868001A

    公开(公告)日:2017-06-20

    申请号:CN201710228420.9

    申请日:2017-04-10

    Abstract: 本发明公开了一种利用定点突变及酶切技术制备荧光分子量内标的方法,包括步骤:将目的DNA片段A克隆进质粒载体,得到重组质粒B;以重组质粒B为模板,在DNA片段A的不同长度位置分别进行定点突变,引入限制性酶切位点,并得到相应的重组质粒C;设计DNA片段A的扩增引物F1、R1,并分别在引物5’端进行荧光标记;利用扩增引物F1、R1扩增重组质粒C,得到扩增产物D,将产物D进行纯化;利用限制性内切酶酶切纯化后的扩增产物D,得到酶切产物E,即荧光分子量内标。利用本发明方法可以实现制备从50bp到500bp共14个片段的分子量内标,产物没有引物峰等杂峰,且工艺适用于规模化生产。

    一种八色荧光光谱校准试剂及其制备方法

    公开(公告)号:CN113736779A

    公开(公告)日:2021-12-03

    申请号:CN202111127769.6

    申请日:2021-09-26

    Abstract: 本发明公开了一种八色荧光光谱校准试剂及其制备方法,采用人工设计合成的8个模板DNA,每个模板DNA模板分别包含1对引物的结合位点,并根据每个片段的预设长度,可实现片段长度与荧光精确控制。每对引物中的上游引物的5’端分别采用8种不同荧光标记,在一个特定反应体系内进行复合扩增,可同时获得含有八种荧光产物的荧光光谱校准试剂,无需进行单色荧光片段的混合和调配即可直接应用于荧光光谱校准。该方法极大的简化了荧光标准物的制备工艺流程,避免了复杂繁琐的操作。本发明的制备方法可以稳定的获得该标准物质,具有效率高,操作简便的特点。

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