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公开(公告)号：CN112553349A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN202110056027.2
申请日：2021-01-15
Applicant: 内蒙古农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种呼伦贝尔短尾羊纯合子、杂合子的鉴定引物、探针、试剂盒，并提供了一种基于该引物及探针的鉴别呼伦贝尔短尾羊纯合子和杂合子的方法。所述方法包括如下步骤：(1)提取呼伦贝尔短尾羊血液基因组DNA并稀释；(2) 对步骤(1)获得的DNA进行taqman SNP荧光探针qPCR；（3）产物检测。通过taqman SNP荧光探针qPCR，能够快速分辨出呼伦贝尔短尾羊纯合子与杂合子。本发明作为呼伦贝尔短尾羊基因分型的手段之一，鉴定方法操作简便，重复性好，反应时间短，具有极高的灵敏性和特异性。
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公开(公告)号：CN108531492A
公开(公告)日：2018-09-14
申请号：CN201810364987.3
申请日：2018-04-23
Applicant: 内蒙古农业大学
Abstract: 本发明提供了一种利用类弹性蛋白elp构建活性绵羊β-防御素sbd-1体外表达的方法，属分子生物学领域，是通过 RT-PCR得到克隆了编码sbd-1的成熟肽全基因序列，与elp相连后，克隆入原核表达载体pet-22b中，构成表达载体pet-22b-elp-sbd-1；利用大肠杆菌偏爱密码子和 Gen Script rare codon analysis 软件获得优化密码子优化的elp-sbd-1基因序列并人工合成该基因，将重组载体转化BL21(DE3)大肠杆菌，IPTG诱导融合蛋白表达，利用ITC对其纯化，成功获得绵羊β-防御素sbd-1。本发明的优点是：利用类弹性蛋白elp具有温度敏感的可逆相变特性，用离心等简单方法分离纯化，作为重组蛋白的纯化标签,为代替抗生素提供理论基础，对大量生产β-防御素sbd-1提供方法依据。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108531493A
公开(公告)日：2018-09-14
申请号：CN201810365031.5
申请日：2018-04-23
Applicant: 内蒙古农业大学
Abstract: 一种利用小泛素相关修饰物SUMO体外表达绵羊β-防御素的方法，利用SUMO融合技术通过RT-PCR扩增蒙古绵羊β防御素sbd -1基因，与SUMO相连后,连入Pet-22b中，获得pet-22b-SUMO-sbd-1重组质粒，转入到大肠杆菌BL21(DE3)细胞表达，成功构建pet-22b-SUMO-sbd-1重组载体，将表达产物通过超声破碎,脱盐,亲和层析,浓缩,SUMO酶切,冷冻干燥后,将其分别作用于大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，通过抑菌实验证明，sbd-1对大肠杆菌BL21能形成抑菌环，并且抑菌作用与浓度相关，最终得到了绵羊β-防御素sbd-1，为下一步代替抗生素提供理论基础,以及对大量生产β-防御素(sbd-1)提供方法依据
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公开(公告)号：CN108384859A
公开(公告)日：2018-08-10
申请号：CN201711476654.1
申请日：2017-12-29
Applicant: 内蒙古农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 一种与脂尾型绵羊的尾型性状相关的SNP标记及应用，属生物领域，该SNP标记位于绵羊第8号染色体第87804589碱基对，该位置碱基为T的绵羊具有短尾性状，此处碱基为G时拥有正常尾长。本发明还提供了检测SNP标记的引物及含有该引物的试剂盒，采用聚合酶链式反应(PCR)和测序技术筛选到与脂尾型绵羊尾型性状相关的SNP标记，并通过限制片段多态性(RFLP)方法来检测待测绵羊的基因型。及SNP标记在鉴定脂尾型绵羊尾型性状中的应用和在中国绵羊育种中的应用。根据基因型进行脂尾型绵羊尾型性状优势品种的选育,从而加快脂尾型绵羊的育种进程
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公开(公告)号：CN112899375A
公开(公告)日：2021-06-04
申请号：CN202110356310.7
申请日：2021-04-01
Applicant: 内蒙古农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/683 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种鉴别呼伦贝尔短尾羊纯杂合个体的PCR‑RFLP方法及引物，利用Bci T130I限制性内切酶的特异性识别位点进行基因分型，以样本基因组DNA为模板，扩增呼伦贝尔短尾羊Brachyury/T基因，所扩增基因长度为203bp。上游引物所在Brachyury/T基因的95879504位点至95879486位点，下游引物位置为95879302位点至95879323位点；将PCR产物进行纯化后使用Bci T130I进行酶切；对酶切产物进行1.5％琼脂糖凝胶电泳观察结果，有着明显两条条带为纯合呼伦贝尔短尾羊，明显三条条带的为杂合呼伦贝尔短尾羊。本发明操作简便、反应不需要额外的分析步骤，并通过条带数量准确分型出纯、杂合基因型，酶切体系和时间不会引起Bci T130I酶的星活性。
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公开(公告)号：CN108384859B
公开(公告)日：2021-09-24
申请号：CN201711476654.1
申请日：2017-12-29
Applicant: 内蒙古农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 一种与脂尾型绵羊的尾型性状相关的SNP标记及应用，属生物领域，该SNP标记位于绵羊第8号染色体第87804589碱基对，该位置碱基为T的绵羊具有短尾性状，此处碱基为G时拥有正常尾长。本发明还提供了检测SNP标记的引物及含有该引物的试剂盒，采用聚合酶链式反应(PCR)和测序技术筛选到与脂尾型绵羊尾型性状相关的SNP标记，并通过限制片段多态性(RFLP)方法来检测待测绵羊的基因型。及SNP标记在鉴定脂尾型绵羊尾型性状中的应用和在中国绵羊育种中的应用。根据基因型进行脂尾型绵羊尾型性状优势品种的选育,从而加快脂尾型绵羊的育种进程。
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公开(公告)号：CN112251519A
公开(公告)日：2021-01-22
申请号：CN202011381246.X
申请日：2020-12-01
Applicant: 内蒙古农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种鉴定呼伦贝尔短尾羊纯合子、杂合子的特异性引物、探针及试剂盒，并提供了一种基于非标记探针高分辨率熔解曲线的呼伦贝尔短尾羊群体中纯合子、杂合子个体的鉴定方法。通过设计的非标记探针放大了纯合子和杂合子之间熔解曲线Tm值信号差异，取代传统测序，作为呼伦贝尔短尾羊基因分型的手段之一。本发明的鉴定方法操作简便，反应时间短，具有极高的灵敏性和特异性，可检测出呼伦贝尔羊群体中纯合子、杂合子个体。
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