公开(公告)号：CN106674354B

公开(公告)日：2020-10-16

申请号：CN201710078269.5

申请日：2017-02-14

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 任涛 ,  丁诗月 ,  谢鹏

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/70 ,  C12N15/62 ,  A61K38/21 ,  A61P31/12

Abstract: 本发明属于一种生物工程技术领域干扰素融合制剂鸡λ、α干扰素基因融合表达及其生产方法和临床应用。该生物工程干扰素融合制剂通过提取CEF细胞总RNA，设计特异性引物，克隆鸡λ、α干扰素基因，通过互补疏水性柔性氨基酸接头将其融合，获得完整的鸡λ、α干扰素融合基因，将其克隆至19‑T载体使其大量克隆表达成功后，再使其连接pET‑32a载体大量表达；对产物鉴定，确定其在包涵体表达后，进行变性，纯化及复性；对其抗病毒活性检测以及临床应用效果评价。本发明成功构建了重组融合鸡λ、α干扰素原核表达质粒pET32a‑chIFN‑λ+α，实现了鸡λ、α干扰素在大肠杆菌原核表达系统上1:1融合表达。

公开(公告)号：CN106892976A

公开(公告)日：2017-06-27

申请号：CN201710078270.8

申请日：2017-02-14

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 任涛 ,  丁诗月 ,  谢鹏 ,  戴旭 ,  陈礼斌

IPC: C07K14/57 ,  C12N15/70 ,  A61K38/21 ,  A61P31/14 ,  A61P31/16

CPC classification number: C07K14/57 ,  A61K38/00 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域中的干扰素领域，具体涉及一种重组鸡干扰素λ(rChIFN‑λ)基因的克隆表达及其制备方法和应用。将重组鸡干扰素λ(rChIFN‑λ)基因从POLY(I:C)刺激的CEF细胞所制得的模板中提取出来，克隆至pET32a表达载体，获得重组质粒pET32a‑rChIFN‑λ；将pET32a‑rChIFN‑λ重组质粒转化至BL21感受态，扩大培养，将包涵体变型、纯化与复性后，制得所需重组鸡干扰素λ(rChIFN‑λ)蛋白。

公开(公告)号：CN106674354A

公开(公告)日：2017-05-17

申请号：CN201710078269.5

申请日：2017-02-14

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 任涛 ,  丁诗月 ,  谢鹏

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/70 ,  C12N15/62 ,  A61K38/21 ,  A61P31/12

Abstract: 本发明属于一种生物工程技术领域干扰素融合制剂鸡λ、α干扰素基因融合表达及其生产方法和临床应用。该生物工程干扰素融合制剂通过提取CEF细胞总RNA，设计特异性引物，克隆鸡λ、α干扰素基因，通过互补疏水性柔性氨基酸接头将其融合，获得完整的鸡λ、α干扰素融合基因，将其克隆至19‑T载体使其大量克隆表达成功后，再使其连接pET‑32a载体大量表达；对产物鉴定，确定其在包涵体表达后，进行变性，纯化及复性；对其抗病毒活性检测以及临床应用效果评价。本发明成功构建了重组融合鸡λ、α干扰素原核表达质粒pET32a‑chIFN‑λ+α，实现了鸡λ、α干扰素在大肠杆菌原核表达系统上1:1融合表达。