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公开(公告)号：CN118374435A
公开(公告)日：2024-07-23
申请号：CN202410643505.3
申请日：2024-05-23
申请人： 北京三元食品股份有限公司 , 内蒙古大学
IPC分类号： C12N5/074
摘要： 本发明公开了一种牛乳源的干细胞及其分离培养方法。其中的分离培养方法包括以下步骤（1）取新鲜牛乳，分离获得牛乳中的细胞；（2）将培养皿提前用基质胶包被，后弃液，然后用清洗液清洗，弃液；（3）将步骤（1）处理的细胞接种于包被好的培养皿上，用干细胞培养基培养；（4）当细胞融合至80%以上时，用消化酶消化，终止消化，分离细胞，用CTFR培养液重悬后接种于饲养层细胞上培养，促进克隆形成，传代培养获得牛乳干细胞。本发明首次从牛乳中分离、培养得到干细胞，可以更好的维持牛乳干细胞未分化状态，得到的干细胞具有OCT4、SOX2、NANOG、SSEA4标志物。为进行牛细胞诱导分化提供一种新的干细胞类型。
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公开(公告)号：CN118374435B
公开(公告)日：2024-09-17
申请号：CN202410643505.3
申请日：2024-05-23
申请人： 北京三元食品股份有限公司 , 内蒙古大学
IPC分类号： C12N5/074
摘要： 本发明公开了一种牛乳源的干细胞及其分离培养方法。其中的分离培养方法包括以下步骤（1）取新鲜牛乳，分离获得牛乳中的细胞；（2）将培养皿提前用基质胶包被，后弃液，然后用清洗液清洗，弃液；（3）将步骤（1）处理的细胞接种于包被好的培养皿上，用干细胞培养基培养；（4）当细胞融合至80%以上时，用消化酶消化，终止消化，分离细胞，用CTFR培养液重悬后接种于饲养层细胞上培养，促进克隆形成，传代培养获得牛乳干细胞。本发明首次从牛乳中分离、培养得到干细胞，可以更好的维持牛乳干细胞未分化状态，得到的干细胞具有OCT4、SOX2、NANOG、SSEA4标志物。为进行牛细胞诱导分化提供一种新的干细胞类型。
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公开(公告)号：CN118291415A
公开(公告)日：2024-07-05
申请号：CN202410291699.5
申请日：2024-03-14
申请人： 内蒙古大学
摘要： 本发明涉及一种CRISPR::Cr‑P300M巴豆酰化修饰编辑工具及其应用。所述巴豆酰化修饰编辑工具包括：dCas9和P300突变体的融合蛋白以及sgRNA，所述P300突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，所述sgRNA靶向成肌标志基因MYOG和MYMK的转录起始位点，所述sgRNA的核苷酸序列为：sg‑MYOG‑Bos如SEQ ID NO：3所示；sg‑MYMK‑Bos如SEQ ID NO：4所示；sg‑MYOG‑Mus如SEQ ID NO：5所示；sg‑MYMK‑Mus如SEQ ID NO：6所示。该工具通过增加靶基因的巴豆酰化修饰促进转录及翻译，分别对BMSC和C2C12细胞的成肌标志基因MYOG和MYMK的转录起始位点进行定点巴豆酰化修饰编辑，可以上调基因表达并促进肌管分化。
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公开(公告)号：CN111718892B
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN202010610067.2
申请日：2020-06-29
申请人： 内蒙古大学
IPC分类号： C12N5/073
摘要： 本发明公开了一种提高牛体外胚胎培养效率和质量的培养液及方法，属于家畜胚胎工程技术领域。提高牛体外胚胎培养效率和质量的培养液为在SOF培养液的基础上添加体积分数5‑10％的胎牛血清，并且添加如下微量元素：五水硫酸铜，七水硫酸锌，亚硒酸钠，一水硫酸锰，柠檬酸铁，钼酸铵，偏钒酸铵，六水硫酸镍，氯化亚锡。使用该培养液进行牛体外受精胚胎或牛体细胞核移植胚胎的培养可有效提高牛体外胚胎培养效率和质量。
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公开(公告)号：CN110396548A
公开(公告)日：2019-11-01
申请号：CN201810373259.9
申请日：2018-04-24
申请人： 内蒙古大学 , 赤峰圣泉生态牧业有限公司 , 中育生物科技有限公司
IPC分类号： C12Q1/6888 , C12N15/11
摘要： 本发明提供的一种蒙古牛不同群体鉴定的SNP分子标记组合包含100个分布于29条常染色体上的SNP标记，同一染色体上相邻SNP标记的平均距离为24M。该标记组合的最小等位基因频率(MAF)、期望杂合度(HExp)、多态信息含量(PIC)的平均值分别为0.4847、0.4998、0.3749；累计排除概率为0.9996。本发明的SNP标记组合可用于蒙古牛完整、准确的系谱鉴定，可提高了蒙古牛各群体遗传多样性，加强了蒙古牛保种及遗传进展，具有良好的应用前景和经济效益。
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公开(公告)号：CN109402264A
公开(公告)日：2019-03-01
申请号：CN201810373235.3
申请日：2018-04-24
申请人： 内蒙古大学 , 内蒙古小黑头羊牧业有限责任公司
IPC分类号： C12Q1/6888 , C12N15/11
CPC分类号： C12Q1/6888 , C12Q2600/124 , C12Q2600/156
摘要： 本发明公开了利用GDF9基因提高苏尼特羊繁殖力的方法，是检测待测苏尼特羊基因组中的GDF9基因的启动子上游118位点的核苷酸，从而确定苏尼特羊的基因型,然后通过基因型确定苏尼特羊繁殖力，如果苏尼特羊基因组中的GDF9基因编码区启动子上游第118位核苷酸为T时，其纯合体的基因型为TT；苏尼特羊基因组中的基因编码区启动子上游第118位核苷酸为G时，其纯合体的基因型为GG，它们的杂合体基因型为TG；实验证明GG基因型苏尼特羊的平均产羔数高于GT基因型，基因型GT苏尼特羊的平均产羔数高于TT型。本发明利用PCR-RFLP迅速、简便的检测分子标记多态性，为利用分子标记辅助育种技术提高苏尼特羊繁殖力，提供了一个准确简便的方法。
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公开(公告)号：CN102653773B
公开(公告)日：2015-01-14
申请号：CN201210126079.3
申请日：2012-04-26
摘要： 本发明公开了一种牛乳腺特异性表达载体pBC-αs1及制备方法。本发明构建了一个可使目的基因在牛乳腺中特异性表达的载体pBC-αs1，通过在pcDNA3.1中插入pBC1中的绝缘子基因片段来防止其他基因或调控信号对目的基因的影响及异染色质的形成；通过在pcDNA3.1中插入牛α酪蛋白的调控基因片段来使目的基因在牛乳腺中特异性表达；通过构建两个酶切位点来控制目的基因的方向性，本发明实现了表达的高效性，并且通过Cre-LoxP重组酶系统可以在细胞水平上用Cre重组酶表达质粒转染中靶细胞删除抗性标记基因，通过绝缘子防止其它基因或调控信号对目的基因的影响及异染色质的形成。
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公开(公告)号：CN102653773A
公开(公告)日：2012-09-05
申请号：CN201210126079.3
申请日：2012-04-26
摘要： 本发明公开了一种牛乳腺特异性表达载体pBC-αs1及制备方法。本发明构建了一个可使目的基因在牛乳腺中特异性表达的载体pBC-αs1，通过在pcDNA3.1中插入pBC1中的绝缘子基因片段来防止其他基因或调控信号对目的基因的影响及异染色质的形成；通过在pcDNA3.1中插入牛α酪蛋白的调控基因片段来使目的基因在牛乳腺中特异性表达；通过构建两个酶切位点来控制目的基因的方向性，本发明实现了表达的高效性，并且通过Cre-LoxP重组酶系统可以在细胞水平上用Cre重组酶表达质粒转染中靶细胞删除抗性标记基因，通过绝缘子防止其它基因或调控信号对目的基因的影响及异染色质的形成。
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