利用类弹性蛋白elp构建活性绵羊β-防御素sbd-1体外表达的方法

    公开(公告)号:CN108531492A

    公开(公告)日:2018-09-14

    申请号:CN201810364987.3

    申请日:2018-04-23

    Abstract: 本发明提供了一种利用类弹性蛋白elp构建活性绵羊β-防御素sbd-1体外表达的方法,属分子生物学领域,是通过 RT-PCR得到克隆了编码sbd-1的成熟肽全基因序列,与elp相连后,克隆入原核表达载体pet-22b中,构成表达载体pet-22b-elp-sbd-1;利用大肠杆菌偏爱密码子和 Gen Script rare codon analysis 软件获得优化密码子优化的elp-sbd-1基因序列并人工合成该基因,将重组载体转化BL21(DE3)大肠杆菌,IPTG诱导融合蛋白表达,利用ITC对其纯化,成功获得绵羊β-防御素sbd-1。本发明的优点是:利用类弹性蛋白elp具有温度敏感的可逆相变特性,用离心等简单方法分离纯化,作为重组蛋白的纯化标签,为代替抗生素提供理论基础,对大量生产β-防御素sbd-1提供方法依据。

    一种基于葡萄糖与谷氨酰胺水平测试的体外胚胎发育潜力预测评估技术

    公开(公告)号:CN114875108A

    公开(公告)日:2022-08-09

    申请号:CN202210645397.4

    申请日:2022-06-08

    Abstract: 本发明公开了一种基于葡萄糖与谷氨酰胺水平测试的体外胚胎发育潜力预测评估技术。在体外受精胚胎单滴单胚培养过程中,分别于体外培养0、48和/或96小时时,利用高灵敏度微型光纤传感器对培养液中葡萄糖与谷氨酰胺含量进行测定;同时,观察并记录体外培养48h、168h与217h时卵裂胚、囊胚与孵化囊胚形成情况,研究单胚发育能力与葡萄糖、谷氨酰胺消耗水平的关联性,最终构建能预测胚胎后续发育能力优劣的能量底物评估体系。本发明创造性地将光纤传感检测技术与体外授精技术相结合,通过测定早期胚胎发育过程中两种关键能量底物葡萄糖与谷氨酰胺消耗水平,对相应胚胎后续发育能力展开评估,实现了对优质胚胎的早期筛选与生产利用。

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