公开(公告)号：CN115772552A

公开(公告)日：2023-03-10

申请号：CN202210922716.1

申请日：2022-08-02

Applicant: 内蒙古农业大学

Inventor： 陈忠军 ,  刘瑾 ,  孙子羽 ,  满都拉 ,  王帅 ,  金晶晶 ,  董晶 ,  刘亚茹 ,  梁家玮

IPC: C12Q1/04 ,  C12Q1/34 ,  C12N15/77 ,  C12N15/56 ,  C12N1/21 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明提供一种高效的利用蓝斑筛选的基因敲除方法，首先构建插入基因lacZ和目的基因上下同源臂的质粒，将重组质粒转化入目标菌株的感受态细胞进行一次筛选和二次筛选，挑选在含有X‑gal和蔗糖的LB平板上生长且变蓝色，且在含卡那霉素的LB抗性平板上不生长的单菌落，所得单菌落经PCR验证正确即为成功敲除目的基因的目的菌株。与现有同源重组技术相比，本发明从敲除菌株的初次筛选到二次筛选通过蓝斑表型筛选有效提高了筛选概率。当要选择在蔗糖平板上生长而在卡那霉素平板上未生长的单菌落进行验证时，本发明通常在对点50个以内单菌落即可获得阳性菌株。

公开(公告)号：CN116063380A

公开(公告)日：2023-05-05

申请号：CN202211207681.X

申请日：2022-09-30

Applicant: 内蒙古农业大学

Inventor： 陈忠军 ,  满都拉 ,  孙子羽 ,  王帅 ,  刘瑾 ,  董晶 ,  杜旭婷 ,  岳子尧

IPC: C07K7/06 ,  C07K1/14 ,  C07K1/34 ,  C07K1/22 ,  C07K1/16 ,  C07K1/36 ,  A23L3/3526

Abstract: 本发明提供一种分离自副干酪乳杆菌的抗真菌肽，所述抗真菌肽是由副干酪乳杆菌ALAC‑4产生的，该菌株保藏号为CGMCC No.15548。所述抗真菌肽含有肽段APTs和APTft，所述肽段APTs的氨基酸序列如SEQ No.1所示，所述肽段APTft的氨基酸序列如SEQ No.2所示。本发明的抗真菌肽用于抑制白假丝酵母菌、黑曲霉和/或青霉。本发明制备得到的高纯度乳杆菌源抗真菌肽具有较小分子量和特定氨基酸序列，能够有效抑制真菌生长繁殖，因此在食品和饲料领域中具有很广阔的应用前景。